不同梯度有機硒飼糧對羔羊肉及內臟組織硒沉積的影響

李聚才 施安 張俊麗 丁偉 馬小明 吳明

摘 要：采用隨機區組設計，選擇灘羊與小尾寒羊雜交羔羊64 只，隨機分為4 組，分別制備有機硒含量0.14（1組）、0.96（2組）、1.41（3組）、1.92 mg/d（4組）的飼糧。正式期60 d，每隔10 d隨機選擇參試羔羊2 只屠宰后，采集其代表性肌肉及內臟樣品進行硒含量分析。結果表明：不同梯度有機硒添加量及日齡對羔羊肌肉及其內臟組織硒沉積量有顯著影響，各實驗組分別飼喂其有機硒添加劑日糧10 d，羔羊背肌、股肌及其內臟組織硒沉積量即可達到DB 61/T 556—2012《富硒食品與其相關產品硒含量標準》的標準;實驗2組、3組和4組分別飼喂其有機硒日糧20～30 d，羔羊背肌和股肌硒沉積量即可達到DBS 42/002—2014《富有機硒食品硒含量要求》的標準。

關鍵詞：不同梯度;有機硒飼糧;羊肉及內臟;硒含量分析

Abstract： Sixty-four Tan × small-tailed Han crossbred lambs were divided using a randomized block design into 4 treatment groups designated as I， II， III and IV， which were supplemented with dietary organic selenium at 0.14， 0.96， 1.41 and 1.92 mg/d for 60 d， respectively. At 10 d intervals， two lambs from each group were randomly selected and slaughtered for measurement of selenium contents in representative samples of skeletal muscle and visceral tissues. The results showed that different levels of dietary organic selenium and feeding durations had a significant effect on selenium enrichment in lamb meat and visceral tissues. After 10 d of feeding， selenium contents in the dorsal and femoral muscle and visceral tissues of lambs reached the Shaanxi provincial standard for selenium contents in selenium-enriched foods and related products（DB 61/T 556—2012）. After 20 and 30 days， selenium contents in the dorsal and femoral muscles of lambs in Groups II–IV reached the Hubei provincial requirements for selenium contents in selenium-enriched foods （DBS 42/002—2014）.

Keywords： different gradients; dietary organic selenium; lamb meat and viscera; selenium content analysis

DOI：10.7506/rlyj1001-8123-20190320-063

中圖分類號：TS251.1? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻標志碼：A 文章編號：1001-8123（2019）06-0007-06

引文格式：

李聚才， 施安， 張俊麗， 等. 不同梯度有機硒飼糧對羔羊肉及內臟組織硒沉積的影響[J]. 肉類研究， 2019， 33（6）： 7-12. DOI：10.7506/rlyj1001-8123-20190320-063.? ? http：//www.rlyj.net.cn

LI Jucai， SHI An， ZHANG Junli， et al. Effects of different levels of dietary selenium on selenium enrichment in skeletal mutton and visceral tissues of lambs[J]. Meat Research， 2019， 33（6）： 7-12. DOI：10.7506/rlyj1001-8123-20190320-063.

自從1817年瑞典化學家發現硒[1-3]之后，硒的作用和價值被充分挖掘，硒已成為人們非常關注的微量元素。硒是人體和動物所必需的微量元素[4-6]，具有防癌、抗癌、增強免疫力、防止糖尿病、白內障、心腦血管疾病、克山病、關節炎和大骨節病、解毒、排毒及保護肝臟等重要作用[7-8]。

硒元素缺乏影響人體和動物的健康水平。臨床研究表明，人體硒缺乏會導致克山病、心臟疾病、胰腺炎、大骨節病和前列腺癌等40余種疾病[9-10]。我國城市居民的飲食結構中，成年人硒的日攝入量大約為0.02～0.03 mg，與中國營養學會提出的推薦值0.05～0.25 mg相差甚遠[11]。研究發現，動物硒缺乏會導致腦軟化癥，并會降低成畜禽的繁殖能力，甚至導致不育。當幼畜體內缺乏硒元素時會發生白肌癥，雛雞體內缺乏硒元素時會發生滲出性素質病[12]。因而，富硒功能保健品的開發對提高國民健康水平和畜牧業高質量、可持續發展具有重要意義。

