摘 要:本文以真菌毒素的檢驗工作為研究對象,介紹微芯片技術(shù)在農(nóng)產(chǎn)品與食品中快速檢測應(yīng)用內(nèi)容。通過對真菌毒素危害性的分析,從光學(xué)檢測、電化學(xué)檢測、光電化學(xué)檢測、免標記檢測這四方面內(nèi)容,詳細說明的具體的快速檢測方案,為相關(guān)的真菌毒素分析工作,提供具體的應(yīng)用材料。
關(guān)鍵詞:微芯片;真菌毒素;快速檢驗;食品安全
引言
經(jīng)濟環(huán)境持續(xù)發(fā)展,使食品質(zhì)量與食品安全成為了社會高度關(guān)注的熱點話題。尤其農(nóng)產(chǎn)品與食品檢驗的工作中,需要通過技術(shù)內(nèi)容與檢測方法的優(yōu)化升級,加快檢測工作的效率水平,在時代科技的支撐下,保證檢驗工作的順利完成。而實現(xiàn)這一目標,需要對真菌毒素的危害性作出說明,以便更好地引導(dǎo)檢測工作。
一、真菌毒素危害性分析
真菌毒素種類較多,已知的構(gòu)成類型就已經(jīng)達到了300余種,對農(nóng)產(chǎn)品與食品有較嚴重的污染效果,會在自身毒素的影響下降低人體健康狀態(tài)。尤其是黃曲霉素、鏈格孢毒素、細交鏈孢菌酮酸、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、伏馬毒素、T-2毒素等真菌毒素,都是極為典型的毒害類真菌,且在影響效果上,表現(xiàn)出明顯的特異性。
而諸如AOH、AME等病毒,還會在傳播的過程中發(fā)生突變,在拓撲異構(gòu)酶的抑制與影響條件下,造成DNA鏈的斷裂,并增加癌變概率[1]。例如,在實際病歷中,于我國林縣發(fā)生的群體性食道癌,就是由于AOH與AME這兩種病毒,對人的身體造成侵害,并在人體內(nèi)通過對于蛋白質(zhì)的合成,使人出現(xiàn)腹瀉、厭食等癥狀,并由此引發(fā)體重縮減、神經(jīng)衰弱的狀態(tài)。而在這一身體條件下,又會連帶性的增加人體內(nèi)的白細胞,使整體免疫活性發(fā)生變化,大大增加人體的負擔條件,在出血、休克等并發(fā)癥狀中,導(dǎo)致人體死亡。
因此,對于攜帶此類真菌病毒的農(nóng)產(chǎn)品與食品,務(wù)必要進行細致化的檢驗,通過系統(tǒng)且快速的分析,在科學(xué)方法下,此類物品攝入的健康狀態(tài),降低其對于人類的威脅。在及時、快速的技術(shù)條件下,提高對于真菌毒素的防治水平。
二、微芯片技術(shù)的檢測應(yīng)用
(一)光學(xué)檢測
微芯片技術(shù)條件下的光學(xué)檢測,是對傳統(tǒng)光學(xué)檢測技術(shù)的升級,可以大致總結(jié)為熒光檢測、化學(xué)發(fā)光檢測、可視化檢測這三種類型。在熒光檢測中,由于其自身的帶有高度的靈敏度,可以有效的適應(yīng)于微芯片技術(shù),并在納米級別的設(shè)備中,發(fā)揮出針對真菌毒素的檢驗效果。例如,可利用微芯片裝置,對大米樣品設(shè)置CIT。由此,通過熒光檢測方式得到電化學(xué)阻抗數(shù)據(jù),并與傳感器設(shè)備的檢測數(shù)據(jù)進行對比,當兩項數(shù)據(jù)達到平衡狀態(tài)后,則說明此種檢測方式的有效性。而在食品檢測的過程中,針對真菌毒素污染物的高通量、多通路特征,可同步完成多種真菌毒素的含量檢測,以此保證檢驗工作的高質(zhì)量與高效率條件。
化學(xué)發(fā)光檢測中,可在無需外部光源激發(fā)的條件下,通過熒光標記的激發(fā)方式,在原有熒光處理方法的基礎(chǔ)上,展現(xiàn)技術(shù)應(yīng)用條件中的便捷性特征。尤其是在OTA-肽段的復(fù)合物質(zhì)中,可以通過特定的競爭性免疫檢測,確定其肽段物質(zhì)的可再生性特征,并在多次重復(fù)的條件下,保證物質(zhì)檢測的快速分析。
另外,在可視化檢測技術(shù)中,將AFB中的水凝膠與距離可讀微芯片作為基礎(chǔ),創(chuàng)設(shè)出便攜性的可視化檢測配體。通過對AFB適配體的搭建,能夠與DNA短鏈有效的連接在一起,并合成為新型的水凝膠物質(zhì)。而在實際技術(shù)應(yīng)用的過程中,距離可讀芯片的應(yīng)用大多為V-芯片,且?guī)в泻喴椎腜OCT裝置,可以在此類裝置的輔助作用下,對待檢測的液體食品樣本,作出高效率的真菌毒素分析。尤其在OTA類毒素與AFB類毒素的鑒別中,這一裝置結(jié)構(gòu),有較為明顯的應(yīng)用優(yōu)勢。
