采用HPLC法測定平消膠囊中的柚皮苷和新橙皮苷

溫立義，郭美玲，王藝純，唐秋竹*

（1.吉林省藥品檢驗所，吉林 長春 130033；2.長春中藥醫藥大學，吉林 長春 130000）

平消膠囊為中國藥典2010一部收載的品種，原標準中只有馬錢子粉和麩炒枳殼的薄層色譜鑒別，馬錢子粉的含量測定。方中枳殼中主要含有黃酮類化合物[1]，本研究旨在根據枳殼中所含功效成分的特點，擬定柚皮苷和新橙皮苷的含量測定方法。

1 儀器與試藥

島津LC-20AT高效液相色譜儀；梅特勒AL204-IC型電子分析天平（十萬分之一）。

柚皮苷對照品（批號：110722-201312），新橙皮苷對照品（批號：111857-201102，純度99.6%），均由中國食品藥品檢定研究院提供。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱為Agilent HC C18色譜柱（250×4.6 mm，5 μm）；流動相為乙腈-水（用磷酸調節PH值至3.0）（20：80）；檢測波長為283 nm；流速1.0 mL·min-1；柱溫：35℃。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液

取柚皮苷對照品和新橙皮苷對照品各適量，精密稱定，分別加甲醇溶解并稀釋制成每1ml中含柚皮苷和新橙皮苷各90 μg的溶液，搖勻，即得。

2.2.2 供試品溶液

取本品內容物1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇50 mL，密塞，稱定重量，加熱回流1.5小時后，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.3 專屬性試驗

根據處方制得不含枳殼的陰性樣品，并按照擬定的方法進行提取和測定，該方法的專屬性較好。典型色譜圖見圖1。

圖1 溶劑、陰性樣品溶液、對照品溶液和供試品溶液的色譜圖

2.4 儀器精密度試驗

取供試品1份，連續測定6次，結果RSD為0.2%（n=6），新橙皮苷的RSD為0.2%（n=6）。表明該方法的儀器精密度良好。

2.5 線性范圍

分別精密吸取柚皮苷對照品溶液和新橙皮苷對照品溶液各1、5、10、15，和20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。回歸方程為：柚皮苷Y=1723371.26X+16532.27，r=0.9997，新橙皮苷Y=1877429.19X+8020.17，r=0.9998。結果表明，柚皮苷在0.0939 μg～1.8782 μg的濃度范圍內呈良好的線性關系，新橙皮苷在0.0720 μg～1.4390 μg的濃度范圍內呈良好的線性關系。

2.6 穩定性試驗

取供試品1份，分別于0 h、2 h、4 h、8 h、12 h和24 h時測定。結果表明，供試品溶液在24小時內基本穩定。

2.7 重復性試驗

取同一供試品6份，結果柚皮苷的RSD=0.8%（n=6），新橙皮苷的RSD=1.1%（n=6）。結果表明，該方法的重復性良好。

2.8 回收率試驗

取同法測定已知含量的供試品6份，每份約0.5g，精密稱定，分別精密加入柚皮苷和新橙皮苷對照品混合溶液，結果柚皮苷的平均回收率為100.1%，RSD=0.4%（n=6）；新橙皮苷的平均回收率為100.3%，RSD=0.6%（n=6）。結果表明，該方法的回收率良好，準確度較高，符合定量分析的要求。