近年來，寧夏自然資源部門在開展多目標區域地球化學調查中，在引黃灌區首次發現富硒土地資源，成為我國又一個發現具有富硒土地資源的省份[4]。為加快富硒產業的發展，寧夏開展了富硒資源調查、富硒農產品基地建設、富硒農產品開發及富硒農產品品牌培育推介等[13]。

本研究通過開展不同梯度有機硒添加量的飼糧及日齡對羔羊胴體肌肉及其可食內臟組織硒沉積量的影響實驗，探明有機硒的適宜添加劑量及時間節點，旨在為寧夏富硒羊肉產品的開發利用提供決策參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

有機硒為阿富硒2000（飼料級），總硒含量為2 000 mg/kg，其中有機硒含量為98%，達農威生物發酵工程技術（深圳）有限公司經銷，美國達農威公司制造。

硒標準溶液GBW（E）080 215 中國計量科學研究院;硝酸、雙氧水（均為優級純）、硼氫化鉀（分析純） 天津市科密歐化學試劑有限公司;氫氧化鈉（分析純） 國藥集團化學試劑有限公司。

1.2 儀器與設備

AFS-230E原子熒光光度計 上海儀器有限責任公司;U1traCLAVE4微波消化系統 萊伯泰科有限公司;Milli-Q超純水器 美國Milli-Q公司;AL204電子天平 梅特勒-托利多（上海）儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 實驗動物選擇與實驗設計參試動物選自寧夏平羅縣頭閘鎮某養殖專業合作社。實驗采用隨機區組設計，選擇灘羊與小尾寒羊雜交組合60 日齡、斷奶、體質量20 kg左右自繁自育的健康雜種羔羊64 只，隨機分為4 組，設為實驗1組、2組、3組和4組，互為對照。每組羔羊16 只，每只羔羊為1個重復。4 組參試羔羊平均初始體質量分別為（25.58±3.25）、（25.78±3.33）、（26.66±3.58）、（25.95±3.42） kg，組間體質量均值差異不顯著（P>0.05）。研制4 個不同梯度有機硒含量的肉羊預混料配方，進而配制成精料補充料及其全混合日糧，分別對應飼喂實驗1組、2組、3組和4組羔羊，各組隔欄分群養。

1.3.2 日糧營養水平及飼養管理

1.3.2.1 日糧營養水平基礎日糧參照NY/T 816—2004《肉羊飼養標準》[14]，研制4 個不同梯度有機硒添加量的肉羊預混料配方為：VA 250 kIU/kg、VD 10 kIU/kg、VE 1 200 IU/kg、Co 0.2 mg/kg、Cu 10 mg/kg、I 1.0 mg/kg、Fe 25 mg/kg、Mn 20 mg/kg、Zn 35 mg/kg、阿富硒2000分別為6（1組）、40（2組）、60（3組）、80 mg/kg（4組）;分別配制成添加有機硒0.3（1組）、2.0（2組）、3.0（3組）、4.0 mg/kg（4組）的精料補充料，其原料和配方為：玉米57%、麩皮4.3%、細米糠4.2%、豆粕7.0%、葵花粕7.0%、棉粕5.7%、玉米胚芽餅4.2%、蘋果渣4.2%、膨化料1.4%、預混料5%;壓制成顆粒飼料（直徑4 mm）。粗飼料為全株玉米青貯+玉米干秸稈+苜蓿干草+稷子干草+黃蘿卜、青蘿卜，各組飼糧的能量粗蛋白主營養水平一致。飼糧組成及營養水平如表1所示。

1.3.2.2 飼養管理

實驗前對地面、隔欄、墻壁等進行清掃消毒，每組分圈單設飼槽和飲水器。實驗期分為預飼期和正式期，預飼期10 d，期初進行體質量稱測、免疫注射、驅蟲健胃、建檔編號與佩戴耳標等;正式期60 d，期間每隔10 d分別稱測體質量。各圈舍飼養條件相同，自由飲水，日常管理方式一致。

1.3.3 樣品采集與測定

1.3.3.1 樣品采集

在正式期內每隔10 d，即分別于實驗第10、20、30、40、50和60天分別隨機選擇參試羔羊2 只，禁食24 h后，在平羅縣某牛羊肉生產加工車間集中定點屠宰，胴體靜止30 min后分別采集具有代表性的背最長肌（簡稱背肌，下同）和股二頭肌（簡稱股肌）及其肝臟和肺臟各250 g;其心臟和腎臟分別剔除包膜及脂肪組織后取單體樣;分別入自封袋內包裝封口、編號，置于冷藏箱內帶回實驗室，置于-20 ℃冰柜保存備用。實驗期共選擇屠宰參試羊48 只，采集其背肌、股肌及內臟樣品共288 份供測試分析。

