雞球蟲病疫苗不同接種方法的免疫效果比較

摘要：球蟲病是我國養雞生產中常見且危害十分嚴重的原蟲病。目前，每年因雞球蟲病產生的藥費約占雞常見疾病防治費用的25%，對我國養雞業造成巨大的經濟損失。隨著球蟲耐藥性的普遍發生，抗球蟲藥對生態環境的污染以及藥物殘留問題備受關注，而藥物治療手段越來越有限，選擇疫苗預防雞球蟲病逐漸成為主流。

關鍵詞：雞球蟲病;疫苗;接種方法;免疫效果

中圖分類號：S858.31

文獻標識碼：B

doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2019.05.001

0引言

球蟲疫苗不同的免疫接種方法會影響免疫效果，常見的包括滴眼、滴口、噴霧、拌料以及飲水等接種方法。其中飲水、拌料是目前大部分雞場常用的接種方式，其操作簡單、應激小，但在規模化養殖情況下，人工的工作量較少。氣霧法免疫可做到流水線式免疫，解放人手，方便快捷，但是國內研究相對較少，是否適合生產應用還有待研究[1]。

1試驗材料與方法

1.1材料

1日齡無球蟲感染的黃羽肉雞，購自廣東省農業科學院畜牧研究所種雞場，隔離飼養于經火焰消毒的雞籠，飲用潔凈自來水，飼養至試驗日齡時備用;添加抗球蟲藥物和抗生素的全價飼料;球蟲病四價活疫苗，攻蟲用強毒卵囊（嫩艾美耳球蟲、毒害艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲和堆型艾美耳球蟲）;鹽水溶液：氯化鈉380g，蒸餾水1000mL，加熱溶解，比重為1.18。

生物顯微鏡、麥克馬斯特計數板（規格10計數板）、電子稱、金屬底座計數器、噴霧機、料筒、水壺、60目金屬網篩、燒杯、乳膠頭滴管、手持噴霧器等。

1.2方法

1.2.1不同日齡飲水免疫試驗分組及處理

取1日齡黃雞20只作為飲水免疫1組;取4日齡黃雞20只作為飲水免疫2組;飲水免疫組分別在1日齡和4日齡進行雞球蟲病四價活疫苗飲水免疫，1羽份/雞，每組采取地上平養。其具體步驟如下。

取6L飲用水，再倒入1瓶1000羽份/瓶球蟲活疫苗，加入疫苗助懸劑，充分混勻，然后準確量取120mL分裝到飲水器中，供20羽雞自由飲用4-5h，免疫前不停水。

1.2.2噴霧免疫試驗分組及處理

（1）口服免疫：直接將疫苗稀釋好1羽份接種。

（2）噴霧免疫：將疫苗與水按1：9、1：19稀釋，攪拌均勻，將2種稀釋好的疫苗分別裝入噴霧機，把裝有試驗雛雞的紙箱放入噴霧罩內，進行噴霧免疫（通過雞的啄羽行為，把粘在羽毛上面的疫苗啄食進體內）。

1.2.3不同接種方法免疫試驗分組及處理

第1組為對照組，第2組噴霧免疫將疫苗與水按1：19稀釋，攪拌均勻，將稀釋疫苗裝入噴霧機，把裝有試驗雛雞的紙箱放入噴霧罩內，進行噴霧免疫;第3組拌料免疫取1瓶1000羽份/瓶球蟲活疫苗倒入0.4L水中，加入0.2g食品紅，攪拌均勻，稀釋好后裝入手持噴霧器中，再稱取4kg飼料，將疫苗噴灑到飼料上，邊噴霧邊攪拌飼料，準確稱取70g飼料分裝到料盤中供70羽雞自由采食;第4組飲水免疫取6L飲用水，再倒入1瓶1000羽份/瓶的球蟲活疫苗，加入疫苗助懸劑，充分混勻，然后準確量取42 mL分裝到飲水器中，供70羽雞自由飲用4-5h，免疫前不停水[2]。

