血清HCY，CysC和NT-proBNP檢測(cè)在急性腦梗死診斷及預(yù)后中的應(yīng)用研究*

趙 曼，趙 雅，王 禺，李 寧，張 瑩，王 萌

(西安市第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，西安 710002)

急性腦梗死與心臟病、惡性腫瘤是目前危害人類(lèi)健康的三大致死性疾病[1]。急性腦梗死(acute cerebral infarction，ACI)是急性缺血性腦血管疾病，具有發(fā)病率高、致殘率高、死亡率高、預(yù)后差等特點(diǎn)，嚴(yán)重威脅人類(lèi)的健康，是中老年人的常見(jiàn)病和多發(fā)病[2]。目前，ACI已成為臨床治療的一大難題。為了盡量減少ACI發(fā)病率和死亡率，尋求新的診斷方法及愈后效果判斷的有效指標(biāo)迫在眉睫。診斷ACI的方法和手段諸多，目前仍以CT、核磁共振成像(MRI)等技術(shù)為主[3]，MRI是目前最重要的輔助檢查之一，主要是超早期檢測(cè)(如ACI數(shù)分鐘后)發(fā)現(xiàn)異常。以上方法由于操作繁瑣、費(fèi)用昂貴、對(duì)人身體傷害大等缺點(diǎn)，給患者帶來(lái)創(chuàng)傷和痛苦，同時(shí)也因檢驗(yàn)者主觀判斷上的差異而影響結(jié)果[4]。此外，血清中檢測(cè)相關(guān)標(biāo)志物的方法在臨床上逐漸受到重視，包括空腹血糖、D-二聚體等，但這些標(biāo)志物靈敏度和特異度較差。臨床迫切需要尋找新的標(biāo)志物組合能夠用于ACI疾病的鑒別診斷，發(fā)展監(jiān)控，治療效果判斷。通過(guò)我們課題組的前期相關(guān)研究及文獻(xiàn)資料[5]發(fā)現(xiàn)ACI患者血清中的HCY，CysC和NT-proBNP有不同程度的升高，因此本研究試圖通過(guò)檢測(cè)ACI患者的血清HCY，CysC和NT-proBNP濃度，探討其在ACI發(fā)病診斷及治療中的應(yīng)用價(jià)值及臨床意義。

1材料與方法

1.1 研究對(duì)象 收集所有ACI患者的人口學(xué)資料和病史資料，主要包括年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)、高血壓、糖尿病、冠心病發(fā)生情況、吸煙飲酒等。所有納入對(duì)象在入院24 h內(nèi)采用中國(guó)腦卒中量表(CSS)評(píng)價(jià)神經(jīng)功能缺損情況，并記錄評(píng)分。研究對(duì)象分兩組，第一組，急性腦梗死組選擇西安市第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的ACI患者300例，其中男性154例，女性146例，平均年齡67.97±18.63歲。急性腦梗死的納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合第四屆全國(guó)腦血管病會(huì)議制定的急性腦梗死診斷標(biāo)準(zhǔn)；②均為首次診斷的患者，經(jīng)顱腦CT或MRI確診；③均在發(fā)病24 h內(nèi)入院。排除標(biāo)準(zhǔn)：①年齡超過(guò)80歲；②曾有短暫性腦缺血發(fā)作、顱腦外傷、腦卒中史；③患有其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病、心絞痛、心律失常、心力衰竭、心肌梗死以及惡性腫瘤史。第二組，健康對(duì)照組選擇正常健康體檢者50例。同時(shí)取到50例ACI患者發(fā)病期、治療期及愈后期(愈后一年后)的血樣，將其分為發(fā)病組、治療組和預(yù)后組對(duì)其HCY，NT-proBNP進(jìn)行測(cè)定。

1.2 方法 所有研究對(duì)象均于(其中ACI患者于入院后次日)清晨空腹抽靜脈血3 ml置干燥管中。血清分離后進(jìn)行HCY，CysC和NT-proBNP測(cè)定，HCY采用美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司BECKMAN COULTER Chemistry Analyzer AU5800及配套試劑進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定方法為酶循環(huán)法；CysC采用膠乳免疫比濁法。NT-proBNP采用Cobase601電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定方法為化學(xué)發(fā)光免疫法。以上檢測(cè)均在2 h內(nèi)完成。