1.3.3.2 指標測定

參試羊肉及內臟樣品按照GB 5009.93—2017《食品安全國家標準 食品中硒的測定》[15]，將采集、冷凍的樣品解凍后分別粉碎、混勻，然后用原子熒光光譜法測定其硒含量。每個樣品測試結果均為參試樣品3 個平行樣實測數據的均值。

1.3.3.3 評價參考標準

依據DB 61/T 556—2012《富硒食品與其相關產品硒含量標準》[16]，參考肉類及其制品中鮮肉硒含量標準0.02～0.50 mg/kg，肝和腎硒含量標準0.02～3.00 mg/kg;依據DBS 42/002—2014《富有機硒食品硒含量要求》[17]，參考其冷鮮肉總硒指標（以Se計，下同）0.20～1.00 mg/kg，內臟總硒指標0.20～2.00 mg/kg。

1.4 數據處理

應用Excel和IBM SPSS 20.0軟件對數據進行整理和統計分析，選用單因素ANOVA-LSD法進行多重比較。結果均以“平均值±標準差”表示。

2 結果與分析

2.1 不同梯度有機硒添加量及日齡對羔羊背肌硒沉積量的影響由表2可知，隨著飼糧中有機硒添加量的增加，羔羊背肌硒含量不同程度地增加，按其背肌硒含量由高到低排序均為4組>3組>2組>1組，與飼糧有機硒添加梯度相一致。且隨著飼喂有機硒飼糧日齡的延長，羔羊背肌硒的含量總趨勢也是逐漸增加。實驗1組和3組飼喂50 d的沉積效果較好，實驗2組和4組飼喂40 d的沉積效果較理想。結果表明，不同梯度有機硒添加量及日齡對羔羊背肌硒沉積量有顯著影響。實驗4組飼喂其日糧10、20、30、40、50、60 d時背肌硒含量與1組相比分別同比高出130.76%、164.71%、370.59%、495.24%、450.00%和740.00%（P<0.01）。各參試組羔羊飼喂其日糧后，不同時間點背肌硒含量變化趨勢不一，有待于深入研究。

2.2 不同梯度有機硒添加量及日齡對羔羊股肌硒沉積量的影響由表3可知：隨著飼糧中有機硒添加量的增加，羔羊股肌硒含量也在不同程度增加，按其股肌硒含量由高到低排序，實驗30 d時為4組>3組>2組>1組，與其飼糧有機硒添加梯度相一致;實驗10、20、60 d時，3組的硒沉積效果較優，40 d時以4組較優;且隨著飼喂有機硒飼糧日齡的增加，羔羊股肌硒含量也在不同程度地增加，實驗1組和4組50 d時的股肌硒沉積效果較好，實驗2組40 d時的股肌硒沉積效果較好，實驗3組60 d時的股肌硒沉積效果較好。結果表明，不同梯度有機硒添加量及日齡對羔羊股肌硒沉積量有顯著影響。實驗4組飼喂其日糧10、20、30、40、50、60 d時股肌硒含量與1組相比分別同比高出158.33%、104.76%、352.63%、267.86%、103.45%和469.23%（P<0.01）。

2.3 不同梯度有機硒添加量及日齡對羔羊心臟硒沉積量的影響由表4可知，隨著飼糧中有機硒添加量的增加，羔羊心臟硒含量也在不同程度地增加，按其心臟硒含量由高到低排序，實驗30、40、50、60 d時為4組>3組>2組>1組，與其飼糧有機硒添加梯度相一致，實驗10、20 d時2組的硒沉積效果較優。隨著飼喂有機硒飼糧日齡的增加，羔羊心臟硒含量不一，實驗1組、2組和4組飼喂其日糧20 d時的硒沉積效果較好，實驗3組飼喂其日糧50 d時的硒沉積效果較好。結果表明，不同梯度有機硒添加量及日齡對羔羊心臟硒沉積量有顯著影響。實驗4組飼喂其日糧10、20、30、40、50、60 d時心臟硒含量與1組相比分別同比高出31.72%、63.96%、148.98%、264.10%、244.74%和260.61%（P<0.01）。

