血漿(1,3)-β-D葡聚糖在非侵襲性真菌性鼻竇炎患者中的診斷意義

王海妹,黃繼紅,周小柳,潘 雅

(海南醫學院第一附屬醫院 耳鼻咽喉-頭頸外科,海南 海口570102)

真菌性鼻竇炎在鼻科中屬于常見的感染性疾病之一,發生可能與長時間服用抗生素、免疫抑制劑及糖皮質激素等,或長期患有慢性疾病、職業接觸及環境污染等因素相關[1]。真菌性鼻竇炎在臨床上主要分為侵襲性與非侵襲性兩種,其中以非侵襲性較為多見[2,3]。血漿(1,3)-β-D葡聚糖為真菌細胞壁成分[4],本研究旨在通過檢測非侵襲性真菌性鼻竇炎患者體內的血漿(1,3)-β-D葡聚糖水平,以期為非侵襲性真菌性鼻竇炎患者快速診斷提供幫助。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2015年3月至2018年6月在我院接受診斷治療的43例非侵襲性真菌性鼻竇炎患者和同期在我院接受鼻內鏡手術治療的50例非真菌性鼻竇炎患者作為本次研究的觀察組和對照組。入選標準：(1)年齡22-65歲,臨床資料完整者；(2)根據病史、經影像學及專科查體等檢查高度懷疑并術后經病理檢查證實者；(3)未合并重要臟器功能受損及腫瘤疾患者。排除標準：(1)妊娠期或哺乳期女性患者；(2)近期接受手術及纖維素膜透析患者；(3)對抗腫瘤的多糖類藥物及輸注蛋白、免疫球蛋白不耐受者。另外選取同期在我院接受健康體檢的51例體檢健康者作為本次研究的健康對照組。本研究經我院醫學倫理委員會批準,患者及其家屬知情同意此次研究并簽署相關知情同意書。

1.2 方法

采集血樣：采集清晨空腹靜脈血2 ml,室溫下靜置2-3 h后上臺式高速離心機2 000 r/min離心1 min,提取上層清液,保存待檢。

血漿(1,3)-β-D葡聚糖水平的檢測：(1)取0.1 ml血小板血漿放入0.9 ml樣品處理溶液(北京金山科技發展有限公司生產的GKT1M Set動態真菌檢測試劑盒)中,然后充分混勻后置于TO1智能恒溫儀內保溫10 min(70℃),最后取出立即置于冰浴槽內進行冷卻處理3 min,即可得待測血漿樣品。(2)在酶反應主劑內放入0.2 ml待測血漿樣品,移取0.1 ml溶液至除熱原96孔微板孔內,后插入MB-80微生物動態快速檢測系統內反應1 h,結束后自動計算出血漿(1,3)-β-D葡聚糖的表達水平。參考范圍：≥10 pg/ml為陽性,<10 pg/ml為陰性,操作期間應避免污染,嚴格遵守無菌環境操作。

真菌培養法：(1)患者服用抗菌藥物前在無菌環境下采集痰液及中段尿液等可疑分泌物標本,并接種于顯色平板(凱林念珠菌)內,在25℃下孵育反應24-28 h。(2)同時采集2套血培養瓶進行培養(上海躍進SPX-400-II生化培養箱),7 d后均接種顯色平板培養,如果平板出現真菌,則分純處理后予以重屬鑒定(ATB Expression半自動微生物分析儀和法國生物梅里埃酵母菌鑒定試劑盒)。

1.3 統計學方法

2 結果

2.1 基線資料

表1結果可見,三組患者的基線資料無明顯統計學差異(P>0.05)。

表1 三組患者的基線資料比較

2.2 治療前后的血漿(1,3)-β-D葡聚糖表達情況

表2結果可見,治療前觀察組患者的血漿(1,3)-β-D葡聚糖水平及其陽性表達率明顯高于對照組和健康對照組(t=12.66、21.35,P<0.01；χ2=33.95、82.58,P<0.01)；治療后觀察組患者的血漿(1,3)-β-D葡聚糖水平及其陽性表達率明顯低于治療前(t=17.41、12.34,P<0.01；χ2=67.20、20.48,P<0.01),治療后觀察組血漿(1,3)-β-D葡聚糖水平明顯高于對照組和健康對照組(t=2.891,4.882,P<0.01),但血漿(1,3)-β-D葡聚糖水平陽性表達率與對照組、健康對照組均無明顯統計學差異(χ2均=2.377,P=0.12)。