2結(jié)果

2.1 急性腦梗死組血清HCY，CysC和NT-proBNP測(cè)定結(jié)果 見(jiàn)表1。納入患者300例，男性患者血清HCY值與女性患者比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.659，P<0.05)。

表1 急性腦梗死組血清HCY，CysC和NT-proBNP測(cè)定結(jié)果

2.2 健康對(duì)照組血清HCY，CysC和NT-proBNP測(cè)定結(jié)果 見(jiàn)表2。正常體檢者為50例，年齡<60歲者其血清HCY值與年齡≥60歲者相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.066，P<0.05)；年齡<60歲者其血清CysC值與年齡≥60歲者相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.81，P<0.05)。

2.3 急性腦梗死組與健康對(duì)照組血清HCY，CysC和NT-proBNP測(cè)定結(jié)果 急性腦梗死組血清HCY，CysC和NT-proBNP值與健康對(duì)照組比較(20.23±16.40 μmol/L vs 17.56±4.93 μmol/L，1.88±1.22 mg/L vs 1.14±0.83 mg/L，189.6±92.4 pg/ml vs 88.8±66.7 pg/ml)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.267，P=0.024；t=4.143，P=0.000；t=7.39，P=0.004)。

表2 健康對(duì)照組血清HCY，CysC，NT-proBNP測(cè)定結(jié)果

2.4 ACI患者不同時(shí)間階段血清HCY，NT-proBNP測(cè)定結(jié)果 ACI患者發(fā)病組血清HCY值與治療組比較(27.33±21.94 μmol/L vs 20.06±10.70 μmol/L)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.27，P=0.029)。ACI患者發(fā)病組血清NT-proBNP值與治療組比較(234.33±51.08 pg/ml vs 167.38±35.70 pg/ml)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=5.52，P=0.012)；ACI患者發(fā)病組血清NT-proBNP值與愈后組比較(234.33±51.08 pg/ml vs 103.51±25.81 pg/ml)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.78，P=0.036)。

3討論近年來(lái)，我國(guó)ACI發(fā)病率和死亡率均呈快速增長(zhǎng)趨勢(shì)，因此ACI的診斷尤其是早期診斷，對(duì)于積極采取有效地治療措施、減少死亡率及患者的早期治療、良好的預(yù)后起著決定性的作用，具有重要的臨床意義。

HCY[6]是一種含硫非必需氨基酸，是體內(nèi)蛋氨酸循環(huán)脫甲基后的衍生物。它在體內(nèi)主要經(jīng)再甲基化途經(jīng)和轉(zhuǎn)硫途徑進(jìn)行代謝[7]。一般實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)到的為空腹?fàn)顟B(tài)下血清中總HCY水平。諸多研究[8-10]表明，血清HCY水平增高可以增加腦血管病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。也有研究表明，血清總HCY每升高1 μmol/L，腦卒中發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)會(huì)增加7%。另有研究[11]證實(shí)，高水平的HCY可顯著增加癥狀性ACI的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，約有大于40%的ACI患者合并有高HCY。ACI后腦細(xì)胞缺血低氧引起急性腦水腫，顱內(nèi)壓隨之升高，引發(fā)一系列應(yīng)激反應(yīng)，而后腎素、血管緊張素及抗利尿激素合成亢進(jìn)，大量分泌入血，ACI患者易并發(fā)腦內(nèi)臟綜合征導(dǎo)致不同程度腎灌注功能障礙，使腎小球?yàn)V過(guò)率明顯下降，CysC排出明顯減少；加之為降低顱內(nèi)壓應(yīng)用大量利尿脫水藥物，可以導(dǎo)致血液濃縮，血清CysC水平進(jìn)一步升高[12]。有文獻(xiàn)指出血清CysC水平升高是缺血性腦血管病發(fā)病的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子，與ACI發(fā)病密切相關(guān)，并且CysC水平可預(yù)測(cè)ACI復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)但與ACI嚴(yán)重性無(wú)關(guān)[13]。BNP屬于利鈉肽系統(tǒng)，是一種心腦血管類(lèi)的生物標(biāo)記物，具有擴(kuò)管、利尿、抑制酮固醇分泌、抑制交感神經(jīng)活性等作用[14]。ACI患者血漿NT-proBNP水平增高主要原因：①急性缺血性腦卒中患者常伴有高血壓，血壓升高時(shí)，刺激心室壁，引起下丘腦和腦干釋放中樞性BNP，同時(shí)刺激心室肌細(xì)胞分泌外周性的BNP，BNP可通過(guò)RAS系統(tǒng)來(lái)促進(jìn)水和電解質(zhì)排泄，擴(kuò)張血管，增加血管通透性，降低患者的血壓水平，改善腦水腫；②急性缺血缺氧引起中樞神經(jīng)紊亂、繼發(fā)腦水腫，刺激BNP的分泌增高；③患者發(fā)生CI時(shí)亦常常并發(fā)有心功能的損傷[15]。

