甲狀腺相關眼病血清sICAM-1、sVCAM-1水平變化及與病情關系分析

莊 偉，車敬斌，王建民，高 鵬，張加賓

(濟南市人民醫院：1.檢驗科；2.眼科，山東濟南 271100)

甲狀腺相關眼病(TAO)臨床發病率較高，可對患者視覺功能及正常生活造成嚴重影響。自身免疫性甲狀腺病患者為TAO高發群體，尤其是Graves 病，有調查顯示，Graves 病患者中，高達25%～50%可產生TAO[1]。當前普遍認為，人體內分泌功能障礙與TAO有關。以往報道稱，可溶性黏附分子參與TAO的發病[2]。亦有報道指出，TAO影響因素包括眼眶內皮細胞受到損傷、存在炎性細胞浸潤現象等，內皮細胞受損主要變化為黏附分子表達異常增加[3-4]。為進一步明確可溶性細胞間黏附分子1(sICAM-1)以及可溶性血管細胞黏附分子1(sVCAM-1)在TAO發展中表達情況，本研究納入TAO病例150例，分析血清sICAM-1、sVCAM-1表達水平及其與TAO病情關系。

1 資料與方法

1.1一般資料 將本院2016年8月至2018年3月期間收治的150例TAO患者納入研究，入選標準：(1)與歐洲GO研究組(EUGOGO)提出的診斷標準[5]相符；(2)有確切甲亢病史或合并甲狀腺功能性疾??；(3)首次發病，近6個月未接受免疫抑制劑、抗甲狀腺素藥物或者糖皮質激素治療；(4)年齡≥18歲。排除標準：(1)伴隨造血系統疾病或者肝腎功能異常；(2)合并腫瘤、自身免疫性疾病或者感染性疾病。包括男68例、女82例，患者年齡19～67歲，平均(50.79±6.47)歲，病程0.08～0.33年，平均(0.21±0.03)年。并將同期80例接受健康體檢者納入并作為對照組，包括男34例、女46例，年齡20～66歲，平均(50.23±6.40)歲。全部納入研究者知情且自愿參與研究。

1.2方法 將TAO患者依據臨床活動度評分(CAS)差異進行分組，CAS評分達到4分即為活動期，否則為非活動期，其中活動期組83例，非活動期組67例。同時按TAO病情嚴重程度進行分組，可以分為輕度組(n=48)、中重度組(n=55)、極重度組(n=47)。記錄所有納入研究者的一般資料[包括性別、年齡、病程、體質量指數(BMI)等]，采集納入研究者空腹靜脈血3 mL，經過10 min離心處理后，獲得上層血清，將其置于EP冷凍管之中，且存儲于溫度為-80 ℃冰箱內，然后酶聯免疫吸附(ELISA)雙抗體夾心法完成sICAM-1、sVCAM-1濃度測定，采取美國R&D公司生產的檢測試劑盒。選擇Multiskan MS全自動酶標儀(購自美國Thermo Scientific公司)，調節波長450 nm，進行吸光度(A)值測定，以繪制標準曲線方式獲得sICAM-1以及sVCAM-1水平計算結果。

1.3觀察指標 比較活動期組、非活動期組與對照組、不同病情程度亞組的一般資料、血清sICAM-1、sVCAM-1水平，并進行相關性分析。

2 結果

2.1CAS分組及對照組間的比較 活動期組血清sICAM-1、sVCAM-1顯著高于其余兩組(P<0.05)，且非活動期組與對照組比較差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

2.2不同病情程度組及對照組間的比較 不同病情程度組與對照組性別、年齡、BMI比較差異無統計學意義(P>0.05)；不同病情程度亞組間病程比較差異無統計學意義(P>0.05)，見表2。

表1 CAS分組及對照組間的比較

注：與對照組比較，#P<0.05；與非活動期比較，*P<0.05；-表示該項無數據

表2 不同病情程度組及對照組間一般資料的比較

注：-表示該項無數據

2.3不同病情程度和CAS分期的患者及對照組sICAM-1、sVCAM-1水平比較 不同病情程度組中，活動期患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平顯著高于同組內非活動期患者及對照組(P<0.05)，并且在極重度組、中重度組以及輕度組中水平的依次降低，組間比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 不同病情程度亞組CAS分期患者與對照組sICAM-1、sVCAM-1比較

