阿司匹林雙嘧達(dá)莫片的含量測(cè)定及含量均勻度研究

李 宇，田海燕，崔曉雨，劉洪?！?/p>

（1.德州學(xué)院職業(yè)教育學(xué)院，山東 德州 253023； 2.山東省德州市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，山東 德州 253015）

阿司匹林雙嘧達(dá)莫片為腸溶衣與薄膜衣的雙層包衣片，內(nèi)層含阿司匹林，外層含雙嘧達(dá)莫。原標(biāo)準(zhǔn)[1]采用滴定分析法測(cè)定阿司匹林的含量，分光光度法測(cè)定雙嘧達(dá)莫的含量。實(shí)際工作中，剝離外層（雙嘧達(dá)莫片）時(shí)存在迸濺損失，以及迸濺時(shí)不確定損失的是主藥成分還是包衣材料，且試驗(yàn)時(shí)間太長(zhǎng)，吸濕及刮片也影響內(nèi)外層的含量測(cè)定結(jié)果。新標(biāo)準(zhǔn)[2]采用高效液相色譜法測(cè)定其含量及含量均勻度，但色譜分析耗時(shí)較長(zhǎng)。本研究中參考有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)及文獻(xiàn)[2-4]，建立了紫外分光光度法測(cè)定阿司匹林雙嘧達(dá)莫片的含量及含量均勻度，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

Tu-1901型雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（北京通用儀器有限責(zé)任公司）；XS105 DualRange型電子分析天平（瑞士Mettler Toledo公司）；Agilent 1260型高效液相色譜儀，含G7114A型紫外檢測(cè)器（美國(guó)安捷倫科技有限公司）。

阿司匹林對(duì)照品（含量99.8%，批號(hào)為100113-201405），雙嘧達(dá)莫對(duì)照品（含量 99.8%，批號(hào)為100244-201003），水楊酸對(duì)照品（含量99.3%，批號(hào)為100106-201605），均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院。乙腈為色譜純，冰乙酸和四氫呋喃為優(yōu)級(jí)純，其余均為分析純。

阿司匹林雙嘧達(dá)莫片，共3批，規(guī)格均為每片含阿司匹林75 mg、雙嘧達(dá)莫25 mg，分別購(gòu)自德州博誠(chéng)制藥有限公司（樣品1，批號(hào)為A20171202）、湖北百科亨迪藥業(yè)有限公司（樣品2，批號(hào)為171002）、湖北百科亨迪藥業(yè)有限公司（樣品3，批號(hào)為171003）。

2 方法與結(jié)果

2.1 測(cè)定波長(zhǎng)選擇

取雙嘧達(dá)莫對(duì)照品適量，用0.1 mol/L鹽酸溶液溶解，并稀釋成質(zhì)量濃度為10 μg/mL的溶液，在200～300 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，結(jié)果在233 nm和284 nm波長(zhǎng)處有最大吸收，故以284 nm為雙嘧達(dá)莫的測(cè)定波長(zhǎng)。

取阿司匹林對(duì)照品適量，加少量乙醇溶解，用pH 6.8磷酸鹽緩沖液稀釋成質(zhì)量濃度為150 μg/mL的溶液，在250～300nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，結(jié)果在266nm波長(zhǎng)處有最大吸收，故以266 nm為阿司匹林的測(cè)定波長(zhǎng)。

參照雙嘧達(dá)莫層和阿司匹林層，分別將相應(yīng)輔料用0.1 mol/L鹽酸溶液和pH 6.8磷酸鹽緩沖液溶解，并稀釋成相應(yīng)濃度，濾過(guò)，續(xù)濾液分別在200～300 nm和250～300 nm波長(zhǎng)處掃描，在相應(yīng)的吸收波長(zhǎng)284 nm和266 nm處無(wú)吸收，不干擾主成分的含量測(cè)定。

2.2 線性關(guān)系考察

雙嘧達(dá)莫：取雙嘧達(dá)莫對(duì)照品10 mg，精密稱(chēng)定，置50 mL容量瓶中，用0.1 mol/L鹽酸溶液溶解并定容。分別吸取 1.0，2.0，3.0，5.0，6.0，7.0，8.0 mL，置 50 mL容量瓶中，用0.1 mol/L鹽酸溶液定容。在284 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度（A），以質(zhì)量濃度（C，μg/mL）對(duì)A進(jìn)行線性回歸，得回歸方程C=14.884A+0.278 6，r=0.999 7（n=7）。結(jié)果表明，雙嘧達(dá)莫質(zhì)量濃度在4～32 μg/mL范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好。

阿司匹林：取阿司匹林對(duì)照品30 mg，精密稱(chēng)定，置50 mL容量瓶中，用少量乙醇溶解，加pH 6.8的磷酸鹽緩沖液定容。分別吸取 2.0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0，8.0 mL，置20 mL容量瓶中，加pH 6.8的磷酸鹽緩沖液定容，在266 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度（A），以質(zhì)量濃度（C，μg/mL）對(duì)A進(jìn)行線性回歸，得回歸方程C=327.79A-4.081，r=0.999 8（n=7）。結(jié)果表明，阿司匹林質(zhì)量濃度在60～240 μg/mL范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好。