本實(shí)驗(yàn)將急性腦梗死組患者按照不同年齡分成<60歲人群和≥60歲人群，發(fā)現(xiàn)患者血清HCY，CysC和NT-proBNP值隨著年齡增長(zhǎng)沒(méi)有顯著性改變，而同時(shí)我們發(fā)現(xiàn)50例健康體檢者血清HCY和CysC值隨著年齡的增長(zhǎng)而升高(P<0.05)，這與之前的國(guó)內(nèi)外研究結(jié)果相吻合[16-17]。可見(jiàn)ACI患者HCY不隨年齡增長(zhǎng)而改變，而正常體檢者血清HCY和CysC值與年齡呈正相關(guān)。此外，我們分析ACI男性與女性患者血清HCY，CysC和NT-proBNP時(shí)發(fā)現(xiàn)，男性患者血清HCY值高于女性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，同時(shí)對(duì)健康對(duì)照組血清HCY，CysC和NT-proBNP分析發(fā)現(xiàn)男性血清HCY，CysC和NT-proBNP值與女性比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。由此形成了本研究的第一個(gè)認(rèn)知，患者血清HCY水平與性別有關(guān)，與年齡無(wú)關(guān)，健康體檢者血清HCY，CysC值與年齡有關(guān)，與性別無(wú)關(guān)。具體機(jī)制及結(jié)論的確定及探討還需后續(xù)進(jìn)行研究。

本研究中發(fā)現(xiàn)ACI患者血清HCY，CysC和NT-proBNP值與健康對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。并且ACI患者年齡對(duì)HCY，CysC和NT-proBNP影響較小，因此可以排除年齡因素的干擾，確定ACI患者血清HCY，CysC，NT-proBNP水平高于健康人群。此外，本實(shí)驗(yàn)在數(shù)據(jù)分析時(shí)發(fā)現(xiàn)ACI患者血清HCY，NT-proBNP值在不同時(shí)間段即發(fā)病期、治療期、愈后期水平有差異，發(fā)病期及治療期血清HCY，NT-proBNP值比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即ACI患者合理的治療會(huì)使其血清HCY，NT-proBNP值相應(yīng)下降。隨著時(shí)間推移，HCY，NT-proBNP在治愈一年后均值有所升高與再次患腦梗死有一定相關(guān)性，而是否預(yù)示會(huì)發(fā)生二次腦梗死均尚無(wú)定論，還需后續(xù)研究。

測(cè)定ACI患者血清HCY，CysC和NT-proBNP由于其取材簡(jiǎn)單、成本低廉、容易分離、不涉及倫理學(xué)問(wèn)題等諸多優(yōu)點(diǎn)受到基礎(chǔ)研究和臨床研究的高度重視。介于此，本研究提出血清HCY，CysC和NT-proBNP聯(lián)合檢測(cè)可以作為ACI患者疾病監(jiān)測(cè)及診療效果判斷的一個(gè)有效指標(biāo)，其簡(jiǎn)便成本低廉有望用于普通人群ACI疾病的篩查。此外，由于樣本量的限制，本研究只能起到一個(gè)拋磚引玉的作用，這也是本研究的一個(gè)不足之處。