角膜激光共聚焦顯微鏡在感染性角膜炎診斷中的應用效果分析

段 平

（貴州醫科大學附屬醫院 貴州 貴陽 550004）

感染性角膜炎是臨床最常見的致盲性角膜疾病，主要發生于戶外工作者，并以細菌，真菌和病毒為主要致病菌，該類疾病引起角膜感染的病原體種類較多，臨床表現較為復雜。因此需要采用早期快速的診斷才能提供有效數據，有利于后期治療，降低致盲率。若患者已出現眼內炎癥或角膜穿孔現象預后情況較差，最嚴重的會導致患者摘除眼球[1]。目前臨床診斷主要有接觸史、臨床表現、角膜刮片鏡檢以及培養等，但是患者臨床培養的假陰性較高，同時診斷時間較長，檢出率不高，因此需要改用另外有效合理的方式進行檢驗。角膜激光共聚焦顯微鏡這種新型的活體生物檢查技術，能夠對活體角膜進行非侵入性的快速檢查，并對不同情況病原體感染的角膜影像呈現不同特征[2]。因此，本文以患有感染性角膜炎的患者作為對象。探討感染性角膜炎診斷中角膜激光共聚焦角膜顯微鏡的應用效果。現報道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2017 年10 月—2020 年8 月我院接收的患有感染性角膜炎的患者68 例，男38 例，女30 例，年齡24 ～89 歲，平均年齡（59.24±2.54）歲；住院時間4 ～28 d，平均住院時間（18.24±2.35）d；角膜炎類型：細菌性角膜炎26 例，真菌性角膜炎22 例，單皰病毒性角膜炎20 例。納入標準：所有患者均臨床確診為單一類型的感染角膜炎患者，患者自主簽署知情同意書，以角膜潰瘍標本實驗室培養的結果為金標準，確診為感染性角膜炎，均存在不同程度的眼部疼痛，視力下降等癥狀并伴隨有角膜水腫，潰瘍以及纖維素滲出等體征[3]。排除標準：患者臨床診斷感染病原體不確定；檢查后出現兩種及以上病原體混合感染的癥狀；角膜感染后在其他醫院或者自行用過抗生素滴眼液；臨床出現角膜開放性傷口[4]；免疫功能疾病；具有凝血功能障礙；不配合用藥治療。

1.2 方法

1.2.1 標本采集以及檢驗 醫護人員需要對患者嚴格按照無菌操作流程，在手術或治療中需要對患者機體表面麻醉角膜潰瘍物進行刮取：角膜組織刮片：選取鹽酸丙美卡因眼藥水[愛爾康（中國）眼科產品有限公司，進口藥品注冊證號：H201601333]進行麻醉處理后選擇開瞼器，打開眼瞼部位并利用一次性手術圓刀器械刮取潰瘍以及角膜分泌物涂在載玻片上，將氫氧化鉀滴1 ～2 滴于載波片上，染色后完成制片，在顯微鏡下觀察標本的孢子及菌絲情況[5]。

角膜激光共聚焦顯微鏡檢測方式：（1）用當天消毒后的開瞼器暴露需要檢查的患眼。（2）于鏡頭表面涂偶合劑少許，其中不能有氣泡，將無菌的一次性鏡頭帽蓋上，使凝膠和鏡頭帽之間有適當面積的接觸。（3）轉動調焦旋鈕直至圖像全部為白色，將此平面設置為零平面。（4）將鏡頭對準需要檢查組織向前推進接觸組織后，再輕旋轉鏡頭逐步深入觀察，每次旋轉推進的深度為2 ～20μm，根據顯示病灶的情況深入，并隨時截取需要的圖片[6]。（5）每只眼須對角膜潰瘍面、角膜潰瘍面的上、下、左、右5 個部位分別檢查。

檢查結果分析：角膜激光共聚焦顯微鏡顯示，能夠見到真菌菌絲為樹枝狀高反光，線形結構長短不一，雜亂無章的交錯排列狀態，部分菌絲有分叉。角膜組織刮片顯示角膜壞死部位呈現溶解狀，孢子較為清晰，無分節現象，菌絲呈現折光反應。

1.2.2 操作方法 臨床選用具有1 年以上共聚焦角膜顯微鏡檢查經驗的醫師對患者角膜病變組織部位進行檢查，操作步驟為：（1）在患者患眼滴用鹽酸丙美卡因眼藥水[愛爾康（中國）眼科產品有限公司，進口藥品注冊證號：H201601333]分別進行2 次表面麻醉。（2）用當天消毒后的開瞼器暴露需要檢查的患眼。（3）于鏡頭表面涂偶合劑少許，其中不能有氣泡，將無菌的一次性鏡頭帽蓋上，使凝膠和鏡頭帽之間有適當面積的接觸。（4）轉動調焦旋鈕直至圖像全部為白色，將此平面設置為零平面。（5）將鏡頭對準需要檢查組織向前推進接觸組織后，再輕旋轉鏡頭逐步深入觀察，每次旋轉推進的深度為2 ～20μm，根據顯示病灶的情況深入，并隨時截取需要的圖片[6]。（6）每只眼須對角膜潰瘍面、角膜潰瘍面的上、下、左、右5 個部位分別檢查。

