一次性使用無菌注射器中殘留單體檢測*

李永貴，王大鵬，馬麗霞，王晶△

(1.山東省藥學(xué)科學(xué)院 山東省化學(xué)藥物重點實驗室，濟南 250101；2.山東省藥學(xué)科學(xué)院 山東省醫(yī)用高分子材料重點實驗室，濟南 250101)

1 引 言

聚環(huán)烯烴(COP)是由雙環(huán)戊二烯(DCPD[1])與其共聚單體四環(huán)十二碳烯(TCD)、甲基四環(huán)十二碳烯(MTE)等通過均聚和共聚反應(yīng)而成的高分子材料[2-3]，目前廣泛應(yīng)用于一次性使用無菌注射器的制備[4]。但是未完全聚合的DCPD、TCD、MTE殘留單體可能會隨一次性使用無菌注射器的使用遷移到人體血液中，對人體有一定的危害。研究表明，高濃度DCPD、TCD、MTE均對肌體具有一定的刺激和麻醉作用，并能引起眼、鼻、喉和肺部刺激，以及頭痛、頭暈和其它中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，甚至可能引起肝臟、腎臟損害，肌體在長期反復(fù)接觸時可致皮膚損害[5-7]。因此，控制一次性使用無菌注射器中DCPD、TCD、MTE單體的殘留量對無菌注射器的安全使用意義重大。

本研究建立了一次性使用無菌注射器中殘留單體DCPD、TCD、MTE的氣相檢測方法，并對一次性使用無菌注射器在不同溶劑中的提取溶液進行檢測[8]。通過分析檢測結(jié)果，對一次性使用無菌注射器進行安全性評價。

2 儀器與試藥

安捷倫氣相色譜儀，7890B，氫火焰離子化器FID，美國Agilent 公司；BT125D電子天平，德國Sartorius 公司；一次性使用無菌注射器，廠家提供，規(guī)格5 mL；正己烷，色譜純，山東禹王實業(yè)有限公司化工分公司；二氯甲烷，色譜純，山東禹王和天下新材料有限公司；甲醇，色譜純，山東禹王實業(yè)有限公司化工分公司；DCPD、TCD、MTF，廠家提供。

3 方法與結(jié)果

3.1 色譜條件

采用100%聚硅氧烷柱(30 m×0.32 mm×0.25 μm)，柱溫為155℃，氫火焰離子化器(FID)檢測溫度為250℃，進樣口溫度為240℃，分流比為5∶1，進樣量為1.0 μL，載氣為氮氣，流速為2 mL/min。

3.2 溶液制備

空白溶液：甲醇，正己烷，二氯甲烷。

對照品儲備液：分別精密稱取單體DCPD、TCD和MTF各100 mg置10 mL量瓶中，加入適量二氯甲烷使完全溶解后，用二氯甲烷稀釋至刻度，搖勻，作為對照品儲備液。

混合對照品溶液：精密量取對照品儲備液50 μL置10 mL量瓶中，加入二氯甲烷稀釋至刻度，搖勻，作為混合對照品溶液。

供試品溶液：取一次性使用無菌注射器2支，去掉外包裝及刻度貼膜，并用甲醇將刻度貼膜處粘合劑擦拭干凈，剪碎，置100 mL圓底燒瓶中，分別精密加入甲醇、正己烷、二氯甲烷各50 mL，加熱回流3 h，放冷，過濾。

3.3 專屬性試驗

精密量取3.2節(jié)中的空白溶液及混合對照品溶液各1.0 μL，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖及峰面積，見圖1。試驗結(jié)果表明，在本檢測條件下，三種空白溶液均無干擾，單體DCPD、TCD、MTF各峰之間分離度良好。

