抗核抗體和抗核抗體譜聯合檢測在自身免疫性疾病診斷中的臨床應用

李春江 周玉英 劉艷平 謝 瑤 王 蕊 劉曉彤

（1 沈陽迪安醫學檢驗所有限公司，遼寧 沈陽 110141；2 山西迪安醫學檢驗中心，山西 呂梁 033306）

AID檢測中最重要的就是自身抗體的檢測[1]。隨著生物學的快速發展，AID的特異性抗體不斷地被發現與利用AID檢測中，大大提高了AID的確診率[2]。IIF檢測ANA及其熒光模型在AID診斷與鑒別中，是最重要的篩選檢測，是公認的金標準檢驗[3]。近年來也有許多機構將IBT用于檢測AID中，故本次研究探討了IIF-ANA、IBT-ANAs聯合檢測應用于AID的臨床診斷鑒別中的重要性與必要性，減少AID漏診、誤診，提高檢驗準確。現將研究的結果做出如下報道。

1 資料與方法

1.1 一般資料：實驗資料選擇2017年2月至2018年8月之間我實驗室收集的2000例患者的血清樣本分別采用免疫熒光法（IIF）與免疫印跡法（IBT）進行ANA與ANAs檢測。患者的平均年齡為（45.64±12.68）歲，其中男性患者1200例，女性患者800例。將兩組患者的一般資料進行對比，組間對比結果差異小，沒有統計學意義，具有可比性（P＞0.05）。

1.2 實驗方法

1.2.1 IIF-ANA檢測：ANA檢測采用IIF，HEP-2（細胞/猴肝切片）為基質，操作嚴格要求無菌。標本的稀釋濃度設置為1：100.熒光片采用Olympus-BX42型顯微鏡進行觀察后將ANA檢測結果與ANAs檢測結果進行對比[4]。

1.2.2 IBT-ANAs檢測：ANAs檢測采用IBT。其中特異性抗體包括：IBT_ANAs檢測ANAs檢測采用IBT。檢測的項有Sm、AMA-M2、nRNP/Sm、組蛋白、Jo-1、SS-A、R0-52、核糖體p蛋白、PCNA、SS-B、PM-Scl、CENP-B、dsDNA、核小體、Scl-70等。操作嚴格要求無菌。采用全自動免疫印跡儀檢測。檢測后采用Lide100掃描儀掃描結果后用EUROLineScan自動判別軟件自動判定[5]。

1.3 數據處理：在本次研究中，使用SPSS20.0軟件對數據進行統計學處理，計量資料以（±s）進行表示，采用t檢驗法。計數資料，采用卡方檢驗法。若P＜0.05則認為二者差異具有統計學意義。

2 結 果

2000份血清樣中共有1270例ANA陽性血清，ANA陽性率63.5%（1270/2000）。ANA滴度與ANAs及確診AID例數的關系，見表1。

表1 IBT-ANAs結果與IIF-ANA結果對照表

2000份血清樣中共有1060例ANA陽性血清，ANAs陽性率53%（1060/2000）。抗體單項陽性率分別為Sm2.83%、AMA-M21.89%、nRNP/Sm1.89%、Jo-12.36%、SS-A22.6%、R0-5223.58%、PCNA2.36%、SS-B2.83%、PM-Scl4.34%、dsDNA4.34%、CENP-B 1.98%、Scl-70 1.60%、核糖體p蛋白 1.60%、組蛋白20.75%、核小體2.1%；抗兩種以上抗體的陽性率為占 75.47%（800/1060）。單項陽性抗 體最多的三個為：SS-A、Ro52以及組蛋白。見表2。

表2 ANAs陽性檢測率對比表

3 討 論

檢驗自身抗體是診斷AID的重要指示指標。血清中每一種AID指標都具有一定的特征性的自身抗體譜。血清中高效價的自身抗體都是AID的特異質指標值之一，也是臨床醫學診斷的主要依據。ANA是真核細胞的細胞核、細胞質。細胞膜等多重組合成分自身抗體的總稱，不同的AID有不同的抗核抗體譜。

IIF檢測是檢驗ANA的金標準，是實驗室檢查自身抗體的最主要方法。在各大檢驗實驗室以及醫院檢驗科均采用該方法進行檢驗。彼此實驗中的IIF檢驗共進行了2000份血樣篩查，共篩查出1270例ANA陽性患者，，ANA陽性率63.5%（1270/2000）。

本次研究中，ANA滴度?1：1000的陽性率最高達到了92%（460/500）；其次是ANA滴度≥1∶320的陽性率最高達到了82%（320/390）；第三為ANA滴度≥1∶100的陽性率最高達到了53.85%（220/260）。ANAs檢測2000份血清樣中共有1060例ANA陽性血清，ANAs陽性率53%（1060/2000）。抗體單項陽性率分別為Sm2.83%、AMA-M21.89%、nRNP/Sm1.89%、Jo-12.36%、SS-A22.6%、R0-5223.58%、PCNA2.36%、SS-B2.83%、PM-Scl4.34%、dsDNA4.34%、CENP-B 1.98%、Scl-70 1.60%、核糖體p蛋白 1.60%、組蛋白20.75%、核小體2.1%；抗兩種以上抗體的陽性率為占75.47%（800/1060），上述研究結果說明兩種方法中，ANA檢測具有高度靈敏度，ANAs檢測具有強特異性。

綜上所述，IIF對于血清樣本中ANA的敏感性高，IBT針對血清中ANAs的特異性好，二者聯合檢驗可減少AID的漏診與誤診，提高檢驗準確率，值得應用。