劉艷 周文梟 聶釗 曾世祥
南寧市食品藥品檢驗所 廣西南寧 530000
我國醫學在經濟的發展中有較大的提高,其中中草藥能夠有效預防一些疾病的發生,在治療過程中有較為明顯的應用效果。中草藥能夠提升動物飼料轉化率,在較大程度上可促進動物發育,并在此基礎上還能夠使動物免疫能力得到有效提升。在對中草藥進行研究的過程中,微生物發酵是中草藥一種新的研究方法,微生物在降解的過程中,中草藥活性物質被釋放,并且還會使代謝途徑發生改變,以此產生新活性物質。
試驗材料主要有菌株與中草藥,其中菌株有R3、羅伊氏乳桿菌、乳酸片球菌、6133以及LP等,由山東寶來利來生物研究院菌種保藏中心保存;中草藥有板藍根、甘草以及苦丁等,在永春堂藥店購置[1]。
(1)中草藥發酵。首先磨制中草藥,將其磨制成粉狀,不同材料分別取8 g放置于250 ml三角瓶中,加入適量純凈水,再將其放入到120度環境中進行殺菌處理,將乳酸桿菌菌液以一定濃度融入到三角瓶中,最后將其放置在30度的環境中進行培養,一般情況下培養時間為30 h。
(2)活菌數檢測。發酵后,將不同三角瓶中的發酵液取出1 ml,并將其放置于含有生理鹽水的試管中均勻震蕩,然后取出1 ml放置于下一試管中,以此對發酵液進行有效的稀釋,以此達到一定的稀釋濃度,再將稀釋過程中不同稀釋濃度各取1 ml滴于滅菌板中個,鍵入MRS培養基,均勻搖晃,在30度環境中進行培養,其培養時間為48 h。
(3)體外抑菌試驗。在滅菌培養皿中放置15 ml LB培養基,待其凝固后再把適量指示菌液加入到平皿中,并在此基礎上LB培養基5 ml,以此作為菌層。在不同平板中放置牛津杯,確保與平板培養基無縫隙。離心發酵液,在牛津杯中倒入上清液,靜止10 min,在37度培養箱中,24 h后記錄抑菌圈直徑。若直徑大于20 mm為極敏,抑菌圈直徑為 10-15 mm 為中敏,直徑在15-20 mm時為高敏,直徑小于10 mm時為低敏,無抑菌圈為無敏[2]。
由表1顯示,發酵后中草藥與為發酵相比,乳酸片球菌、R3、羅伊氏乳桿菌以及6133發酵板藍根抑菌效果較為明顯;RDH與1.1855發酵產物有不同程度的抑菌效果;R3、羅伊氏乳桿菌以及6133發酵陳皮抑菌效果較為明顯,乳酸片球菌、RDH以及PP發酵產物有不同程度抑菌效果[3]。

表1 發酵中草藥上清液對大腸桿菌抑制作用
發酵后中草藥與為發酵相比,羅伊氏乳桿菌、R3以及6133發酵板藍根具有較好的抑菌效果,其中乳酸片球菌、RDH發酵產物具有較高的抑菌效果。羅伊氏乳桿菌、乳酸片球菌、R3以及6133發酵陳皮,具有較好的抑菌效果,其中1.1855、RDH發酵產物具有較好的抑菌效果。羅伊氏乳桿菌、乳酸片球菌、6133/1.1855以及RDH發酵苦藠,具有較好的抑菌效果。由此可以看出,羅伊氏乳桿菌、6133發酵板藍根、陳皮以及苦藠的上清液對沙門氏菌具有較好的抑菌效果。
該實驗在進行軟酸菌發酵中草藥的過程中,主要使用了5味中草藥,根據有效的檢測方法對乳酸菌的生長情況進行深入的分析,并且在此基礎上還檢測了發酵產物對一些菌類的抑制作用。由此可以看出,5味中草藥能夠使乳酸菌較好生長,由此可以看出,中草藥能夠為乳酸菌的生長提供所需物質,這在一定程度上表明5味中草藥發酵后使抑菌活性得到有效增強,主要是因在乳酸菌的影響下中草藥能夠釋放更多抑菌活性成分,乳酸菌通過酶系統產生了新的抗菌活性物質。
綜上所述,乳酸菌在對中草藥發酵的過程中,中草藥成分初心了不同程度的變化,在此過程中使發酵產物抑菌效果逐漸增強,以此能夠通過乳酸菌發酵中草藥,對更好的抗菌藥物實施有效選擇,這對我國畜牧業的良好生產具有較大的促進作用,為我國經濟發展奠定良好的基礎。