10廠家小劑量阿司匹林腸溶片含量及水楊酸限量對比分析*

劉泳珊，陳小祝，梁偉光，張焰明 ，聶 鑫△

（1.廣東省佛山市南海區人民醫院，廣東 佛山 528200； 2.佛山科學技術學院，廣東 佛山 528000）

阿司匹林酸性較強，小劑量長期應用會導致胃潰瘍、消化道出血和小腸黏膜糜爛等[1-8]，且在生產和貯存過程中又易水解為水楊酸，對胃黏膜有更強的刺激性和損傷[9]。因此小劑量阿司匹林腸溶片中阿司匹林含量和水楊酸限量的控制尤為重要。目前，國內小劑量阿司匹林腸溶片生產廠家眾多，本研究中參考文獻[10-14]，建立了雙波長紫外分光光度測定法，快速測定小劑量阿司匹林腸溶片中阿司匹林含量和水楊酸限量?，F報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

UV-1600PC型紫外可見分光光度計（上海美譜達儀器有限公司）；BS-110S型分析天平（十萬分之一，北京賽多利斯天平有限公司）；SK2200H型超聲清洗器（上?？茖С晝x器有限公司）；DHG-9240A型恒溫干燥箱（鞏義市予華儀器有限責任公司）。

1.2 試藥

阿司匹林對照品（批號為100113-201405），水楊酸對照品（批號為100106-201104），均購于中國食品藥品檢定研究院；阿司匹林腸溶片（市售），生產廠家及批號見表1；乙醇等均為分析純。

表1 阿司匹林腸溶片的生產廠家及批號

2 方法與結果

2.1 檢測波長確定

稱取適量阿司匹林對照品和水楊酸對照品，用適量乙醇分別溶解，在230～360 nm波長范圍內掃描，結果阿司匹林最大吸收波長為275 nm，此時水楊酸也有吸收。為了消除水楊酸的干擾，同時選擇325 nm波長，且水楊酸吸光度（A）與275 nm波長處相等，但阿司匹林A值很小，而與275 nm波長處的A值相差很大，故阿司匹林測定雙波長確定為275 nm和325 nm。水楊酸的最大吸收波長為304 nm，此處阿司匹林的A值接近基線，可忽略不計，故水楊酸測定波長確定為304 nm。紫外吸收光譜見圖1。

圖1 紫外吸收光譜圖

2.2 方法學考察

線性關系考察：取阿司匹林對照品50.2 mg，精密稱定，置50mL容量瓶中，加無水乙醇溶解至刻度，分別制成 20.08，40.16，60.24，80.32，100.40，120.48 μg ／mL系列質量濃度的對照品溶液，以乙醇為空白對照，按擬訂測定波長測定吸光度，以質量濃度（C）對ΔA進行線性回歸，得阿司匹林線性回歸方程Y＝148.63X＋2.6523，r＝0.999 2（n＝5）。同法將水楊酸對照品配制成 8.01，12.01，16.01，20.02，24.02，28.02 μg ／mL 系列質量濃度的對照品溶液，得水楊酸的線性回歸方程Y＝38.196X＋0.520 6，r＝0.999 0（n＝6）?？梢姡⑺酒チ趾退畻钏豳|量濃度分別在 20.08 ～100.40 μg／mL 和8.0064～24.0192μg／mL范圍內與吸光度線性關系良好。

穩定性試驗：將線性關系考察項下阿司匹林和水楊酸對照品溶液分別于 0，0.5，1.0，1.5，2.0 h 時測定A。結果的RSD分別為 0.674% 和 0.472% （n＝5），表明在此條件下供試品溶液穩定性良好。

精密度試驗：將線性關系考察項下阿司匹林和水楊酸對照品溶液，分5次取樣，測定吸光度。阿司匹林溶液在連續5次測定中，測得的ΔA幾乎不變，平均為0.484，RSD為 0.092 4% （n＝5）；水楊酸在 304 nm 波長處連續 5次測得A的平均值為 0.518，RSD為0.286%（n＝5）。結果表明，儀器精密度良好。

重復性試驗：取A廠同批號樣品5份，依法測定。結果阿司匹林平均含量為96.35%、RSD為0.513%（n＝5），水楊酸限量平均為 0.52% 、RSD為 1.724%（n＝5），表明方法重復性良好。

