不同標本及處理方式對微柱凝膠卡式法交叉配血試驗結果的影響

(南樂縣人民醫(yī)院，河南 濮陽 457400)

隨著現(xiàn)代醫(yī)學不斷發(fā)展，輸血治療已成為臨床上常用的一種急救措施，輸血前需進行供血者與受血者之間的交叉配血檢查，避免出現(xiàn)溶血反應危及受血者生命[1]。目前臨床上常用的交叉配血檢查法是聚凝胺法(Manual polybrene test，MPT)[2]，準確性高，但操作比較繁瑣。微柱凝膠法(Microcolum gel test，MGT)是上世紀90年代引入我國的一種新型交叉配血檢查法，與MPT相比，MGT具有靈敏度高、操作簡便及重復性好等優(yōu)點，但當標本處理方式不當時MGT的假陽性率高于MPT[3]。本研究旨在通過比較血樣抗凝與否以及紅細胞懸液濃度的高低對交叉配血試驗結果的影響，探究不同標本及處理方式對微柱凝膠卡式法交叉配血試驗結果的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

采集南樂縣人民醫(yī)院收治的60例需要接受輸血治療患者，每例采集兩管2.5 mL血液，分別收集于EDTA-K2抗凝管(EDTA-K2抗凝組，60例)和普通促凝管(普通促凝組，60例)中，使用MPT法進行交叉配血試驗血型與同型供血者相吻合；不完全抗凝血樣：收集于EDTA-K2抗凝管管中的出現(xiàn)凝塊的日常血常規(guī)檢查血樣(不完全抗凝組，30例)，使用MPT法進行交叉配血試驗血型與同型供血者相吻合；供血者血樣：取樣管中留取血樣用生理鹽水配制成0.8%紅細胞懸液，分離血漿(離心3 000 r/min，3 min)。

1.2 方法

MGT基本操作方法：將受血者與供血者的血樣離心分離血清，進一步離心分離紅細胞，分別將二者紅細胞配成0.8%生理鹽水懸液，將50μL受血者血清與50μL供血者紅細胞懸液混合加入主側凝膠管中，將50μL受血者紅細胞懸液與50μL供血者血清加入次側凝膠管中，加樣后的凝膠試劑卡(長春博迅生物技術有限責任公司，批號S20150036)置于免疫微柱孵育器中37℃孵育15 min，孵育后的凝膠試劑卡使用血型血清學多用離心機(BYL型，長春博研科學儀器有限公司)離心(900 r/min，2 min)后再離心(1 500 r/min，3 min)。探究血樣抗凝與否對試驗結果影響時，將EDTA-K2抗凝管中血樣、普通促凝管中血樣和不完全抗凝血樣作為受血者樣本使用MGT分別與供血者血樣進行交叉配血，并比較3組樣品陽性率；探究不同紅細胞懸液濃度對試驗結果影響時，將EDTA-K2抗凝管中血樣作為受血者血樣，且將受血者紅細胞懸液濃度用生理鹽水依次調整為0.5%、0.8%、1.0%、2.0%、3.0%、4.0%，使用MGT分別與供血者血樣進行交叉配血，比較3組樣品陽性率。

1.3 結果認定

紅細胞完全沉降于凝膠管底部，表明未發(fā)生抗原抗體結合反應，受血者與供血者血型相合；紅細胞凝集塊位于凝膠表面或凝膠中存在紅細胞凝塊，表明發(fā)生抗原抗體反應，受血者與獻血者血型不相合。

1.4 統(tǒng)計學方法

所有數(shù)據均采用SPSS 20.0軟件分析。其中計數(shù)資料以%表示，采用χ2檢驗，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 血樣抗凝與否對微柱凝膠卡式法交叉配血試驗結果比較