2.3 含量測(cè)定

2.3.1 紫外分光光度法

取樣品10片，置小燒杯中，加0.1 mol/L鹽酸溶液適量，超聲溶解雙嘧達(dá)莫層，并轉(zhuǎn)移至1 000 mL容量瓶中，用少量蒸餾水洗滌腸溶衣表面，洗液并入1 000 mL容量瓶中，用0.1 mol/L鹽酸溶液定容，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液2.0 mL，置50 mL容量瓶中，加0.1 mol/L鹽酸溶液定容，搖勻，照分光光度法，在284 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算雙嘧達(dá)莫標(biāo)示量的百分含量。詳見(jiàn)表1。

取上述測(cè)定雙嘧達(dá)莫后所剩的具有完整腸溶衣的內(nèi)層10片，置研缽中，研細(xì)，加少量乙醇溶解，用pH 6.8磷酸鹽緩沖液轉(zhuǎn)移至500 mL容量瓶中并定容，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液5.0mL，置50mL容量瓶中，用pH 6.8磷酸鹽緩沖液定容，搖勻，照分光光度法在266 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算占阿司匹林標(biāo)示量的百分含量。詳見(jiàn)表1。

表1 樣品標(biāo)示量百分含量測(cè)定（%）

2.3.2 高效液相色譜法

取樣品，采用 Agilent Zorbax SB C18柱（250 mm×0.6 mm，5 μm），以乙腈 -四氫呋喃 -冰乙酸 -水（20∶5 ∶5∶70，V/V/V/V）為流動(dòng)相，柱溫 30℃，流速為1.0 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng) 276 nm（阿司匹林）、284 nm（雙嘧達(dá)莫）[2]。

阿司匹林：理論板數(shù)按阿司匹林峰計(jì)為14 514，阿司匹林峰保留時(shí)間為6.6 min，阿司匹林峰與水楊酸峰及雙嘧達(dá)莫峰的分離度分別為5.0和19.6。含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。

雙嘧達(dá)莫：理論板數(shù)按雙嘧達(dá)莫峰計(jì)為5 401，雙嘧達(dá)莫峰保留時(shí)間為5.3 min，雙嘧達(dá)莫峰與阿司匹林峰的分離度為4.9。含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。

2.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取質(zhì)量濃度約為10 μg/mL的雙嘧達(dá)莫樣品溶液，室溫下放置 0，1.0，2.0，3.0，4.0 h，測(cè)定吸光度，結(jié)果的RSD為0.11%（n=5）；取質(zhì)量濃度約為150 μg/mL的阿司匹林樣品溶液，室溫下放置 0，0.5，1.0，1.5，2.0 h，測(cè)定吸光度，結(jié)果的RSD為0.39%（n=5）。結(jié)果表明，2種樣品溶液室溫下在測(cè)試時(shí)間內(nèi)穩(wěn)定。

2.5 回收率試驗(yàn)

取阿司匹林和雙嘧達(dá)莫對(duì)照品，分別按標(biāo)示量的80%，100%，120%配制內(nèi)層和外層輔料的混合物各3份，用含量測(cè)定方法的溶劑分別配制成相應(yīng)質(zhì)量濃度的供試液，依法測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n=9）

2.6 雙嘧達(dá)莫含量均勻度測(cè)定

3批樣品每批均取10片，分別置10個(gè)小燒杯中，加0.1 mol/L鹽酸溶液適量，分次超聲溶解外層（雙嘧達(dá)莫層），并轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，依法測(cè)定雙嘧達(dá)莫含量，得各片含量并計(jì)算3批樣品的A+2.2S分別為6.1，7.2，6.7，符合規(guī)定，表明含量均勻度較好。

3 討論

參照有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[2，5]，建議用2.6項(xiàng)下10份樣品平均標(biāo)示量的百分含量作為含量的測(cè)定值，更易觀察每片雙嘧達(dá)莫層的溶解情況。新標(biāo)準(zhǔn)[2]雖然解決了外層雙嘧達(dá)莫測(cè)定時(shí)刮片引起的誤差，但依然存在測(cè)定阿司匹林時(shí)刮片的費(fèi)時(shí)費(fèi)力問(wèn)題。測(cè)阿司匹林含量時(shí)所用腸溶衣內(nèi)層應(yīng)完好無(wú)損，無(wú)裂縫、崩解或軟化現(xiàn)象。

本研究中還考察了高效液相色譜法，測(cè)定結(jié)果與紫外分光光度法基本一致。也考察了標(biāo)準(zhǔn)所允許游離水楊酸的最大限量，對(duì)結(jié)果無(wú)影響。紫外分光光度法未采用對(duì)人體有害的有機(jī)溶劑乙腈、四氫呋喃等，健康環(huán)保，且快速準(zhǔn)確，可作為測(cè)定阿司匹林雙嘧達(dá)莫片含量及含量均勻度的方法。