水楊酸干擾試驗：取阿司匹林對照品適量，精密稱定，制備阿司匹林質量濃度相同（100.4 μg ／mL）而水楊酸質量濃度（1.2，1.6，2.0 μg ／mL）不同的溶液，其中水楊酸質量濃度的取值設定在藥典限量值附近。結果阿司匹林的 ΔA＝0.590，RSD為 0.204%，表明在 275 nm及325 nm波長處測定阿司匹林含量受到水楊酸的干擾極小，雙波長測定阿司匹林含量方法可靠。

加樣回收試驗：取已知含量的樣品（批號為31843）10片，研磨，取100 mg，精密稱定，加乙醇溶解并定容于100 mL 容量瓶中，精密量取 0.8，1.0，1.2 mL 續濾液，分置3個25 mL容量瓶中，備用。稱取阿司匹林對照品約25 mg，精密稱定，用乙醇溶解定容至25 mL容量瓶中，取0.8，1.0，1.2 mL，分別加入上述 3 個容量瓶中。同理，配制質量濃度約為40 μg／mL的水楊酸對照品溶液，向上述3個容量瓶中均精密加入2 mL。分別用乙醇定容，搖勻，測定各溶液的A值，依法計算回收率。結果見表2。

表2 阿司匹林加樣回收試驗結果（n＝9）

2.3 樣品含量及限度測定

阿司匹林的含量測定：分別取標示量為100 mg的阿司匹林腸溶片樣品10片，標示量為50 mg的樣品20片、標示量為25 mg的樣品40片，精密稱定，研細，并稱取約相當于阿司匹林100 mg的樣品，精密稱定，置100 mL容量瓶中，定容，過濾，取續濾液2 mL置25 mL容量瓶中，定容，搖勻，測定A并計算ΔA及含量。結果見表 3。按 2015 年版《中國藥典 （二部 ）》[15]規定，小劑量阿司匹林標示量的百分含量應為93.0% ～107.0%，9個樣品阿司匹林的含量合格，1個（F廠家）不合格。

表3 10個廠家樣品中阿司匹林含量測定結果（n＝3）

水楊酸限量測定：同法操作，測吸光度A，計算限量，結果見表4。根據2015年版《中國藥典（二部）》規定，水楊酸限量不得超過阿司匹林標示量的1.5%，本次測定符合2015年版《中國藥典（二部）》規定的樣品只有4個，不合格率達60%，限量最高的為3.18%（B廠家），超過規定標準的1倍。

表4 10個廠家樣品中水楊酸限量測定結果（n＝3）

2.4 統計學處理

采用SPSS 19.0統計學軟件分析，對樣品測定數據進行分組（各廠家各對應1組）獨立樣本t檢驗分析，以判斷樣品間阿司匹林含量和水楊酸限量的差異。將使用者反饋較好、價格較高的2個樣品：某合資藥品（A廠家）及某國產藥品（H廠家），與其他藥品的數據進行獨立樣本t檢驗。結果，A組阿司匹林含量與其他9組間無差異（P＞0.05），而A組＋H組與其他8組間差異顯著（P＜0.01）；A組與其他 9組、A組＋H組與其他 8組間水楊酸限量差異均顯著（P＜0.01）。詳見表5。

表5 統計分析結果

3 討論

10個廠家的樣品中，絕大多數阿司匹林含量都符合藥典規定，但水楊酸限量不合格比例超過60%，甚至個別廠家的藥品超過藥典規定的2倍以上。另外，不同廠家生產的藥品間差異也較大；水楊酸限量差異極其顯著（P＜0.01）。本研究中僅限于隨機購買的10份市售藥品，但可能在其他市售藥品中也存在，需要引起管理部門的重視。本研究結果表明，我國近來推進的藥品一致性評價工作非常必要，對于提高我國藥品質量、維護百姓用藥安全意義重大。

應用紫外分光光度法對國內10個廠家的小劑量阿司匹林腸溶片進行了定量分析，方法簡便、快速、準確，成本低廉。市售的10種小劑量阿司匹林腸溶片中，阿司匹林含量90%都合格，而水楊酸限量則60%不合格。本研究是建立在紫外分光光度法基礎上的，可能存在一定的方法學局限，有待今后應用高效液相色譜等方法進行對比。建議國家相關部門加大執法力度，嚴格管理，尤其是加大對小型藥企的管理，確保人民群眾的用藥安全。