血樣抗凝與否影響微柱凝膠卡式法交叉配血試驗結果，當抗凝處理不完全時易出現(xiàn)假陽性，普通促凝組陽性率與EDTA-K2抗凝組陽性率相比，普通促凝組陽性率增高，且差異具有統(tǒng)計學意義(χ2=36.52，P<0.05)，不完全抗凝組陽性率與EDTA-K2抗凝組陽性率相比，不完全抗凝組陽性率增高，且差異具有統(tǒng)計學意義(χ2=30.39，P<0.05)。見表1。

表1 血樣抗凝與否對微柱凝膠卡式法交叉配血試驗結果比較

2.2 不同紅細胞懸液濃度對微柱凝膠卡式法交叉配血試驗結果比較

不同紅細胞懸液濃度對微柱凝膠卡式法交叉配血試驗結果的影響，當紅細胞懸液濃度大于1%時出現(xiàn)高比例的假陽性，與低濃度紅細胞懸液濃度陽性率相比，1%紅細胞懸液假陽性率較高，差異無統(tǒng)計學意義(χ2=3.18，P>0.05)，2%紅細胞懸液濃度假陽性率高于低濃度紅細胞懸液濃度陽性率，且差異具有統(tǒng)計學意義(χ2=91.76，P<0.05)，濃度大于2%紅細胞懸液時出現(xiàn)完全假陽性，陽性率高于低濃度紅細胞懸液濃度陽性率，且差異具有統(tǒng)計學意義(χ2=120.00，P<0.05)。見表2。

表2 不同紅細胞懸液濃度對微柱凝膠卡式法交叉配血試驗結果比較

3 討論

輸血治療是臨床上常用的一種急救措施，在輸血前必須進行供血者與受血者之間的交叉配血檢查，確保輸血安全[5]，避免出現(xiàn)溶血反應危及受血者性命。聚凝胺法是臨床上常用的交叉配血檢查法，微柱凝膠法是上世紀90年代引入我國的一種新型交叉配血檢查法方法，與聚凝胺法相比，微柱凝膠法靈敏度更高、操作更簡便且重復性高，但微柱凝膠法對標本的處理要求較高，當標本處理方式不當時，較聚凝胺法更易出現(xiàn)假陽性。為推廣微柱凝膠法在交叉配血檢查中的應用，急需探究與微柱凝膠法相適用的標本處理方式。本研究通過比較血樣抗凝與否以及紅細胞懸液濃度的高低對交叉配血試驗結果的影響，探究不同標本及處理方式對微柱凝膠卡式法交叉配血試驗結果的影響。

本研究表明，血樣抗凝處理及紅細胞懸液濃度影響微柱凝膠卡式法交叉配血試驗的結果，當血樣抗凝不完全及紅細胞懸液濃度大于1%時易出現(xiàn)假陽性的結果，與目前微柱凝膠卡式法應用于交叉配血容易出現(xiàn)假陽性的現(xiàn)象一致。分析原因，微柱凝膠法的原理是控制凝膠孔隙大小只允許游離的紅細胞通過，當受血者與供血者血型相合不發(fā)生抗原抗體反應時，紅細胞能通過孔隙到達管底部，此時為陰性反應，當供血者血型不相合發(fā)生抗原抗體反應，多個紅細胞結合在一起不能通過凝膠，沉積在凝膠之上和凝膠中，不能到達管底部，此時為陽性反應，當抗凝處理不完全或者紅細胞懸液濃度過高時，紅細胞自身易黏結在一起，出現(xiàn)假陽性。因此血樣標本抗凝處理不當及紅細胞濃度過高時易造成微柱凝膠卡式法交叉配血試驗出現(xiàn)假陽性。本研究樣品量較小，且探究的影響因素較少，尚不能完全避免微柱凝膠卡式法在交叉配血試驗中出現(xiàn)假陽性，還需要進一步探討其他可能引起假陽性的因素。

綜上所述，在使用微柱凝膠法進行交叉配血檢查，應注意標本的抗凝處理及控制紅細胞懸液濃度，盡量避免假陽性的出現(xiàn)。