喻明軍
摘要:研究證明桑葉多糖具有抗腫瘤、抗氧化、消炎等生物活性,在保健品和藥品中有著良好的應用前景.桑葉多糖的提取是這些研究的前提.本文對近年來關于桑葉多糖提取工藝的研究進行了綜述,以期為桑葉多糖提取的深入研究提供借鑒參考.
關鍵詞:桑葉多糖;熱水提取;超聲波提取;微波提取;酶促提取
中圖分類號:Q53? 文獻標識碼:A? 文章編號:1673-260X(2019)08-0038-02
1 引言
桑樹在我國種植廣泛,因此桑葉資源非常豐富.我國把桑葉作為中藥使用由來已久,具有疏散風熱、清肺潤燥、清肝明目等功效.桑葉中多糖含量豐富是桑葉的主要功能性成分之一.大量科學研究表明,桑葉多糖有降血糖活性、抗腫瘤、抗氧化、抗動脈粥樣硬化、抗炎和抑菌[1-4]等多種生物學活性.桑葉多糖的提取是研究其生物活性的前提條件,因此研究桑葉多糖的提取工作具有非常重要的現(xiàn)實意義.本文就桑葉多糖的提取研究進展做一綜述.
2 桑葉多糖的提取方法
2.1 水提取法
水浸提法是提取多糖的一種傳統(tǒng)方法,在多糖的提取中廣泛應用.對于熱水提取法,國內外研究的比較多,主要是尋找最佳的提取溫度、提取時間、pH和最佳的料液比.在研究中部分研究者通過正交實驗來確定最佳的提取工藝條件,如王芳等[5]人通過正交實驗確定的最佳提取工藝條件是提取溫度80℃,時間1h,料液比1:40,桑葉多糖的得率約為11.50%.王淑萍等[6]人通過三因素三水平正交實驗優(yōu)化出最佳的提取工藝為料液比1:9,提取時間90min,提取溫度90℃,桑葉多糖的得率為8.08%.還有些研究者通過利用響應面法來優(yōu)化提取條件,如韓愛芝等[7]采用響應面法試驗設計對藥桑葉多糖提取條件進行優(yōu)化,得出在液料比25:1,提取溫度90℃,提取時間3h條件下,藥桑葉粗多糖提取率最高為13.39±0.53%.劉軍海等[8]利用響應面法對桑葉多糖的提取工藝進行優(yōu)化,得出桑葉多糖浸提的最佳工藝條件為:料水比1:19,浸提溫度96℃,浸提時間2.5h,浸提2次,桑葉多糖的實際一次提取率可達3.094%.
2.2 超聲提取法
超聲提取法是利用超聲波產(chǎn)生的空化效應及攪拌作用破壞植物細胞的細胞膜,從而加快細胞內有效活性成分的釋放與溶出相比于傳統(tǒng)的提取法,其提取效率高、速度快.
桑葉多糖的超聲提取是與熱水提取法相結合的,用超聲輔助熱水提取來提高收得率、提取效率和降低能耗.在超聲提取的時候通過優(yōu)化超聲功率、提取溫度、超聲時間和料液比等來獲得最佳的提取工藝.劉學軍等[9]報道了對超聲波功率、溫度、時間和粒徑4個參數(shù)進行正交實驗優(yōu)化,得到的最佳提取工藝條件是超聲波功率50W,提取溫度為85℃,提取時間2.5h,收得率為10.74%.王芳等[5]人報道了超聲功率300W,超聲處理10min之后水浸提多糖的得率為12.25%.Zhang等[10]人報道了最佳超聲波提取條件為溫度57℃,提取時間80min,液固比53mL/g,產(chǎn)率為6.92±0.29%.Ying等[11]人報道了超聲波提取的最佳條件是提取功率60W,提取溫度60℃,提取時間20min,水與原料的比例為15:1,收得率為10.79%.通過對比超聲輔助熱水提取和直接熱水提取可以發(fā)現(xiàn),提取溫度相對降低了,提取時間也相對減少了,對降低能耗和生產(chǎn)成本有一定的幫助,但是提取收率未有明顯的提高.
