對凝血檢驗影響因素的探討及規范化建議

邱勝敏

[關鍵詞] 凝血檢驗;影響因素;質量控制;規范化

血液檢驗是為臨床診斷提供依據的重要檢驗方式，對于現代醫學診斷具有重要的意義。止凝血檢驗是臨床血液項目的一種，通過對凝血酶時間、凝血酶原時間、纖維蛋白原以及活化部分凝血活酶時間等進行檢驗，能夠為血栓性疾病診斷提供依據。止凝血檢驗分析前階段是凝血檢驗的關鍵環節之一，其受到多種因素的影響，因為凝血檢驗分析前階段涉及的環節多、人員相對復雜，控制不嚴格可能會造成連鎖反應，導致檢測結果發生偏差。本文對止凝血檢驗分析前階段的影響因素進行分析，探討處理影響因素的措施與方法?，F將詳細的研究報道如下。 1 材料與方法

1.1標本的來源

均來自我院2018年1月～2019年1月住院或門診患者，采用109 mmol/L枸櫞酸鈉抗凝，試劑與血液比例為1∶9，空腹抽取靜脈血液。

1.2 標本的收集

每天對所有標本在檢驗前均認真查對，對不合格標本返回科室并囑其重新采集并做好登記。

1.3儀器與試劑

儀器為賽科希德8200全自動血凝儀，試劑為廠家提供的配套試劑，操作人員均有初級以上職稱，并參加省衛生廳主管的室間質評和室內質控，以保證每天的檢驗結果真實可靠。

1.4比對試驗

分別對標本量偏少或偏多的27份標本及重新采集符合要求的標本測定血漿凝血酶原時間（PT）和活化部分凝血酶時間（APTT）值。

1.5回訪調查

對檢驗結果可疑的標本，有針對性地對患者本人、主管醫生及護理相關人員進行回訪調查。

1.6統計學分析

采用t檢驗。

2 結果

2.1 標本的收集情況

在所收集的標本中觀察了275例，住院患者220例，標本合格率為85%;門診患者55例，合格率為92.7%。其中，不合格標本中標本量偏少的比較多，占不合格的75.7%，另有21.6%標本量偏多，2.7%的標本有凝塊。

2.2 回訪調查結果

對所觀察的275例標本中，檢驗結果可疑的44例標本進行回訪調查，結果有21例患者正值吃藥時采集標本，占47.7%;有9例患者抽血時不順利，占20.5%;有3例標本放置時間較長，占6.8%;其余11例均沒有影響因素，占25%。

2.3比對結果

PT的t檢驗值為2.784，P<0.01;APTT的t值為3.015，P<0.01，均有統計學意義。對有凝塊的標本其結果出現不凝集或較正常結果時間明顯延長。

3 討論

3.1檢驗人員的素質及其所起的作用

檢驗人員不僅要能熟練使用及操作自動化儀器，而全面了解和掌握儀器的性能、影響檢驗結果的因素以及具備合理有效的解決處理各種不同緊急情況的應變能力，更為重要。建議：①操作者要嚴格把關，對標本不但要“三查三對”，而且對標本應仔細地檢查，對不合格的標本，如有凝塊、過多或過少、使用抗凝劑比例不當的均不能接收。②對檢驗標本有缺陷或不能檢測的應及時返回臨床，并做好相應登記，以避免不必要的糾紛。③要走出實驗室，與臨床溝通，了解標本采集情況，進行指導與幫助，以保證檢驗質量。

3.2 標本的采集及處理

3.2.1 盛裝血液標本的器材、容器規范化。建議：采用廠商提供的一次性注射器和帶有定量抗凝劑的真空采血管，以免產生血液滲漏或出現凝塊、抗凝劑比例不合乎要求等情況，影響檢驗結果。

