重組禽流感病毒( H5+H7)二價滅活疫苗(H5N1Re-8株+H7N9 H7-Rel株)的不同免疫劑量對融水香 鴨免疫效果分析

韋鈺 曾慶倫 蒙文娟 劉佳佳 謝艷林 蔣才淼 覃超林 陳息振 王敏

摘要：為研究重組禽流感病毒（ H5+H7）二價滅活疫苗（H5NI Re-8株+H7N9 H7-Rel株）的不同免疫劑量對融水香鴨免疫的效果。選取120只14日齡的商品融水香鴨，按照隨機(jī)原則將其劃分為試驗(yàn)一組、試驗(yàn)二組以及對照組，試驗(yàn)一組和試驗(yàn)二組融水香鴨分別在14日齡進(jìn)行首次免疫，試驗(yàn)一組首次免疫接種0.5 mL，頸部皮下注射，試驗(yàn)二組首次免疫接種1mL頸部皮下注射，分別在免疫接種后的第21、28、60和90天采集試驗(yàn)組和對照組融水香鴨新鮮血液進(jìn)行H5NI Re-8株和H7N9 H7-Rel株抗體水平檢測。檢測結(jié)果顯示，不同疫苗注射劑量抗體水平存在一定差異，其中試驗(yàn)二組的抗體水平比試驗(yàn)一組要好，但兩者之間對比差異性不大。試驗(yàn)二組的融水香鴨在進(jìn)行第1次免疫接種后所產(chǎn)生的副反應(yīng)相對較高，因此，建議在進(jìn)行首次免疫接種時，免疫注射劑量控制在0.5 mL。同時，試驗(yàn)二組的融水香鴨在免疫接種90 d后，抗體水平下降較為嚴(yán)重，要保證總體免疫效果需要對融水香鴨進(jìn)行第2次強(qiáng)化免疫接種。

關(guān)鍵詞：重組禽流感病毒二價滅活疫苗;不同免疫劑量;免疫效果

中圖分類號：S858.31

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B

doi： 10.3969/j.issn.2096-3637.201 9.10.005

0 引言

為進(jìn)一步研究重組禽流感病毒二價滅活疫苗對鴨子產(chǎn)生的免疫效果，選取了14日齡的商品融水香鴨，對其進(jìn)行了不同劑量的疫苗免疫接種，現(xiàn)將具體研究內(nèi)容介紹如下。

1 材料與方法

1.1 材料選取

采集鴨子的新鮮血液，進(jìn)行禽流感病毒檢測，不存在患病情況，母源抗體水平符合免疫接種標(biāo)準(zhǔn)[1]。疫苗為重組禽流感病毒（ H5+H7）二價滅活疫苗（H5NI Re-8株+H7N9 H7-Rel株），批準(zhǔn)文號為獸藥臨字080012297，批號為2017028，生產(chǎn)企業(yè)為哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司。試驗(yàn)于2017年4月13日進(jìn)行。本次所選用的疫苗主要為預(yù)防H5亞型和H7亞型禽流感病毒引發(fā)的禽流感。疫苗需要在2-8℃環(huán)境下保存，有效期為12個月。

1.2 方法

按照隨機(jī)原則將120只14日齡的商品融水香鴨劃分為3個組別，分別為試驗(yàn)一組、試驗(yàn)二組以及對照組，試驗(yàn)一組和試驗(yàn)二組融水香鴨分別在14日齡進(jìn)行首次免疫，試驗(yàn)一組首次免疫接種0.5 mL，頸部皮下注射，試驗(yàn)二組首次免疫接種1 mL，頸部皮下注射，27日齡后試驗(yàn)一組和試驗(yàn)二組融水香鴨分別頸部皮下注射重組禽流感病毒二價滅活疫苗1.5 mL，對照組不免疫接種重組禽流感病毒二價滅活疫苗。分別在免疫接種后的21、28、60和90 d采集試驗(yàn)組和對照組融水香鴨新鮮血液各20份進(jìn)行H5NI Re-8株和H7N9 H7-Rel株抗體水平檢測[2]。本次研究過程中H5亞型和H7亞型禽流感病毒抗體水平監(jiān)測主要按照國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，采用血凝抑制試驗(yàn)開展檢測。在檢測中需要H5NI Re-8株抗原和陽性血清、H7N9 H7-Rel株抗原和陽性血清。檢測中主要使用到的設(shè)備為900微型血凝板、微量移液器、微量振蕩器、離心機(jī)。使用到的試劑主要包括O.OI moL/L的PBS緩沖稀釋液、阿氏液1%的雞紅血細(xì)胞懸液。H5亞型和H7亞型禽流感病毒抗體水平HI>4 log2表示免疫合格[3]。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