2.3 微波提取法
目前,與其他常規(guī)方法相比,微波輔助提取被廣泛用于從各種植物材料中提取多糖,因為其提高了提取效率.當微波輔助提取用于提取多糖時,溫度會快速升高,降低乳液粘度,破壞植物材料外膜,提高提取率.同時還會發(fā)生分子旋轉,導致離子的運動增強,提高了萃取過程的效率.
Liu等[12]人報道了超聲微波輔助提取,其最優(yōu)的提取條件是提取溫度76℃,提取時間807s,pH值6.16,料液比1:40,實驗得率為10.29±0.41%,大大好于熱水提取4.67%的收得率.王尉等[13]人報道了通過Box-Behnken設計3因素3水平的試驗得出的最優(yōu)提取條件為溫度88oC,提取時間11min和料液比為1:18,收得率為15.20%,是相同時間的熱水提取收得率的2.18倍.從以上可以看出,微波提取具有時間短,溫度低,收得率高的優(yōu)點,但還未見有大規(guī)模生產(chǎn)的報道.
2.4 酶提取法
植物細胞由纖維素、半纖維素和果膠質等成分構成,這些物質阻礙了胞內多糖等大分子的溶出,選用合適的酶對待提取物進行預處理,能夠分解這些物質,從而破壞細胞壁的結構,有利于糖類物質的溶出,這會縮短提取時間從而提高提取效率.
研究酶法提取桑葉多糖的報道較少,王芳等[5]報道了利用纖維素酶、果膠酶、胰蛋白酶來提取桑葉多糖,并比較了這三種酶的提取效率,得出纖維素酶的提取效果最好.其最佳的提取條件為纖維素酶用量為桑葉量的1.5%,酶解時間2h,酶解溫度50℃,酶處理后水提多糖得率為12.49%.夏平等[14]人報道了用纖維素酶和果膠酶的復合酶水解,其最佳提取條件為溫度50℃,pH為4.5,酶用量1.0%,提取1h,桑葉多糖的提取收得率為14.32%.酶法提取桑葉多糖的條件比較溫和,提取效率高時間短有利于降低能耗,并且提取收得率相對較高,有繼續(xù)研究的價值.
3 桑葉多糖提取相關的專利
有關桑葉多糖提取的專利比較多,如李翠清等[15]在專利中利用CO2超臨界萃取桑葉后再利用乙醇萃取、沉淀、過濾得到多糖.章華偉等[16]在專利中利用微波提取,然后將提取液,加酸調節(jié)pH值至2-5,再加入乙酸乙酯萃取,將水層用三氯乙酸溶液調節(jié)pH值至2-3,降溫、攪拌、靜置后,離心除去沉淀物,將上清液超濾,濃縮到多糖質量濃度為5%-15%,超濾膜截留分子量為5000D-10000D,濃縮液中加入乙醇,降溫、攪拌、靜置后,離心,即得桑葉多糖產(chǎn)品.
4 結論及展望
目前對熱水浸提法提取桑葉多糖的研究最多,其提取溫度主要在80℃-100℃之間,液料比也在20:1-40:1之間,提取時間在1-3小時之間,多糖提取收得率在10%-13%之間.雖然這種提取方法的缺點是能耗高、廢水多,但是其優(yōu)點也很明顯,其對設備條件要求不高且操作簡單,多糖的回收率也適中.因此熱水提取依然是采用最多的方法.目前超聲波輔助提取桑葉多糖的最佳提取溫度大多在50℃-60℃之間,對比于直接熱水提取的80℃-100℃,可以看出超聲波輔助提取顯著降低了提取溫度,提取時間也大多控制在1小時以內.由于超聲波提取降低了生產(chǎn)能耗,在當今節(jié)減排的大背景了,應積極發(fā)展超聲波提取桑葉多糖.微波法提取桑葉多糖,提取時間短,大多在10min以內,多糖收得率較熱水提取高.同時微波還可以起到滅活酶和細菌的作用,是一種極具發(fā)展?jié)摿Φ男滦吞崛〖夹g.隨著提取新技術的不斷出現(xiàn)和不斷完善,桑葉多糖的提取將會變得更加高效、更加環(huán)保.