注：與對照組比較，▲P<0.05；與同組內非活動期比較，#P<0.05；與輕度組活動期比較，*P<0.05；與中重度組活動期比較，△P<0.05

2.4相關性分析 非活動期患者病情程度與血清sICAM-1、sVCAM-1無顯著相關性(P>0.05)；活動期患者病情程度與血清sICAM-1、sVCAM-1呈正相關(P<0.05)。見表4。

表4 相關性分析

3 討論

當前，醫學界尚未闡明TAO具體發病機制，考慮到眼眶屬于無淋巴器官部位，故臨床對其研究通常將免疫細胞與免疫分子作為重點[6-8]。免疫球蛋白超家族包括sVCAM-1與sICAM-1，這兩種物質常見于多種細胞膜以及細胞外基質，生理與病理機制中，sVCAM-1與sICAM-1分子主要由配體-受體結合途徑發揮自身作用。以往報道稱，sVCAM-1與sICAM-1對于白細胞識別、有效轉導以及黏附起著介導作用，而白細胞與相應血管內皮細胞均通過黏附方式形成級聯反應，從而對機體免疫系統起到調節功效[9-10]。血清sICAM-1的來源普遍認為有兩種學說：其中一種是認為細胞膜表面合成并分泌細胞間黏附分子1(ICAM-1)，同時于細胞膜結合部位產生蛋白水解反應，膜外部分主要脫落進入血液系統，并以sICAM-1形式存在；另一種則認為人體內編碼ICAM-1的相應mRNA可以經剪切作用將編碼跨膜區域以及胞內區堿基有效去除，然后翻譯形成sICAM-1。有報道指出，病變組織處合成與分泌的ICAM-1存在一定獨特性，能夠進入血液系統轉變為sICAM-1分子，同時結合體內淋巴功能相關抗原1(LFA-1)配體，作用于淋巴細胞，使得靜息狀態、未激活狀態相應免疫活性細胞大量黏附于病變處，從而發揮定靶功能[11-12]。在體內血液循環帶動下，淋巴細胞可以移動至靶器官，sICAM-1分子會結合淋巴細胞表面LFA-1，從而對淋巴細胞有效釋放膜信號，最終跨膜游出[13-14]。

本研究通過觀察發現，對照組血清樣本內有sICAM-1、sVCAM-1檢出，提示健康人體血清里面存在一定水平的sICAM-1、sVCAM-1。由于自身免疫性疾病的發生可導致黏附分子表達水平提高及脫落增加，造成血清中檢測出的可溶性黏附分子呈現異常升高趨勢，因此TAO評估指證可能包括可溶性黏附分子變化。本研究中，活動期組血清樣本sICAM-1、sVCAM-1表達明顯高于對照組及非活動期組，同時對照組與非活動期組表達無顯著差異，與趙勇[15]研究觀點相符。說明TAO活動期患者眼瞼部位、甲狀腺局部存在炎癥，可加快黏附分子生成速率，但是TAO非活動期患者血清sICAM-1、sVCAM-1表達正常，可能因為該時期炎癥細胞浸潤已經開始消退。本研究中，不同病情程度組中活動期患者血清sICAM-1、sVCAM-1表達水平較對照組顯著增高，而且在極重度組、中重度組以及輕度組中呈依次降低，表明活動期TAO病情越嚴重，血清sICAM-1、sVCAM-1表達水平越高，對于TAO活動期患者而言，病情程度能影響sICAM-1、sVCAM-1表達。本文相關性分析顯示，活動期患者病情程度與血清sICAM-1、sVCAM-1表達呈顯著正相關，而非活動期患者則無此相關性，與張曉斌等[16]觀點一致。說明TAO活動期，隨著病情加重，將導致sICAM-1、sVCAM-1水平隨之升高。

4 結論

TAO活動期病情越嚴重，血清sICAM-1、sVCAM-1表達水平越高，對其進行檢測能為TAO診治提供參考。