食品微生物檢驗中培養基的質量控制分析

傅真

（上海市楊浦區疾病預防控制中心檢驗科 上海 200090）

研究發現，微生物檢驗質量受到多種因素的影響，培養基質量好壞、保存得當、配置科學與否，與微生物檢驗質量存在密切關聯[1]。在開展食品微生物檢驗過程中，需要對培養基質量控制問題進行關注，采取必要措施進行完善。從而保證微生物檢驗質量。本研究主要目的在于充分炎癥脫水培養基配制、貯存后開展食品微生物檢驗，是否滿足質量控制標準，進而使整個檢驗過程受控。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選擇廣州瑞智公司提供的超凈工作臺（SW-CJ-2FD），上海博訊實業提供的立式壓力蒸汽滅菌器（YXQ-LS-50SII）及電熱恒溫培養箱（BPX-272）；平板計數營養瓊脂培養基由廣東環凱微公司提供，廣東光華公司提供甘油（分析純）。5種菌種由廣東環凱微公司提供，見表1。

表1 培養基接種的5種菌種具體情況

1.2 方法

（1）菌液制備：銅綠假單胞菌、大腸埃希氏菌、糞腸球菌、乙型副傷寒沙門氏菌、金黃色葡萄球5種菌種復蘇后，采用傳代培養方法進行相應處理。然后采用第3代菌液，1ml生理鹽水制成菌液，菌落數控制在50～100CFU，制備完成后，注意菌液需在2h內使用，避免性狀發生改變而影響檢驗結果。

（2）培養基貯存：隨機抽取平板計數營養瓊脂2瓶，嚴格按照操作說明書中相關規范，對培養基進行配制，并在1×105Pa高壓狀態下行滅菌處理，時間控制15min；滅菌完成后，將平板計數營養瓊脂培養基貯存在溫度為4℃的冰箱內。

（3）適用性檢查：對平板計數營養瓊脂培養基的適用性進行檢查，貯存后第7d、第14d和第21d，取出滅菌處理后的培養基，結合《中國藥典》（2015年版）[2]中相關規定，測定培養基適用性。在此過程中，采用新配制培養基作為參照對象，做好對比。

1.3 統計學方法

2.結果

2.1 培養基適用性檢查結果分析

接種銅綠假單胞菌、大腸埃希氏菌、糞腸球菌、乙型副傷寒沙門氏菌、金黃色葡萄球的平板計數營養瓊脂培養基，貯存后不同時間段（7d、14d、21d）未出現明顯變化，適用性良好，見表2。

表2 平板計數營養瓊脂培養基對不同菌種適用性檢查結果（%）

2.2 培養基pH值檢查結果分析

兩次試驗結果證實，樣本1和樣本2平板計數營養瓊脂培養基pH值未出現明顯變化，無論是配置當天，還是貯存第7d、貯存第14d、貯存第21d，培養基pH均保持相對穩定，見表3。

表3 兩個樣品平板計數營養瓊脂培養基pH值檢查結果對比

3.討論

培養基質量控制的重要性體現在其能夠為微生物繁殖、代謝提供營養支持，進而滿足微生物提供檢驗基礎環境[3-4]。在開展微生物檢驗時，保證微生物具有良好存活狀態，能夠為微生物性狀檢測與分析提供參考指標，進而準確識別微生物種類，為食品微生物檢驗提供更多科學依據，提高檢驗準確性[5]。相關文獻[6]報道認為，測定微生物檢驗培養基性能，合理貯存，能夠突出細菌的特征，因此在選擇培養基時，應滿足已知陽性、陰性菌接種要求，且具備一定的生化反應能力。本次實驗抽取食品微生物脫水培養基為平板計數營養瓊脂培養基，對其進行獨立試驗，通過配制、滅菌、貯存后，結合藥典中相關規定，對培養基適用性進行檢查，驗證貯存7d、14d、21d平板計數營養瓊脂培養基的適用性，結果顯示，在相同環境下，滅菌后的脫水培養基接種銅綠假單胞菌、大腸埃希氏菌、糞腸球菌、乙型副傷寒沙門氏菌、金黃色葡萄球，貯存21d后，適用性均符合藥典中相關要求。上述研究結果與文獻[7-8]報道內容基本一致，且本研究2次試驗樣本pH值之間無明顯差異（P＞0.05）。本次實驗所得結果至少可以說明2個問題，其一，在相同環境下，脫水培養基配制、貯存受控，即使貯存3周之久，亦能夠保證培養基每次使用符合檢驗標準。其二，采購脫水培養基后，僅需對同1批號培養基的適用性進行檢查，無需全部驗證，同時可預先配制一定培養基，滿足大量食品微生物檢驗操作要求，提高工作質量，降低風險。

綜上所述，對食品微生物檢驗中培養基質控問題加以關注，嚴格執行相關操作標準，可保證檢驗結果準確性。