火罐法對住院心血管病患者人蛋白激酶C與磷酸肌醇3-激酶的影響研究

賴家春，鄒輝標，董立蕓，陳盛安，沈冠男，楊澤福，趙學峰，謝祥棟，楊希立

目前缺血性心血管病的治療主要以血運重建及抗血小板、調脂等為主［1-6］，上述治療雖然明顯降低了心血管病致死、致殘率，但常規(guī)血運重建不能降低患者的心肌梗死或死亡風險，且血運重建減輕患者癥狀的效果僅能持續(xù)1～3年，特別是對經皮冠狀動脈介入治療患者［7］。自心肌缺血預適應概念的提出，且受后來的遠端預缺血概念的影響，預缺血研究逐漸引起學者們的重視；目前主要是在術前、術中使用球囊多次、短時阻塞動脈造成短暫性缺血，或是利用袖帶在上肢多次充氣和放氣，產生預缺血效應，其機制主要與人蛋白激酶C（PKC）、磷酸肌醇3-激酶（PI3K）的激活及內源性腺苷釋放增多等機制有關［8-11］。目前上述預缺血方法有創(chuàng)及不易被接受。我國傳統(tǒng)的火罐法是將火罐吸附于皮膚造成局部初始毛細血管擴張，而后出現(xiàn)毛細血管通透性增加及損傷，導致預缺血，并有應用于治療缺血性疾病的相關研究［12-16］，而皮膚是人體最大的器官，修復能力強，且火罐法是我國傳統(tǒng)的保健方法，易被患者接受。為此，本研究采用病例對照研究方法，探究火罐法對住院心血管病患者血清PKC、PI3K的影響，旨在為臨床治療提供更多參考。

1 資料與方法

1.1 研究標準

1.1.1 納入標準 年齡18～70歲，性別不限，預計可住院1周以上，無出血性疾病及皮膚感染，自愿接受火罐法治療的住院心血管病患者。

1.1.2 診斷標準 高血壓的診斷標準參照《中國高血壓防治指南2010》［17］進行判定；冠狀動脈粥樣硬化性心臟病的診斷標準參照《穩(wěn)定性冠心病診斷與治療指南》［2］；糖尿病的診斷標準參照《中國2型糖尿病防治指南（2010年版）》［18］；腦梗死的診斷標準參照《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》［3］。

1.1.3 排除標準 本研究開始前4周內曾參加過其他臨床試驗；急性冠脈綜合征、高度水腫、高度神經質、皮膚高度過敏、皮膚破損、皮膚彈性極差、嚴重皮膚病、腫瘤、血友病、活動性肺結核、月經期、妊娠期、皮膚感染等情況；既往有慢性阻塞性肺疾病、暈厥、慢性胃炎、慢性腎臟病、慢性肝炎、急慢性肝衰竭、貧血、腦血管意外、慢性心功能不全、先天性心臟病、風濕性心臟病、支氣管哮喘、類風濕、肺結核、凝血功能異常、血小板減少等病史者。

1.1.4 剔除標準 火罐法前過饑、過飽、過勞、過渴、發(fā)熱者。1.2 一般資料 選取2017年4月—2018年5月于佛山市南海區(qū)人民醫(yī)院心血管內科及綜合科住院的符合納入標準的患者315例。依據(jù)隨機數(shù)字表法將其分為對照組和試驗組。本研究經佛山市南海區(qū)人民醫(yī)院倫理委員會批準，患者均知情同意。

1.3 方法

1.3.1 研究方法 對照組入院后按相關指南行調脂、抗血小板、平穩(wěn)血壓等常規(guī)治療，試驗組在常規(guī)治療的基礎上行火罐法治療?；鸸薹ㄒ匝巢繛榛鸸薹ú课唬看喂舶?～6個火罐，連續(xù)5 d，每次以皮膚出現(xiàn)瘀青為度，避免出現(xiàn)水皰，防止感染。

1.3.2 檢測方法 入院24 h內及完成第5天火罐法治療后24 h內采集靜脈血3～5 ml，送本院檢驗科進行檢測，離心分離血清（3 000 r/min離心5 min，離心半徑8 cm），取上清液，分3個0.5 ml離心管密封編號，于-80 ℃冰箱中保存待測。采用購自上海晶抗生物工程有限公司的PKC試劑盒（ELISA 48T）、PI3K試劑盒（ELISA 48T）及PHOMO酶標儀分別檢測血清PKC、PI3K水平。

1.4 觀察指標 收集并比較兩組患者基線資料，包括性別、年齡、吸煙史、飲酒史、高血壓病史、糖尿病病史、冠心病病史。其中吸煙診斷標準參照《中國臨床戒煙指南（2015年版）》［19］，飲酒診斷標準按《中國精神障礙分類與診斷標準第三版（精神障礙分類）》［20］。分別以血清PKC、PI3K水平較基線升高30%定義為有效，比較兩組患者血清PKC水平治療有效情況、血清PI3K水平治療有效情況。比較兩組患者入院時和出院時血清PKC、PI3K水平。

