355例產ESBLs大腸埃希菌耐藥性分析

馬莉 黃梅 熊安英

（瀘州市人民醫院 四川 瀘州 646000）

大腸埃希菌為臨床分離出的最常見的一種革蘭陰性桿菌，是一種條件致病菌，廣泛分布在自然界內，且由于臨床廣譜抗生素的不斷研發及應用，尤其是頭孢菌素類抗生素的使用，大腸埃希菌在選擇性壓力下，發展出現耐藥機制[1]。大腸埃希菌產生超廣譜β-內酰胺酶是一種較為主要的耐藥機制，且為臨床治療帶來了較大的困難。對我院近2年尿液分離的產超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）大腸埃希菌的耐藥性進行分析。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選擇2017年1月—2018年12月我院尿液樣本數共3163例，分離出大腸埃希菌：752例；檢出產超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）的大腸埃希菌355例，分離率37.5%。排除同一患者的同一部位重復分離菌株。

1.2 方法

菌株的分離、鑒定及藥敏：將尿液標本取10ul接種到血瓊脂培養基和麥康凱培養基，恒溫孵育24h后挑取疑似菌落分純，再孵育24h。使用梅里埃VITEK2 Compa做鑒定及藥敏，補充藥敏實驗，確證實驗依據美國CLSI/NCCLS 2016年標準執行。對儀器鑒定為產ESBLs大腸埃希菌，再做ESBLs的確證實驗。：使用頭孢他啶、頭孢他啶/克拉維酸組合與頭孢噻肟、頭孢噻肟/克拉維酸組合測量，若加克拉維酸抑菌環的直徑與單藥測定直徑差在5mm以上，確證實驗均為產ESBLs大腸埃希菌。

1.3 質控菌株

大腸埃希菌ATCC25922，肺炎克雷伯菌ATCC700603，銅綠假單胞菌ATCC27853，均來自四川省臨檢中心。

1.4 統計學方法

所有產ESBLs大腸埃希菌數據均進行準確核對和錄入，采用WHONET5.6軟件分析數據。

2.結果

表 ESBL大腸埃希菌耐藥性測試結果

3.討論

3.1 大腸埃希菌致病性及生物學特性

大腸埃希菌為人體腸道的正常菌群，在自然界中廣泛存在，并為一種條件致病菌。當人體出現免疫力降低或者細菌侵入就可能會成為機會致病菌，可能會引發腸道外感染、呼吸道感染、泌尿系感染、消化道感染等，且范圍較為廣泛。大腸埃希菌引發的腸道外感染主要為泌尿系感染，尤其在泌尿道插管的患者中，由于泌尿道侵入性操作會導致尿道黏膜的皮損，細菌會穿過破損的黏膜屏障，進而侵入到人體內，引發感染的發生，而病原菌的上行也會導致導管的血流感染的發生[2]。

大腸埃希菌在自然界水中可以存活數周甚至數月，且對熱抵抗力較強，對多種抗生素，包括鏈霉素、磺胺類及氯霉素等較為敏感。

3.2 大腸埃希菌耐藥機制

隨著目前抗生素的廣泛使用，大腸埃希菌的耐藥性也有明顯的增強。由于第三代頭孢菌素的過度濫用，選擇性壓力導致大腸埃希菌產生了產超廣譜β-內酰胺酶ESBLs，其可以產生常用抗生素較強阻力的酶，并通過水解切割青霉素（包括氨芐西林）、單環類抗生素及頭孢菌素等，導致藥物失效。此外研究還發現，部分ESBLs菌株還會對氨基糖苷類藥物、磺胺類藥物產生水解。

分析導致大腸埃希菌耐藥的機制主要為[3]：細菌能夠形成多種鈍化酶并作用到抗菌藥物上，導致抗菌活性喪失；可以改變藥物作用靶位，會導致抗菌藥物合成失敗；可以通過改變細胞壁通透性，細菌突變，并造成細胞壁外膜屏障失去活性，影響藥物從細胞外向細胞內的運輸，并產生耐藥性；細胞膜外存在特殊的藥物泵出系統，將進入到細胞內的抗菌藥物向細胞外泵出，并導致細菌內的藥物濃度降低；細菌代謝途徑變化引發多重耐藥性操縱子存在；通過轉化、結合和傳導等在細菌菌群中擴散耐藥基因。此外，細菌聚集也會形成粘液并形成生物膜包裹內部菌群，屏蔽抗生素并對抗機體的免疫系統。

本文355例產超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）大腸埃希菌對呋喃妥因、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢替坦、厄他培南、亞胺培南、阿米卡星的敏感度達到90%以上。同時，也可以看出，部分藥物如氨芐西林、氨芐西林/舒巴坦、頭孢唑林、慶大霉素、環丙沙星、左氧氟沙星、復方新諾明均出現了不同程度耐藥性。

綜上所述，產ESBLs大腸埃希菌耐藥性較高，為更好的減少細菌多重耐藥，預防暴發流行等情況，需要臨床醫生合理使用抗生素，并根據藥敏結果調整抗菌藥物，盡量控制廣譜抗菌藥物使用量。