(二)電化學(xué)檢測
微芯片技術(shù)中的電化學(xué)檢測,帶有明顯的兼容性特征與靈敏性優(yōu)勢。通過其自身的微陣列系統(tǒng),可以同時進行多個檢測項的分析,以此使微芯片技術(shù)在結(jié)合電化學(xué)檢測方法的過程中,實現(xiàn)對于真菌毒素的快速檢測分析。
例如,在微芯片設(shè)備中,可設(shè)置磁珠結(jié)構(gòu),并在免疫微芯片傳感器的檢測過程中,通過將檢測食品樣本中的ZEA與HRP-ZEA進行結(jié)合,確定競爭性的結(jié)合G蛋白在磁珠中的位置,以此完成電化學(xué)檢測的應(yīng)用,保證對于系統(tǒng)設(shè)備的檢測分析。
(三)光電化學(xué)檢測
以聚二甲基硅氧烷為材料的微芯片設(shè)備中,通過搭建間接競爭性ELISA實驗空間,可以完成集成化的氫化非硅光二極管構(gòu)建,利用這一結(jié)構(gòu),實現(xiàn)廣電化學(xué)檢測的應(yīng)用內(nèi)容。在檢測對象上,這一技術(shù)條件可以很好的適應(yīng)于OTA檢測,并重點對紅酒、啤酒等發(fā)酵液體飲品作出分析,確定其中的OTA污染條件[2]。另外,在此項光電化學(xué)檢測升級的技術(shù)條件中,可以設(shè)置可再生的微型競爭性傳感器設(shè)備,通過微芯片設(shè)備中的光電傳感,定位LOD<0.5ng/ml的OTA污染。而此項技術(shù)條件下的PDMS微芯片設(shè)備,可以在通道內(nèi),完成至少8次的重復(fù)使用條件,使其抗原分子的固定能力得到充分展示。
(四)免標記檢測
免標記檢測方法中,質(zhì)譜檢驗的方式最為典型,并在真菌毒素的分析中,展現(xiàn)出了較強的應(yīng)用價值。通過與微芯片傳感器設(shè)備的結(jié)合,可以在其中的三重四級管結(jié)構(gòu)中,定量的統(tǒng)計出花生制品中的AFS含量,并在后續(xù)的梯度洗脫與多反映鍵控制中,形成基于色譜分離技術(shù)的樣本萃取,完成MS檢測與目標物分離。在這一技術(shù)條件下,能夠有效的降低其他物質(zhì)對于檢測數(shù)據(jù)處理的干擾,并在優(yōu)化檢測環(huán)境的同時,提高檢測的處理精度,以便在調(diào)節(jié)AFB抗體與其摩爾結(jié)合比率的過程中,形成專一性的在線捕捉與濃縮處理,以此維持直接定量檢測的應(yīng)用效果,實現(xiàn)免標記狀態(tài)下的檢測分析。
總結(jié)
綜上,微芯片技術(shù)作為時代科技的前沿,在農(nóng)產(chǎn)品與食品真菌毒素的檢測中,發(fā)揮出了自身的技術(shù)優(yōu)勢,是優(yōu)化檢測速率,提高檢測科學(xué)性的重要手段。通過對此項技術(shù)的應(yīng)用研究,可以在光學(xué)、電化學(xué)等領(lǐng)域中,展現(xiàn)出不同的技術(shù)特征,并在保證檢測對象與應(yīng)用技術(shù)適應(yīng)性的同時,為食品安全提供技術(shù)保障。
參考文獻
[1]付博菲,朱曉龍,邱斌.高通量測序技術(shù)在食源性病原體快速檢測中的應(yīng)用進展[J].食品研究與開發(fā),2019,40(03):200-205.
[2]梁攀,董萍,王洋,等.免疫學(xué)技術(shù)在食品安全快速檢測中的應(yīng)用研究進展[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報,2018,9(09):2085-2089.
作者簡介:
胡延勛(1981.12.20);性別:男,籍貫:河南省寶豐縣,學(xué)歷:碩士,畢業(yè)于天津科技大學(xué);現(xiàn)有職稱:農(nóng)藝師;研究方向:農(nóng)學(xué)
(作者單位:平頂山市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測中心)