2.4 不同梯度有機硒添加量及日齡對羔羊肺臟硒沉積量的影響由表5可知，隨著飼糧中有機硒添加量的增加，羔羊肺臟硒沉積量也不同程度增加，按其肺臟硒含量由高到低排序，實驗10、30、40、50、60 d時為4組>3組>2組>1組，與其飼糧有機硒添加梯度相一致。隨著飼喂有機硒飼糧日齡的增加，羔羊肺臟硒含量也不同程度增加。實驗1組以飼喂其日糧30 d時的肺臟硒沉積效果較好，實驗2組、3組和4組以飼喂其日糧20 d時的肺臟硒沉積效果較好。結果表明，不同梯度有機硒添加量及日齡對羔羊肺臟硒沉積量有顯著影響。實驗4組飼喂其日糧10、20、30、40、50、60 d時肺臟硒含量與1組相比分別同比高出117.65%、442.11%、105.88%、176.19%、138.78%和213.33%（P<0.01）。

2.5 不同梯度有機硒添加量及日齡對羔羊肝臟硒沉積量的影響由表6可知，隨著飼糧中有機硒添加量的增加，羔羊肝臟硒含量也在不同程度地增加，按其肝臟硒含量由高到低排序，實驗60 d時為4組>3組>2組>1組，與其飼糧有機硒添加梯度相一致。實驗10 d時以4組的硒沉積效果較優，實驗20、30 d時3組較優，實驗40、50 d時2組較優。隨著飼喂有機硒飼糧日齡的增加，羔羊肝臟硒含量也不同程度增加。按其肝臟硒含量由高到低排序，實驗1組和2組飼喂其日糧50 d時的肝臟硒沉積效果較好，實驗4組飼喂其日糧60 d時的肝臟硒沉積效果較好，實驗3組飼喂其日糧30 d時的肝臟硒沉積效果較好。結果表明，不同梯度有機硒添加量及日齡對羔羊肝臟硒沉積量有顯著影響。實驗4組飼喂其日糧10、20、30、40、50、60 d時肝臟硒含量與1組相比分別同比高出285.19%、116.67%、132.47%、300.00%、87.36%和267.44%（P<0.01）。

2.6 不同梯度有機硒添加量及日齡對羔羊腎臟硒沉積量的影響由表7可知，隨著飼糧中有機硒添加量的增加，羔羊腎臟硒含量也不同程度增加，按其腎臟硒含量由高到低排序，實驗10 d和40 d時為4組>3組>2組>1組，與其飼糧有機硒添加梯度相一致。實驗20 d時以4組的硒沉積效果較優，實驗50 d時2組較優，實驗60 d時3組較優。隨著飼喂有機硒飼糧日齡的增加，羔羊腎臟硒含量也不同程度增加。按其腎臟硒含量由高到低排序，實驗1組飼喂其日糧30 d時腎臟硒沉積效果較好。結果表明，不同梯度有機硒添加量及日齡對羔羊腎臟硒沉積量有一定影響。實驗4組飼喂其日糧10、20、40、50 d時腎臟硒含量與1組相比分別同比高出50.63%、121.95%、191.75%（P<0.01）和10.38%。實驗30 d時，實驗1組的硒沉積效果較優，且比實驗4組高24.24%，實驗60 d時實驗3組較優，且實驗1組比4組高1.00%，有待于進一步研究。

綜合本研究結果表明，不同梯度有機硒添加量及日齡對羔羊肌肉及其內臟組織硒沉積量有顯著影響。各實驗組分別飼喂其有機硒添加劑日糧10 d，羔羊背肌、股肌及其內臟組織硒沉積量即可達到DB 61/T 556—2012《富硒食品與其相關產品硒含量標準》中的標準;實驗2組、3組和4組分別飼喂其富有機硒日糧20 d時羔羊背肌硒沉積量、實驗3組和4組飼喂其日糧20 d、實驗2組飼喂40 d、實驗1組飼喂50 d時羔羊股肌硒沉積量、實驗1組、2組、3組和4組分別飼喂其日糧10 d時羔羊肝臟和腎臟硒沉積量、飼喂其日糧20～30 d時羔羊心臟和肺臟硒沉積量即可達到DBS 42/002—2014《富有機硒食品硒含量要求》準。