3.4 檢測限與定量限測定

精密量取3.2節(jié)中的混合對照品溶液，用二氯甲烷進行逐級稀釋，并按照3.1節(jié)中的色譜條件進行測定，精密量取1.0 μL，注入氣相色譜儀，測得DCPD、TCD、MTF定量限分別為1.00、0.30、0.31 μg/mL(S/N≈10)，檢測限分別為0.30、0.10、0.10 μg/mL(S/N≈3)。

圖1 對照品溶液氣相色譜圖Fig.1 The GC chromatograms of reference substances

3.5 線性試驗

精密量取3.2節(jié)中對照品儲備液0.5 mL置50 mL量瓶中，加入二氯甲烷稀釋至刻度，搖勻作為線性試驗儲備液；分別精密量取線性試驗儲備液30 μL、0.1、0.5、1、5 mL，分別置10 mL量瓶中，用二氯甲烷稀釋至刻度，搖勻，作為線性試驗溶液。

按3.1節(jié)中的色譜條件，分別精密量取上述線性試驗溶液與線性試驗儲備液各1.0 μL，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖與峰面積。以濃度C為橫坐標(biāo)，峰面積A為縱坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果見表1。

表1 DCPD、TCD、MTF線性關(guān)系測定結(jié)果Table 1 The linearity test results of DCPD，TCD and MTF

3.6 精密度試驗

精密量取3.2節(jié)中的混合對照品溶液1.0 μL，注入氣相色譜儀，測定連續(xù)6次的峰面積，計算單體DCPD、TCD、MTF的峰面積RSD%值分別為1.83%、1.68%、1.48%。

3.7 溶液穩(wěn)定性試驗

精密量取3.2節(jié)中混合對照品溶液1.0 μL，分別于0、2、4、6、8、12、24 h注入氣相色譜儀，記錄色譜圖及峰面積，結(jié)果單體DCPD、TCD、MTF峰面積RSD%值分別為1.32%、1.19%、1.37%。

3.8 回收率試驗

精密稱取單體DCPD、TCD、MTF適量，分別配制成濃度為混合對照品溶液100%的溶液各6份，按3.1節(jié)中的色譜條件，分別取1.0 μL注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積按外標(biāo)法計算，結(jié)果見表2。

表2 DCPD、TCD、MTF回收率試驗結(jié)果Table 2 The recovery test results of DCPD,TCD and MTF

3.9 樣品測定

取3.2節(jié)中供試品溶液，按3.1節(jié)中的色譜條件進行測定，分別取上述溶液各1.0 μL，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖及峰面積，按外標(biāo)法計算單體DCPD、TCD、MTF在甲醇、正己烷、二氯甲烷中提取量，結(jié)果見表3。

表3 樣品測定結(jié)果Table 3 The results of sample determination

4 討論

本研究建立了氣相色譜法檢測一次性使用無菌注射器中殘留單體DCPD、TCD、MTF的方法。選擇氫火焰離子化檢測器(FID)直接進樣的檢測方法，三種單體分離效果好，靈敏度高。本研究中DCPD、TCD、MTF三種殘留單體的安全限度依據(jù)ICH Q3C中PDE(每日最大攝入量)的計算公式，并參考?xì)埩魡误w毒理學(xué)數(shù)據(jù)NOEL(不產(chǎn)生反應(yīng)的量)計算所得。DCPD、TCD、MTF的限度分別為8.2、3.0、5.0 mg/d，遠(yuǎn)大于單體在三種溶劑中的提取量。本研究在對提取條件進行研究時發(fā)現(xiàn)，選用正己烷、二氯甲烷、甲醇分別進行提取，二氯甲烷的提取效果最好，甲醇提取效果最差；使用二氯甲烷加熱回流3 h后，殘留單體提取變化量不明顯，因此選用二氯甲烷加熱回流3 h，作為最優(yōu)提取條件。研究結(jié)果表明，一次性使用無菌注射器中殘留單體DCPD、TCD、MT在二氯甲烷、異丙醇、甲醇三種溶劑中的提取量均小于單體的每日最大攝入量。