1.5 統(tǒng)計學方法 采用SAS 8.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析。符合正態(tài)分布的計量資料以（±s）表示，兩組間比較采用成組t檢驗，組內治療前后比較采用配對t檢驗；計數(shù)資料以相對數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計意義。

2 結果

2.1 患者完成試驗情況 315例患者中，因個人原因提前出院3例，中途未完成火罐法治療5例，最后住院滿1周并完成火罐法治療307例，其中試驗組158例，對照組149例。

2.2 試驗組與對照組患者基線資料比較 試驗組與對照組患者性別、年齡、吸煙史、飲酒史、高血壓病史、糖尿病病史、冠心病病史比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05，見表1）。

表1 對照組與試驗組患者基線資料比較Table 1 Comparison of baseline data between control group and experimental group

2.3 兩組患者血清PKC水平治療有效情況、血清PI3K水平治療有效情況 對照組患者血清PKC水平治療有效28例，無效121例；試驗組患者血清PKC水平治療有效117例，無效41例；試驗組患者血清PKC水平治療有效率高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=97.07，P＜0.01）。對照組患者血清PI3K水平治療有效25例，無效124例；試驗組患者血清PI3K水平治療有效126例，無效32例；試驗組患者血清PI3K水平治療有效率高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=121.65，P＜0.01）。

2.4 兩組患者入院時與出院時血清PKC、PI3K水平比較 對照組患者入院時與出院時血清PKC、PI3K水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；試驗組患者出院時血清PKC、PI3K水平高于入院時，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05，見表2）。

表2 對照組與試驗組患者入院時與出院時血清PKC、PI3K水平比較（±s）Table 2 Comparison of mean serum levels of PKC and PI3K between control group and experimental group at admission and discharge

表2 對照組與試驗組患者入院時與出院時血清PKC、PI3K水平比較（±s）Table 2 Comparison of mean serum levels of PKC and PI3K between control group and experimental group at admission and discharge

注：PKC=蛋白激酶C，PI3K=磷酸肌醇3-激酶

組別 例數(shù) PKC（pmol/L） PI3K（μg/L）入院時 出院時 t配對值 P值 入院時 出院時 t配對值 P值對照組 149 5.46±1.79 5.52±1.12 -0.34 0.72 15.12±4.41 16.01±4.24 -1.77 0.07試驗組 158 5.41±1.86 5.98±1.91 -2.68 ＜0.01 16.95±3.78 18.12±3.53 -2.84 ＜0.01images/BZ_96_1431_2994_1453_3024.png

3 討論

目前國內外指南治療缺血性疾病的主要方法為血運重建以改善局部病變?yōu)橹骷八幬镏委煟?-6，21］。有研究認為對于穩(wěn)定型心絞痛患者，經血運重建可改善其心絞痛癥狀，但預后并不比最佳藥物治療有更大獲益，經皮冠狀動脈介入治療并不能改善遠期預后［22-23］。近年來越來越重視微血管病變的治療，隨著研究的深入也越來越重視患者對缺血的適應性反應［9］。而且缺血預適應還應用于皮瓣移植、造影劑腎病等相關研究［24-25］。中醫(yī)火罐法雖在臨床實踐中群眾接受程度高，有一定療效，但因缺乏實驗性研究的相關基礎支持，故主要應用于康復理療，較少應用于缺血性疾病的治療。如果進一步明確火罐法有預缺血的效果，加之火罐法已有治療冠心病等缺血性疾病的臨床實踐，故其有可能更廣泛地應用于缺血性疾病的治療。

目前認為機體相關部位缺血后會導致PKC激活、PI3K/AKt激活、內源性腺苷釋增多等效應［8-11］，故本研究對基線資料進行了均衡性檢驗，并采用自身前后對照法，分別對PKC、PI3K進行前后平行對照。本研究結果顯示，試驗組與對照組高血壓病史、糖尿病病史、糖尿病病史等基線資料比較無統(tǒng)計學意義，表明試驗組與對照組基本資料均衡，具有一定的可比性。試驗組患者血清PKC、PI3K水平治療有效率高于對照組，試驗組患者出院時血清PKC、PI3K水平高于入院時，表明火罐法可有效提高住院心血管病患者血清PKC、PI3K水平。而目前國內外針對預缺血方面的研究主要集中在動物實驗及手術過程中行短暫預缺血治療［26-31］，未查閱到火罐法應用于預缺血的相關研究。因此火罐法引起血清PKC、PI3K水平升高的機制尚不清楚，其可能與火罐法對局部組織持續(xù)負壓吸引，導致局部組織較長時間的缺血、於血有關。此外，本研究樣本量較少，后續(xù)仍需進一步研究。

綜上所述，火罐法可上調住院心血管病患者血清PKC、PI3K水平，提高患者生存質量，且其本身為一種傳統(tǒng)中醫(yī)治療方法，患者容易接受，臨床開展優(yōu)勢明顯。