摘要:近年,胚胎繁殖技術在畜牧養殖產業中的應用頻率不斷增加,在畜禽品種改良方面發揮了不可替代的作用,為我國牛羊品種良種化進程作出了突出貢獻。應用胚胎繁殖技術能加速牛羊品種改良進程,有效解決傳統牛羊品種改良周期長、耗費成本高的缺點,極大提高繁殖效率。該文分析了牛羊品種改良胚胎繁殖技術,并論述了影響該項技術推廣應用的主要因素。
關鍵詞:牛羊品種改良;胚胎繁殖技術;影響因素
中圖分類號:S823
文獻標識碼:B
doi:10.3969/j.issn.2096-3637.2019.05.056
0引言
胚胎移植又被稱為受精卵移植,胚胎繁殖技術的推廣應用對于提高優良母畜的繁殖能力,加強品種改良進程、產雙胎率、克服母畜不孕癥、降低引種費用、減少生殖系統疾病傳播等方面具有十分重要的應用價值。近年,隨著牛羊品種改良進程的不斷推進,胚胎繁殖技術的應用比例越來越大,胚胎移植技術得到了進一步的應用發展。牛羊胚胎移植技術作為現代牛羊養殖產業的一項重要技術,在生產和科學研究方面具有十分重要的應用前景。
1胚胎繁殖技術
牛羊品種改良中的胚胎繁殖技術的推廣應用主要包括供體母牛母羊和受體母牛母羊的正確選擇、供體母牛母羊和受體母牛母羊的同期發情處理、供體母牛母羊的超排卯處理、成功受胎的胚胎回收和冷凍保存、胚胎質量檢測、胚胎移植、妊娠診斷等一系列工作。
1.1同期發情處理
供體母牛母羊在選擇過程中,要選擇年齡2-7周歲的經產母牛或母羊,品種性狀優良,具有該品種典型的遺傳特征和育種價值,遺傳性能穩定,不存在各種傳染性疾病和遺傳疾病,身體健壯,采食欲望旺盛。在應用胚胎繁殖技術前,相應的技術人員需要對供體母牛母羊的身體健康情況進行全面檢查,并持續觀察該頭母牛母羊的發情時間,掌握母牛母羊的發情規律。在進行胚胎移植前,禁止隨意改變供體母牛母羊的養殖環境,避免產生應激。受體母牛母羊年齡為2-5歲,具有正常的發情周期,身體健壯,采食欲望旺盛,不存在各種生殖系統疾病,能順利生產,并且有生生產經驗。供體母牛母羊和受體母牛母羊選擇后,需要對其進行同期發情處理。通常主要使用外源性的性激素,保證其發情期和排卯期相近,差異不能超過ld。在同期發情處理過程中常用的外源性性激素主要包括P4、LH、PMSG、PGC等幾種[1],其中最后一種外源性性激素具有很好的溶解黃體的能力,有利于保證供體母牛母羊和受體母牛母羊的同期發情,效果較好,價格較低,使用方便,在牛羊胚胎繁殖技術應用中使用較多。
1.2供體母牛母羊超排卵處理
超排卵處理是在母牛母羊的1個發行周期內選擇合適的時間,人為注射外源性的促性腺激素,加速卵巢生長發育,增加排卵數量。在牛羊胚胎繁殖技術應用中對供體母牛母羊進行超排卯處理的目的是能一次性獲得更多胚胎。通常一次超排卵最好能回收10枚以上的胚胎,如果數量較少,難以回收,數量較多會嚴重影響受精率。
1.3胚胎采集
胚胎采集工作主要在供體母羊和母牛在正常受精后6-7d內進行。在采集中先將母牛和母羊正常綁定,確保保定架前高后低,前后相差20cm左有。然后選擇使用2%的普魯卡,因對母牛和母羊進行尾椎硬膜外腔麻醉處理。在胚胎收集前,應對母牛的外陰和后期肢體進行嚴格的衛生消毒,然后使用開張器將子宮開張,小心清理子宮內部的各種粘液,使用二通管對子宮進行沖洗,當沖洗液收集到潔凈消毒過的錐形瓶中。
1.4胚胎檢測