1.3 觀察指標

（1）比較患者臨床角膜炎病原菌分布。所有患者在入院后均進行經驗性抗菌藥物全身以及局部治療，經過培養后對結果進行分析，明確感染類型以及感染菌種，按照耐藥性選擇敏感度較高的藥物進行治療[7]。（2）比較患者診斷后治療效果。痊愈：患者角膜炎癥狀完全消失，角膜熒光素染色呈現陰性，角膜水腫出現減退，視力明顯恢復。好轉：患者角膜炎臨床癥狀減輕，角膜潰瘍面明顯縮小，角膜熒光素染色呈陽性，水腫癥狀得到改善，視力有所恢復。無效：患者角膜炎臨床癥狀、體征加重。

1.4 統計學方法

采用SPSS 25.0 統計軟件進行數據處理。正態分布的計量資料采用均數±標準差（± s）表示，組間比較采用t檢驗，計數資料用頻數和構成比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2.結果

2.1 患者臨床角膜炎病原菌分布情況

經檢測，68 例患者檢測出92 株病原菌，其中病原菌主要以真菌為主（50.00%），其次為革蘭陽性菌（20.65%），革蘭陰性菌（7.61%），單純皰疹病毒（21.74%），見表1。

表1 92 株臨床角膜炎病原菌分布情況

2.2 患者治療后治療效果比較

患者治療后1 個月治療有效率高于治療后2 周，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 68 例患者治療后治療效果比較[n（%）]

3.討論

感染性角膜炎是臨床病原菌侵襲角膜引發的炎癥反應，由于現代社會發展以及生活習慣改變，會增加該類疾病發病率，因此需要臨床提供快速準確的診斷方法才能改善患者預后，降低術后不良癥狀發生[8]。目前感染性角膜炎臨床診斷方法主要依賴于患者病史調查，裂隙燈檢查以及病灶刮片鏡檢和微生物培養等方法，但有一定局限性，會受到患者本身主觀影響，造成診斷效率過低。角膜激光共聚焦顯微鏡屬于一種非侵入性的檢查設備，對臨床診斷角膜炎具有輔助作用[9]。該類設施能夠在無創前提下獲得角膜以及周圍組織部位的清晰圖像，同時還能從細胞水平上分析患者眼表結構，具有較強的直觀性。臨床采用的傳統診斷感染性角膜炎的金標準是患者實驗室的病原菌培養，但是該類技術角膜選取量較少，陽性率較低，同時該類標準常由臨床醫師決定，會存在誤診情況。本結果顯示68 例患者檢測出92 株病原菌，其中病原菌主要以真菌為主（50.00%），其次為革蘭陽性菌（20.65%），革蘭陰性菌（7.61%），單純皰疹病毒（21.74%），說明臨床對于感染性角膜炎患者采用角膜激光共聚焦角膜顯微鏡進行診斷治療，能夠清晰顯示病原菌分布情況，主要以真菌為主。感染性角膜炎包括真菌性、阿米巴性、細菌性、病毒性以及混合性等類型，真菌性角膜炎是潛在致盲性炎癥，致病基因為鐮刀菌屬以及曲霉屬真菌等。實驗室微生物檢查主要為角膜潰瘍面分泌物涂片鏡檢以及培養等，但是阿米巴培養時間較長，因此當病原體處于角膜深層時，刮片難以接觸，但是棘阿米巴包囊能夠直接使角膜激光共聚焦顯微鏡來發現和診斷，提高了診斷準確度。細菌性角膜炎在感染性角膜炎中占據主要地位，同時該類癥狀研究較少[10]。病毒是感染性角膜炎的常見致病菌，該類癥狀無明顯特異性，只有賴于實驗室檢查。角膜激光共聚焦顯微鏡用來評估角膜結構變化并監測患者預后情況。本文中，經過治療后1 個月有效率高于治療后2 周（P＜0.05）。說明臨床對于感染性角膜炎患者采用角膜激光共聚焦顯微鏡進行診斷治療，治療時間越長，有效率越高。共聚焦顯微鏡被廣泛應用于臨床，但仍存在局限性，具有高度敏感的角膜炎患者檢查會引起眼部不適，檢查時患者眼球轉動會導致圖像不清晰，同時該類檢查方法視野范圍較小，會需要操作者不斷在病變組織部位進行移動檢查。

綜上所述，臨床對于感染性角膜炎患者采用角膜激光共聚焦顯微鏡進行診斷治療，能夠清晰顯示病原菌，并且治療時間越長，有效率越高。