1.2.4免疫試驗觀察項目

（1）臨床觀察，記錄各組雞只精神、毛色、食欲和糞便等情況。

（2）免疫均勻性，每組分別于免疫后6d隨機取10只雞的糞便，用飽和鹽水漂浮單獨檢測每只雞的小腸糞和盲腸糞的卵囊檢出率。

（3）卵囊OPG值，免疫組4-21d，每組每天取小腸糞和盲腸糞，按4：1的比例混合后，用麥氏計數法計糞便的卵囊OPG值。

2結果

2.1攻蟲期間雞的增重情況

統計雞在攻蟲前和攻蟲后陰性對照組、陽性對照組、噴霧免疫組、拌料免疫組、飲水免疫組的增重情況，計算各組雞的相對增重率。見表1、圖1。

試驗用柔嫩、毒害、巨型、堆型艾美耳球蟲的混合株，其劑量分別為10萬、3萬、3萬、7萬個卵囊。3種免疫途徑接種雞球蟲病四價活疫苗均對雞產生了免疫保護效果，而拌料和飲水免疫方法的效果比較好，噴霧免疫方法的保護效果一般。

2.2攻蟲期間各組雞存活率

攻蟲后第6天，對各組試驗雞糞便進行觀察，并記錄血便情況，其中陽性組血便最嚴重，其次為噴霧免疫組，飲水免疫組和拌料免疫組有少量血便。

攻蟲第6天，觀察各組試驗雞的精神狀態、血便情況，并記錄各組雞的死亡情況，見表2。

攻蟲第6天，陽性組雞精神沉郁、羽毛蓬亂、消瘦、排血便，其死亡率為12.5%，而噴霧免疫組、拌料免疫組和飲水免疫組雞的狀態活潑、羽毛比較光滑，血便比較少，其死亡率為0。各組試驗雞的死亡率和精神狀態說明了各種免疫方法均能對小雞產生一定的保護力。

3討論

3.1不同日齡接種疫苗的效果分析

從攻蟲后各組雞的增重對比分析，強毒株球蟲對陽性對照組、1日齡免疫組、4日齡免疫組的增重均有部分影響，但2個免疫組雞相對增重率顯著高于陽性對照組，這表明球蟲疫苗產生了免疫保護效果。在攻蟲后的腸道各段病變情況和血便情況分析中也體現出1日齡免疫組和4日齡免疫組均能產生有效免疫保護，說明1日齡和4日齡免疫球蟲活疫苗均能產生免疫保護效果。試驗結果：雞在1日齡時接種雞球蟲病四價活疫苗，能產生良好的免疫保護效果，與4日齡接種雞球蟲病四價活疫苗的免疫效果無明顯差別，在1日齡時接種雞球蟲病四價活疫苗可行。

3.2噴霧免疫接種不同稀釋量效果分析

在噴霧免疫不同稀釋量的試驗中，從疫苗與水1：9的噴霧免疫1組和疫苗與水1：19噴霧免疫2組進行免疫接種后第5-7天排泄卵囊情況分析，噴霧免疫2組雞的卵囊各種卵囊的相對比例和總卵囊的相對比例均高于免疫1組。這表明將疫苗與水進行1：19稀釋的濃度使用時將會有更多的卵囊進入雞體內。噴灑更多的霧劑可減緩水分蒸發速度，卵囊能在霧劑中長時間保持活性。霧劑中高濃度的卵囊可增加雞單次啄食進入雞體內的卵囊量，但雞身上的霧劑過少會使水分很容易蒸發，卵囊逐漸會因十燥而死亡[3]。除調整濃度外，在霧劑中加入有顏色的染料或許對于其免疫接種效果更好，據研究表明，雞對紅色敏感，在疫苗中加入紅色的染料后，90%-95%雞會被羽毛上疫苗霧劑中的紅色染料吸引，其后雞便會啄食自身或其他雞羽毛上的疫苗霧劑。試驗結果表明，疫苗與水1：19稀釋進行噴霧免疫的接種效果稍好。

4結束語

研究通過分析攻蟲前后增重情況、臨床觀察與攻蟲后腸道各段病變情況，證明3種免疫方法接種雞球蟲病四價活疫苗均可對雞產生免疫保護力。飲水免疫和拌料免疫的臨床效果均好于噴霧免疫方法，但這2種免疫方法效果差別不大，噴霧免疫效果最差。

參考文獻

[1]陳敬昌.雞球卵囊囊排出動態及球蟲病免疫防制探討[D].廣州：華南農業大學，2005.

[2]鄧雯，馬彥博，劉玉梅.雞球蟲對機體的致病作用研究進展[J].家畜生態，2004，6（2）：59-62.

[3]段嘉樹.雞球蟲病免疫：I.球蟲病特點和免疫原理[J].中國動物保健，2004，3（4）：7-12.

作者簡介：沈國聰（1985-），男，碩士，研究方向：獸醫學。