張鮑虎 張 莉 楊書才 周 杰
深圳市坪山區人民醫院檢驗科,廣東深圳 518118
呼吸道感染性疾病對人類健康的危害近年來逐漸加重,而引起感染的病原體種類繁多,有病毒、細菌、支原體、衣原體等,這些病原體可能會單一感染,也可能會出現多重感染,臨床癥狀亦呈現多樣化[1],而呼吸道感染在人群中以兒童的發病率較高[2-3],對于呼吸道感染病情及時準確診斷需求亦越來越高,且病原體感染后,臨床癥狀往往不夠特異,臨床醫生難以把握病情,所以對患者進行必要的實驗室檢測越發重要,而實驗室檢測方法多種多樣,如細胞培養、細菌培養、間接免疫熒光法、病原體基因檢測等[4],使用間接免疫熒光法檢測病原體感染后的血清特異性IgM 能夠直接反映患者感染的病原體種類,對臨床治療及時提供理論依據,且此類方法準確高效,成本低廉,操作簡便[5-7]。
收集2015 年1 月~2016 年12 月在我院就診的住院及門診呼吸道疾病感染患者4014 例,其中男2439 例,女1575 例,依研究設計將年齡分三組:(1)<18 歲組患者3201 例;(2)18 ~50 歲組患者607 例;(3)>50 歲患者206 例,患者主要臨床癥狀表現為發熱、咳嗽、流涕、喘息,經聽診有肺部細濕啰音。
奧林巴斯CX41-32RFL/CX-DCD 熒光顯微鏡,檢測試劑盒為西班牙格拉納達VIRCELL,S,L 公司生產的呼吸道九連檢載玻片,檢測項目包括腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(INFA)、乙型流感病毒(INFB)、副流感病毒1/2/3型(PIV)、嗜肺軍團菌(LP)、肺炎支原體(MP)、Q熱立克次體(COX)、肺炎衣原體(CP)。
1.3.1 采樣方法 要求患者空腹,離心后分離血清待測。
1.3.2 檢測方法 嚴格按照產品說明書正確操作。
1.3.3 結果判定 陽性結果:ADV、RSV、INFA、INFB、PIV 的整個孔里有1%~15%細胞的細胞質、細胞膜或細胞核出現蘋果綠色熒光,MP 細胞外周出現蘋果綠色熒光,LP、COX、CP 中所有菌體呈現蘋果綠色熒光。陰性結果:MP、ADV、RSV、INFA、INFB、PIV 中的細胞呈現紅色,COX、LP、CP 孔里無熒光。質量控制:每一次檢測使用試劑盒配套陰陽性質控品,陰性質控9 項結果均為陰性,陽性質控9 項結果均為陽性才能判斷實驗合格。
采用SPSS16.0 軟件進行數據處理,計數資料以[n(%)]表示,采用χ2檢驗,P <0.05 為差異有統計學意義。
共檢出IgM 陽性1474 例,陽性率36.72%,部分患者呈現多重感染情況,其中排名前三的分別是MP 981 例,LP 203 例,INFB 192 例,陽性率分別為:24.44%、5.06%及4.78%,陽性率構成比分別為:66.55%、13.77%及13.03%。見表1。

表1 九種呼吸道病原體陽性率及陽性構成比
男性患者2439 例共檢測陽性結果783 例,陽性率32.10%,女性患者1575 例共檢測陽性結果691 例,陽性率43.87%,男性患者人群感染率明顯低于女性患者,差異有統計學意義(χ2=57.052,P <0.01)。見表2。

表2 男女患者呼吸道陽性檢出率
按照常規慣例將每年的3 ~5 月定為春季,以此為順序,春和冬季人群感染率明顯高于夏和秋,差異有統計學意義(P <0.05),各季節感染人群以MP 為主,其他病原體隨季節變換交替流行。見表3。

表3 不同季節呼吸道病原體檢測結果
4014 例樣本中,<18 歲組的3201 例,檢出陽性1288 例,年齡分組人群感染率<18 歲組與>50歲組人群感染率明顯高于18 ~50 歲組的人群,差異有統計學意義(P <0.05)。見表4。