在對胚胎進行檢測前,應將回收回來的沖洗液靜置30min以上,然后選擇使用實體顯微鏡,尋找溶液中的胚胎。選擇使用經過消毒的吸管,吸取沖洗液放置在PBS保存滴液中,作用一段時間后將其放在200倍顯微鏡下觀察,根據胚胎質量標準分級,將胚胎分為ABCD4個等級,選擇最優質的胚胎。
1.5胚胎保存
目前胚胎保存主要分為3種:常規冷凍保存、直接冷凍保存和玻璃化冷凍保存。首先,常規冷凍保存。胚胎常規冷凍保存又被稱為平衡冷凍保存,胚胎常規冷凍保存。目前大多數哺乳動物的胚胎保存主要應用該種方法。回收回來的優質胚胎放入到冷凍液中,經過一段時間的平衡放置到試管中,按照0.5℃/min的速度,迅速下降到-7℃,進行植冰,然后將溫度緩慢下降到-35℃,平衡10min左右,迅速將試管投入到液氮罐中保存。該種冷凍方法需要在胚胎當中添加一定的防凍劑,牛羊胚胎常用的防凍劑主要包括甘油、乙二醇、丙二醇、二甲基亞砜和糖類;其次,直接冷凍法。直接冷凍法又被稱為直接細管冷凍法,該種冷凍方法操作相對較為簡單,是由第1種方法轉變而來。直接冷凍法經常使用到的冷凍劑為1.5mol/L的乙二醇[2];最后,玻璃化冷凍法。它是將收集到的胚胎放置在玻璃化冷凍液中,平衡一段時間后,直接投入到液氮罐中進行保存。這個過程繞過了冰品化階段,液態直接轉變為玻璃化狀態,不需要對胚胎進行緩慢降溫,在很大程度上減少了胚胎冷凍程序,避免了胚胎在冷凍過程中受到損傷,經濟節約。
1.6胚胎移植
在胚胎移植前應該對受體母牛進行全面的處理,保證移植受體母牛的卵泡直徑達到20mm左右。通常受體母牛在發情36h后應出現排卵現象。在進行胚胎移植前,要確保受體母牛的黃體直徑超過15mm,并且具有明顯的凹凸感。在移植過程中選擇使用消毒好的吸管,分3個階段吸取PBS保存液[3],將胚胎輸送到受體牛羊的子宮內,然后將移植腔取出。
2影響因素
2.1胚胎質量
在胚胎收集處理、冷凍保存過程中,由于胚胎的生產方式不同,胚胎質量和發育潛能存在很大差異,進而導致胚胎移植后受胎率存在很大不同。因此要保受體母牛正常受胎,需要生產高質量的胚胎,這是提高移植成功率的關鍵。
2.2供體受體的同期發情性
由于胚胎在受體子宮中生長發育,子宮的內分泌變化情況會對子宮內環境變化產生最直接的影響,而供體和受體之間是否能保證生理上的一致也是影響胚胎移植成功率的關鍵。
2.3操作技術
胚胎移植是一項技術要求很高的工作,操作技術是否恰當,對移植妊娠率的影響十分大。操作人員在操作過程中技術是否嫻熟,胚胎解凍是否徹底,解凍方法是否恰當,胚胎移植的時間是否恰當,移植部位是否恰等都會對受體母牛的受胎率真影響。
3結束語
近年隨著人們物質生活水平不斷提升,對牛羊制品需求量不斷增加,供需矛盾不斷凸顯,傳統的牲畜養殖模式和品種改良模式,難以滿足目前消費者對高品質牛羊制品的需求。胚胎繁殖技術的誕生推廣和應用顛覆了傳統的繁殖模式和生產模式,加大了優良牛羊品種的推廣進程,有利于提高養殖產業的經濟效益和生產效率,推動現代畜牧養殖產業的發展,保證高品質牛羊制品的持續供給。
參考文獻
[1]王增強.牛胚胎移植技術及應用[J].畜牧獸醫科技信息,2017(10):45.
[2]王勛發,李成春,張維云.肉羊胚胎移植工作中應注意的幾個問題[J].養殖技術顧問,2007(7):30.
[3]康建生,張艷紅.胚胎移植技術在畜牧生產中的應用[J].養殖與飼料,2018(3):21-22.
作者簡介:瑪依努爾·艾買爾(1976-),女,維吾爾族,新疆沙雅人,中專,初級獸醫師,主要從事防檢驅治工作。