桑葉多糖具有抗凝血、抗氧化、抑菌等多種藥理作用,因此其在藥品和保健品的開發(fā)方面具有廣闊的前景.目前對桑葉多糖提取方法和工藝條件研究的比較透徹,將有利于桑葉多糖的深度開發(fā)利用.但是目前對桑葉多糖的純化研究不多,目前的純化工藝還比較繁瑣,且損失較大.因此,對桑葉多糖的純化將是今后的研究重點和難點.
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參考文獻:
〔1〕A Hunyadi, A Martins, TJ Hsieh, et.al. Chlorogenic acid and rutin play a major role in the in vivo anti-diabetic activity of Morus alba leaf extract on type II diabetic rats[J].Plos One, 2012, 7 (11):e50619.
〔2〕GN Kim, HD Jang Flavonol content in the water extract of the mulberry (Morus alba L.) leaf and their antioxidant capacities[J].Journal of Food Science, 2011, 76 (6) :869-73.
〔3〕A Hunyadi, A Martins, TJ Hsieh, et.al. Chlorogenic acid and rutin play a major role in the in vivo anti-diabetic activity of Morus alba leaf extract on type II diabetic rats[J].Plos One, 2012 , 7 (11) :e50619.
〔4〕E Park, SM Lee , JE Lee, et.al. Anti-inflammatory activity of mulberry leaf extract through inhibition of NF-κB[J].Journal of Functional Foods, 2013 , 5 (1) :178-186.
〔5〕王芳,鄭海雪.桑葉多糖的提取工藝研究[J].浙江師范大學學報(自然科學版),2008,31(1):79-83.
〔6〕王淑萍,田甜.桑葉多糖提取工藝優(yōu)化研究[J].長春工程學院學報(自然科學版),2014,15(3):123-125.
〔7〕韓愛芝,王麗君,賈清華,等.藥桑葉多糖提取工藝優(yōu)化及其降血糖活性研究[J].中國釀造,2017,36(8):139-143.
〔8〕劉軍海,黃寶旭,許恩慶.桑葉多糖提取工藝研究[J].中國食品添加劑,2009(5):91-95.
〔9〕劉學軍,李云平,胡恒彬,劉繼延.超聲波提取桑葉多糖工藝條件優(yōu)化[J].北方蠶業(yè),2007,28(3):11-13.
〔10〕Dong-Yang Zhang, Yi Wan, Jian-Yi Xu, et.al. Ultrasound extraction of polysaccharides from mulberry leaves and their effect on enhancing antioxidant activity[J].Carbohydrate Polymers ,2016(137) :473-479.
〔11〕Zhi Ying, Xiaoxiang Han, Jianrong Li. Ultrasound-assisted extraction of polysaccharides from mulberry leaves[J]. Food Chemistry, 2011(127):1273-1279.
〔12〕Fan Liu, Rui-Hong Hou, Sen-Tai Liao, et.al. Optimisation of Ultrasonic-Microwave-Assisted Extraction Conditions for Polysaccharides from Mulberry(Morus atropurpurea Roxb) Leaves and Evaluation of Antioxidant Activities in vitro[J]., Med chem, 2015, 5(2):90-95.
〔13〕王尉,徐春明,曹學麗.響應面法優(yōu)化微波輔助提取桑葉多糖的工藝研究[J].北京工商大學學報(自然科學版),2009,27(4):6-9.
〔14〕夏平,謝何青.復合酶法提取桑葉中多糖的工藝條件優(yōu)化[J].安徽農業(yè)科學,2009,37(1):198-199.
〔15〕李翠清,王騰,李繼文,張紅.從桑葉中連續(xù)提取分離多糖及1-脫氧野尻霉素的方法[P].CN201210462979.5.
〔16〕章華偉,錢俊青,高水榮.一種高純度桑葉多糖的制備方法[P].CN200910153701.8.