表2 三組患者的血漿(1,3)-β-D葡聚糖表達情況比較

2.3 不同檢測方法在非侵襲性真菌性鼻竇炎患者中的診斷價值

表3結果可見,血漿(1,3)-β-D葡聚糖試驗在非侵襲性真菌性鼻竇炎患者中的敏感度、陰陽性預測值及準確率均明顯高于真菌培養試驗(P<0.05)。

表3 兩種檢測方法在非侵襲性真菌性鼻竇炎患者中的診斷價值比較(例,%)

3 討論

真菌性鼻竇炎主要由真菌感染引發,具有一定的特征性,此類患者往往會有明顯鼻塞癥狀,鼻內分泌物為膿性,有些患者會同時存在頭痛、頭暈及耳鳴等臨床癥狀,嚴重影響了患者的日常生活[5,6]。根據病理類型不同,真菌性鼻竇炎可以分成急性暴發型、慢性侵襲性、真菌球型和變應性真菌性四種,其中前兩類為侵襲性,感染對附近結構及組織的侵犯較為顯著,根據影像學檢查及病史體征較易診斷；后兩類為非侵襲性,在臨床上較為常見,其臨床癥狀不明顯,發病也較隱匿,不易被發現,往往確診時已錯過最佳治療時間[7],故如何及早、有效、精準地診斷非侵襲性真菌性鼻竇炎是臨床上亟待解決的難題。

以往臨床上主要通過患者的癥候群、病史及病理學、影像學、真菌學等檢查結果進行診斷,臨床實踐結果顯示,影像學變化較為典型的患者一般診斷準確率較高,而影像學表現不夠典型的患者則不易被診出[8,9]。盡管術后真菌學或病理學檢查可以幫助確診,但錯過了最佳治療方案的選擇時機,不利于患者術后恢復。血漿(1,3)-β-D葡聚糖為真菌細胞壁成分,占有率超過50%,一旦真菌侵入機體血液及深部組織內,會受到吞噬細胞吞噬及消化等處理,此時(1,3)-β-D葡聚糖就會從胞壁內大量釋放及逃逸,血液或其他體液內的(1,3)-β-D葡聚糖水平就會迅速上升[10,11]。本研究結果顯示,治療前觀察組患者的血漿(1,3)-β-D葡聚糖水平及其陽性表達率明顯高于對照組和健康對照組(t=12.66、21.35,P<0.01；χ2=33.95、82.58,P<0.01)；治療后觀察組患者的血漿(1,3)-β-D葡聚糖水平及其陽性表達率明顯低于治療前(t=17.41、12.34,P<0.01；χ2=67.20、20.48,P<0.01),血漿(1,3)-β-D葡聚糖水平明顯高于對照組和健康對照組(t=2.891,4.882,P<0.01),但血漿(1,3)-β-D葡聚糖水平陽性表達率與對照組、健康對照組均無明顯統計學差異(χ2=2.377、2.424,P=0.12),提示血漿(1,3)-β-D葡聚糖可輔助快速、簡便、正確地診斷非侵襲性真菌性鼻竇炎患者。此外,血漿(1,3)-β-D葡聚糖試驗在非侵襲性真菌性鼻竇炎患者中的敏感度、陰陽性預測值及準確率均明顯高于真菌培養試驗(P<0.05),提示血漿(1,3)-β-D葡聚糖在非侵襲性真菌性鼻竇炎患者中具有突出的診斷價值。

總之,血漿(1,3)-β-D葡聚糖試驗對非侵襲性真菌性鼻竇炎患者具有突出的診斷價值,且操作簡便、檢測時間短、結果較可靠,值得大力推廣。