3 討 論

有機硒是生物體微營養硒元素理想的補充方式。硒是一種帶負電荷的非金屬元素，在自然界中按其結合方式可分為無機硒和有機硒2 種形態，以無機形式存在的硒有硒酸鈉、亞硒酸鈉和硒化氫，以有機形式存在的硒主要有以谷胱甘肽過氧化物酶存在的硒蛋白質和以硒代蛋氨酸和硒代胱氨酸存在的硒代氨基酸[18-19]。根據硒的結合方式，一般選用有機硒和無機硒2 種方式對生物體進行硒元素的補充。有機硒生物活性較高，容易被腸道吸收且無污染，便于使用，目前有機硒應用最廣泛。硒元素與人體內的蛋白質結合生成有營養價值的硒代多糖、硒代氨基酸和硒代蛋白質等有機硒。

人和動物通過食物攝入硒源，經腸道吸收后與血漿蛋白質結合，經血液循環運輸到各組織中，主要以硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸的形式結合到組織蛋白中去。硒在體內通過酶的一系列還原反應形成硒化氫，再經甲基轉移酶甲基化后形成二甲基衍生物，經腎臟排泄。硒吸收量過多時也可經肺排泄。當硒含量過高時，它能與含硫化合物中的硫競爭并最后取代化合物中的硫，進而抑制細胞代謝的氧化過程，對機體產生毒害作用。但是適量的硒存在于機體內時，其便能發揮出多方面的生理、生化功能。對反芻動物而言，硒是瘤胃微生物的必需微量元素，補充適量硒可以促進瘤胃微生物的生長繁殖，增加瘤胃微生物數量，減少瘤胃微生物的氧化損傷，提高瘤胃微生物的生物活性，從而促進瘤胃發酵功能、提高飼料的消化率。本研究結果表明，不同梯度有機硒添加量及日齡對羔羊肌肉及內臟組織硒沉積具有影響，與伏映萍[20]、劉彩鳳[21]等研究得出的在飼糧中添加適量硒不僅能夠增加灘羊日增體質量、提高育肥效果及其肌肉嫩度等以及張磊等[22]對紫陽縣陜南白山羊肌肉組織、血液和毛發硒含量的分析結果相吻合;且與施安[23]、

李聚才[24]等得出的在日糧中添加硒制劑能明顯改善灘湖F2代羔羊的育肥性能和肉品質等研究結果相一致。澳大利亞農業委員會（Standing Committee on Agriculture，SCA）關于綿羊飼糧干物質中微量元素硒的推薦量為0.05 g/kg[25]。美國國家研究委員會（National Research Council of the United States，NRC）成員研討反芻動物飼喂硒的實驗結果，將推薦的最大耐受量上限由NRC 1980年確定的2 mg/kg飼糧干物質調整為5 mg/kg飼糧干物質[26]，超過這個劑量為毒性劑量。因此，對動物補硒應根據補硒形式掌握合理添加劑量。

中國營養學會已將人體必需的微量元素硒列為15 種每日膳食營養素之一。中國營養學會推薦我國成年居民膳食營養素硒參考攝入量為0.06～0.40 mg/d[27]。每日攝入0.20 mg的硒可以有效防止癌癥的發生，日攝入大于0.30 mg便可以對癌癥起到一定的治療效果。在美國，近年來已經將硒運用于多種癌癥的治療上，通過讓患者每日攝入2.0 mg硒治療癌癥，并取得了非常好的效果[8]。然而，硒也是一種超劑量使用會對人體和動物產生毒害副作用的營養素，安全范圍相對較窄，在強化過程中必須注意硒的添加劑量，強化使用時必須以相關國標或行標為參考[28]。

4 結 論

不同梯度有機硒添加飼喂量及日齡對羔羊肌肉及其內臟組織硒沉積量有顯著影響。飼糧中添加有機硒0.14、0.96、1.41、1.92 mg/d、飼喂10 d，育肥羔羊肉及內臟組織硒沉積量即可達到DB 61/T 556—2012標準;選擇添加有機硒1.41 mg/kg的飼糧飼喂20～30 d，育肥羔羊肉及內臟組織硒沉積量即可達到DBS 42/002—2014標準。

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