響應(yīng)面法優(yōu)化米炒黨參炮制工藝研究

胡金梅 張姚飛 易珍奎 馮曉琴 楊正兵（通訊作者）

（重慶市永川區(qū)中醫(yī)院 重慶 402160）

黨參收載于《中國藥典》2015年版[1]。其主要含苷類、甾體類、糖類、生物堿等[2]。有健脾益肺，養(yǎng)血生津之功效，生品以益氣生津為主，米炒后益氣健脾作用增強[3]。基于米炒黨參的炮制工藝尚沒有可量化的工藝參數(shù)，本研究旨在對其炮制工藝進行優(yōu)化。

1.材料

1.1 儀器

Waters e2695-2489高效液相色譜儀；紫外分光光度計（UV-2600，島津）；電子天平（萬分子一，十萬分之一，賽多利斯）；超聲波清洗器（固特超聲）。

1.2 藥材與試劑

黨參炔苷（111732-201607）、D-無水葡萄糖（110833-201707）、5-羥甲基糠醛（5-HMF，111626-201610），均購自中國食品藥品檢定研究院。乙腈、甲醇為為色譜純，TEDIA；其他試劑均為分析純。

2.方法和結(jié)果

2.1 黨參炔苷與5-HMF的測定方法

Ultimate? AQ-C18（250×4.6mm，5μm），流動相：乙腈-水（27:73）；流速1.0ml/min；柱溫30℃；進樣體積10μl；檢測波長267nm。結(jié)果供試品色譜中黨參炔苷和5-HMF分離效果較好。

2.2 多糖的含量測定方法

2.2.1 顯色及測定方法 移取溶液適量于具塞試管中，加水至2ml，加入蒽酮試液6ml，塞緊試管，搖勻，沸水浴10分鐘，取出，冷卻至室溫，搖勻，625nm處測定吸光度。

2.2.2 對照品溶液 取無水葡萄糖適量，精密稱定，加水溶解。

2.2.3 供試品制備方法 取黨參粉末0.2g，加水40ml，回流提取2小時，取出放冷，濾過，取續(xù)濾液20ml，加乙醇使含醇量達75%，靜置12小時，抽濾，沉淀加水溶解至5ml。

2.3 米炒黨參炮制工藝研究

2.3.1 工藝的優(yōu)化 以炮制溫度、炮制時間、輔料用量為自變量，以黨參炔苷的量（Y1）、5-HMF的量（Y2）、多糖的量（Y3）為評價指標(biāo)，以綜合評分（Y）為響應(yīng)值進行設(shè)計。Y=（Y1+Y2）*50+Y3*0.5。實驗設(shè)計及結(jié)果見表1和表2。

表1 實驗因素水平

表2 實驗設(shè)計及結(jié)果

2.3.2 模型擬合及方差分析

回歸模型方程為：Y=49.11840+1.00154A-2.77109B-4.08988C-0.001952AB-0.003050AC+0.011238BC-0.003382A2+0.047317B2+0.19 4387C2，r=0.9026，該模型擬合度好，可用于炮制工藝的分析和預(yù)測。方差分析顯示對炮制工藝的影響次序為：炮制時間＞炮制溫度＞輔料用量，其中炮制時間影響最顯著。

表3 方差分析

2.3.3 響應(yīng)面優(yōu)化與預(yù)測 利用Design-Expert 11軟件繪制炮制溫度、炮制時間、輔料用量對米炒黨參的響應(yīng)面圖和二維等高線圖。

由圖可知，AB間交互作用顯著。以Y最大為目標(biāo)優(yōu)化最佳炮制工藝，得A=138，B=3，C=20，即取黨參藥材，加20%的米，置138℃炒制3分鐘。

2.3.4 驗證試驗：結(jié)果見表4。

表4 驗證試驗結(jié)果

由上表可知，優(yōu)化出的最佳工藝綜合評分較高，平行性較好。

3.討論

黨參米炒益氣健脾作用增強，黨參炔苷和多糖的量有所下降，而5-HMF有所增加，有學(xué)者推測5-HMF是健脾止瀉的有效成分，筆者認(rèn)為黨參炔苷和黨參多糖與健脾止瀉的量效關(guān)系有必要進一步研究。