選擇使用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，對免疫一組、免疫二組進(jìn)行t檢驗(yàn)差異分析。

2 結(jié)果

2.1 H5N1 Re-8株抗體水平檢測

結(jié)合表1可知，對照組融水香鴨在21、28、60和90 dH5NI Re-8株抗體水平呈現(xiàn)下降趨勢。試驗(yàn)一組融水香鴨在免疫接種21、28、60、90 d，平均抗體滴度呈現(xiàn)下降趨勢，但均能維持在合格水平以上。由此可得，加大疫苗免疫劑量21 - 28 d能提高免疫效果，但隨著免疫時間的增長，免疫效果逐步下降到90 d后低于合格水平。不同劑量重組禽流感二價滅活疫苗接種融水香鴨后，隨著免疫時間的增加，抗體效價呈現(xiàn)下降趨勢，第1次免疫接種90 d后試驗(yàn)一組和試驗(yàn)二組免疫效果普遍較差，需要引導(dǎo)養(yǎng)殖戶重點(diǎn)做好第2次強(qiáng)化免疫接種。見表1。

2.2 H7N9 H7-Rel株抗體水平檢測

結(jié)合表2數(shù)據(jù)可知，對照組融水香鴨在第21、28、60、90天H7N9 H7-Rel株抗體水平呈現(xiàn)下降趨勢。試驗(yàn)一組融水香鴨在免疫接種21 - 28 d，抗體水平逐步提升，60 - 90d，抗體水平呈現(xiàn)下降趨勢。試驗(yàn)二組融水香鴨同樣存在上述發(fā)展趨勢，免疫接種21 - 28 d，抗體水平呈現(xiàn)上升趨勢，到第90天逐步下降到合格范圍以內(nèi)。試驗(yàn)一組和試驗(yàn)二組抗體水平合格率之間差異性不顯著。由此可知，不同免疫劑量免疫接種融水香鴨后，不會對提高鴨子抗體水平產(chǎn)生多大影響，都會隨著免疫時間的增長，抗體水平呈現(xiàn)下降趨勢。而試驗(yàn)二組的融水香鴨在免疫接種大劑量的二價滅活疫苗后，會出現(xiàn)較多的不良反應(yīng)。因此，為降低經(jīng)濟(jì)損失，減少不良反應(yīng)發(fā)生率，建議第1次免疫接種量控制在0.5 mL。見表2。

3 討論與結(jié)論

試驗(yàn)一組和試驗(yàn)二組分別免疫接種0.5、1mL，經(jīng)過抗體水平檢測，兩者之間存在一定的差異，但差異性不大。試驗(yàn)二組融水香鴨免疫接種1 mL，所表現(xiàn)卅來的應(yīng)激反應(yīng)較為嚴(yán)重，不利于實(shí)現(xiàn)持續(xù)化生產(chǎn)，會對鴨子的健康生長造成一定影響，建議在進(jìn)行第1次疫苗免疫接種時，將免疫劑量控制為0.5 mL。另外，通過抗體水平監(jiān)測可以發(fā)現(xiàn)隨著免疫時間的增長，試驗(yàn)一組和試驗(yàn)二組的融水香鴨抗體水平均呈現(xiàn)明顯下降趨勢，到90 d抗體水平已經(jīng)達(dá)到合格范圍警戒線。由此可知，只進(jìn)行一次免疫接種免疫效果較差，建議在免疫接種21 d后進(jìn)行第2次強(qiáng)化免疫接種，每只鴨子頸部皮下接種1.5 mL。

參考文獻(xiàn)

[l]張秀環(huán)，林杰，劉彬.重組禽流感病毒（H5+H7）二價滅活 疫苗H7免疫效果實(shí)驗(yàn)[J].獸醫(yī)導(dǎo)刊，2018（ ll）：70-71.

[2]李志賢，虞與理，禹婷婷.三黃雞免疫重組禽流感病毒（ H5+H7）二價滅活疫苗血清抗體檢測試驗(yàn)報告[J]獸醫(yī)導(dǎo)刊，2018（ 19）：69-71.

[3]周柱輝，陳松春，潘杰，等雞免疫重組禽流感（H5+H7）二價滅活疫苗效果評價[J].養(yǎng)禽與禽病防治，2018 （6）：13-15

作者簡介：韋鈺（1977-），女，壯族，廣西融水人，大專，畢業(yè)于廣西職業(yè)技術(shù)學(xué)院，研究方向：動物疫病預(yù)防和控制。909CD6B6-A185-48A6-A449-2EF3316EB799