表4 不同年齡組呼吸道病原體檢測結果
引起呼吸道疾病的病原體較多,感染癥狀類似,一般不容易直接區分,臨床的經驗治療可能會導致抗生素濫用,耽誤患者病情治療,而引起呼吸道感染的因素較多,常見有細菌、病毒、衣原體、支原體等微生物[8],如何快速準確的檢測出病原體種類成為呼吸道疾病治療的關鍵。
目前呼吸道病原體檢測方法較多,常見的有核酸檢測、細胞培養及血清病原體抗體檢測等方法。核酸檢測方法準確高效,但需要購置昂貴的儀器,不適用于基層醫院。細胞培養方法,培養呼吸道病原體難度大,操作復雜,檢測周期長,不適于臨床需求。本實驗使用間接免疫熒光法(IFA)檢測病原體抗體,可以同時檢測9 種呼吸道感染性疾病的常見病原體,檢測周期短,結果準確,操作簡便,適用于大量標本同時檢測,能及時為臨床治療提供理論依據,是一種可靠的呼吸道常見病原體檢測方法[9-11]。
呼吸道感染性疾病是一種常見病,本次研究發現4014 例患者呼吸道病原體檢測結果,共檢出IgM陽性1474 例,總陽性率 36.72%,這與莫偉平、白潔、林傳俊等研究一致[12-14],各類病原體檢出率以MP為主,與多數報道相符,排名第二的LP 人群感染率為5.06%,明顯高于莫偉平、白潔、林傳俊等研究結果[12-14],這可能是由于LP 的主要傳播方式與社區獲得性感染有關,坪山區位列深圳東部,人口相對集中容易導致社區獲得性肺炎的傳播;另外LP 夏季1153 例呼吸道患者陽性人數68 例,占比5.90%位列四季第一,這可能與炎熱的夏季空調使用密切相關,LP 常隱藏于空調制冷裝置中,隨冷風吹出導致人體感染,研究提示人們即使在炎熱的夏季也應該保持室內通風減少呼吸道疾病感染。此次研究發現9 例COX 感染的患者,蜱是COX 傳播的主要媒介,而坪山區周邊山區較多,容易接觸叢林導致感染,提示人們出入叢林時應涂抹驅蟲藥物以避免感染此類疾病。另外研究發現男女感染比率差異有統計學意義,可能是由于女性體質相對較弱容易發生感染,本次研究統計數據顯示女性感染人群明顯高于男性,這與王金華等研究相符[15]。
呼吸道疾病可發生于各個年齡段,以老人和兒童發病率較高,是老人和兒童人群的重要死因之一[16-17],而一線城市人口密度大,人員活動范圍相對集中,更容易促進呼吸道疾病的傳播,另外老人和兒童的免疫力相對低下,易成為呼吸道病原體的感染對象,本次研究發現<18 歲組和>50 歲相對于18 ~50 歲組較易發生感染,人群感染率統計顯示:<18 歲組與>50 歲分別為40.24%、34.47%,明顯高于18 ~50 歲組18.95%,>50 歲組的人群感染率與王金華等研究結果差異較大[15],這可能與區域差異有關。因季節和地域性差異導致的呼吸道病原體流行性也存在一定變化,因此對本地區的呼吸道感染性病原體流行病學調查和研究尤其重要,研究發現本地區春和冬季人群感染率明顯高于夏和秋,差異有統計學意義(P <0.05),提示人們在容易發生呼吸道疾病的春冬季應盡量避開人群密集的場所,以免感染呼吸道病原體,各季節感染病原體數量以MP 為主,其次是LP 和INFB,其他各項病原體感染隨季節變換感染情況也有所變化。
綜上所述,本研究從性別、季節、環境與年齡等多方面分析了本地區的呼吸道疾病的病原體感染情況,為本地區流行病學調查提供了大量寶貴數據,也為臨床對呼吸道疾病的治療提供高效、準確的理論參考依據。