3.2.2 適當的采血部位、正確的穿刺方式。建議：輸液側絕不能采血，采血前要讓患者處于空腹狀態，情緒激動、劇烈運動和神經緊張會引起血小板增多，凝血和纖溶活性增強。采血時止血帶不應扎得太緊或時間太長，因長時間會使因子Ⅷ和組織纖溶酶源激活劑（t-PA）釋放并活化。注入時不可太用力，以免血細胞破碎，激活凝血系統。

3.2.3 適當的抗凝劑與血液的比例：血液標準化委員會推薦用于凝血檢驗的抗凝劑為109 mmol/L枸櫞酸鈉。紅細胞比容（Hct）為0.25～0.55時，抗凝劑與血液的溶劑比為1∶9，如果對貧血（Hct<0.20）或紅細胞增多癥患者（Hct>0.70），則要根據公式：抗凝劑量=0.001 85×（100+Hct）×血液量[1]，來調節抗凝劑的用量，若不進行調節，這將會直接影響檢驗結果。

3.2.4 及時送檢，及時檢測。最好在1 h內分離血漿，4 h內完成測定，不能及時送檢時應放4℃冰箱保存，最多不超過6 h。標本放置過久，將引起部分凝血因子失活，放置24 h后的血漿其Ⅷ因子活性僅為采血后即刻檢驗結果的5%[2]。另外，標本離心時間、速度和血漿中的血小板數量也能影響檢驗結果。建議：采用3 000 r/min，離心10～15 min較好。

3.3藥物及檢測試劑的影響

某些藥物本身就具有影響凝血機制的功能或具有協同抗凝的功能。如水合氯醛、氯貝丁酯、依他尼酸等可使口服抗凝藥物在血中的濃度明顯增高，大劑量應用青霉素可使PT、APTT明顯延長，國際標準化比值也相應延長。當青霉素含量達到2萬U/ml血液時可使PT、APTT延長1倍以上，INR值也延長1倍以上[3]，即便這樣，有關藥物對凝血檢驗指標的影響的認識尚未不足。另外，檢測試劑要選用儀器配套的試劑，復溶的試劑最好是現用現配，否則復溶后放置時間越長，越容易影響檢驗結果的準確性，暫時不用的試劑要及時放回冰箱冷藏，并保證儀器處于良好運行狀態。

3.4加強與護士或護理人員的溝通

患者的準備、標本的采集、轉送主要由他們完成，因此護士的作用不容忽視。另外，護士也應對相關檢驗項目標本采集的注意事項有所認識。建議抽取血樣時應按如下順序：①使用玻璃試管時順序為：血培養試管→無抗凝劑血清管→枸櫞酸鈉抗凝試管→其他試管。②使用塑料試管順序為：血培養試管（黃色）→枸櫞酸鈉抗凝試管（藍色）→加或未加血液凝固激活物或凝膠分離的血清管（紅色）→加或未加凝膠的干塑管（綠色）→乙二胺四乙酸二鈉抗凝管（紫色）→血糖分解抑制物試管（灰色）[4-6]。采集后適當混勻并貼好標簽。

綜上所述，影響凝血測定結果的因素很多，要做好凝血檢驗的質量控制，不單是檢驗人員的事情，同時也涉及到臨床護理人員和患者的配合。目前，臨床常使用的質控血漿進行室內質量控制只能監控分析中儀器和試劑的狀態，對本文提及的諸多因素不能有效控制，存在弊端，所以要做到檢驗過程中各個環節的質量控制，才能保證檢測結果的最大準確性和可靠性，更好地服務于臨床[7]。

[參考文獻]

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[4]熊立凡，劉成玉.臨床檢驗基礎[M].4版，北京：人民衛生出版社，2007：10.

[5] 王秀明，李志武，孫冀兵，等.凝血四項檢測分析前標本采集處理及影響因素[J].河北醫藥，2013，35（14）：2187-2190.

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[7] 李健，侯軍華.標本因素與凝血功能試驗質量保證[J].中華檢驗醫學雜志，2013，36（3）：286-288.