馮連第
摘要:蔬菜農藥殘留快速檢測法因其操作簡單、成本較低、快速方便等優點,被企業、批發市場、農產品檢測部門廣泛使用。闡述蔬菜農藥殘留快速檢測的原理、優缺點、抑制率異常情況的原因分析和應對辦法,分析檢測過程中易出現的問題,并針對這些問題提出相應對策,以減少誤差,提高檢測結果的準確性。
關鍵詞:蔬菜農藥殘留快速檢測;原理;影響因素;對策
中圖分類號:S481.8? ? 文獻標識碼:A? ? 文章編號:1674-1161(2019)05-0064-02
農藥是防治蔬菜病蟲害、提高產量及實現農業機械化的主要手段。由于農藥的特性、使用方式和安全間隔期,蔬菜上或多或少都存在一些農藥殘留。當農藥使用過量或未達到安全間隔期就進入銷售環節,就會造成中毒事件,嚴重危害百姓的身體健康。因此,加強對蔬菜農藥殘留的監管已迫在眉睫,而蔬菜農藥殘留快速檢測技術是對蔬菜農藥殘留監管的一個重要手段。
蔬菜農藥殘留快速檢測技術是一種最為簡單和普遍的生化檢測法,蔬菜農藥殘留快速檢測法根據乙酰膽堿酯酶被抑制的程度(抑制率)來檢測蔬菜上的有機磷和氨基甲酸酯類這兩類農藥的殘留,具有方便快捷、成本低、操作簡單等優點,可用于半定量測定和現場定性檢測,適合在蔬菜生產基地、大型蔬菜交易市場及政府檢測部門開展快速檢測工作。這種快速檢測方法可以對含有有機磷和氨基甲酸酯這兩類農藥的蔬菜進行篩選,將食用蔬菜中農藥殘留超標的產品控制在交易之前,避免流入百姓的餐桌。
1 蔬菜農藥殘留快速檢測技術的原理
目前,國內食用蔬菜中毒主要是由有機磷和氨基甲酸酯這兩類農藥引起的。這兩類農藥會使人體中樞和周圍神經系統中的乙酰膽堿酯酶活性降低,造成神經傳導介質乙酰膽堿非正常積累,導致急性中毒。
農藥殘留速測法利用有機磷和氨基甲酸酯類農藥對動物體內乙酰膽堿酶具有抑制作用這一昆蟲毒理學原理,在乙酰膽堿酯酶及其底物(乙酰膽堿)的共存體系中加入農產品樣品提取液(樣品中含有水)。如果樣品中不含有機磷或氨基甲酸酯類農藥,酶就會正常與其他試劑發生反應,乙酰膽堿被酶水解,水解產物與加入的顯色劑產生反應出現顏色變化;如果試樣提取液中含有的有機磷或氨基甲酸酯類農藥超標,酶的活性就會降低,試樣中加入的底物就不能被酶水解,顏色也就不會發生變化。用農殘速測儀測定吸光度值,3 min后速測儀自動計算出抑制率,當抑制率小于70%時為合格,反之判定為不合格,以此判斷食用蔬菜中農藥殘留是否超標。
2 蔬菜農藥殘留快速檢測方法的優缺點
1) 蔬菜農藥殘留快速檢測方法的優點是:農殘速測儀體積小、便于攜帶,原理通俗易懂,操作簡單上手快,運行成本低廉,整個檢測過程只需3 min左右,可作為傳統儀器分析方法的有益補充,適用于現場定性檢測,特別適合針對未進入交易環節的生產基地、批發市場開展快速檢測工作,同時也是農產品檢測部門對蔬菜農藥殘留是否超標的一種快速判定方法。該方法可對含有有機磷和氨基甲酸酯這兩類農藥殘留的蔬菜進行快速粗篩,將一部分農藥殘留超標的蔬菜控制在流通之前,保證上市蔬菜的相對安全性,避免農藥超標的蔬菜流入百姓的餐桌。
2) 蔬菜農藥殘留快速檢測方法的缺點是:只能檢測氨基甲酸酯和有機磷這兩類農藥,不能檢測其他類農藥;酶試劑的活性容易降低,導致反應不穩定;人員操作上不嚴謹導致檢測結果誤差較大,重復性不好;存在檢測盲區,不適合檢測蔥蒜類、香菜、韭菜、食用菌類農產品,易出現假陽性結果。
3 檢測結果異常情況分析與對策
農藥殘留速測儀檢測方法是利用分光光度計測定樣品吸光值隨時間變化而變化的情況,通過酶試劑被抑制的程度(即抑制率)來判定農藥殘留是否超標。抑制率的正常范圍是-10%~110%,對照組樣本的吸光值在3 min后與3 min前的差值(ΔAc/ΔAs)范圍是0.4~0.8。
1) 抑制率偏小。出現抑制率值偏小的原因:一是由于不適當的儲存使酶在參加反應前就已經失去活性。酶這種生物催化劑容易失去活性、比較脆弱,一般要在常溫、常壓、接近中性酸堿度的環境中才能發揮正常的作用。酶在恒溫箱中的最適溫度是37.5~38.5 ℃,提取液的pH值控制在8.0。粉狀的酶應儲存在冷凍室內(約-18 ℃),用時用提取劑溶解,溶解后的酶液分成若干個小瓶,暫時不用的儲存在冷凍室內,用時解凍;用后的酶液儲存在冷藏室內(0~5 ℃),在一周內用完。酶液反復解凍最多不能超過2次,在試驗過程中,酶液可暫時置于室內的冰盒上。二是操作不當導致底物與酶未反應完全。應熟練掌握操作流程,取底物時用移液槍快速直接加到比色皿內,不要濺到比色皿壁上,加完底物后立即震蕩片刻,再放入農殘速測儀中,否則將影響判定結果。
2) 抑制率偏大。出現抑制率值偏大的原因:主要是由于檢測人員操作不當,導致在上機比色前酶就已經與底物發生反應。應熟練快速地完成樣品培養及上機比色,盡可能在1 min內完成。培養時間要固定,不能超過30 min。認真清洗比色皿,保持比色皿潔凈,使比色皿有較好的透光性。
4 蔬菜農藥殘留快速檢測結果出現誤判的常見原因與對策
蔬菜農藥殘留快速檢測法對生化反應條件要求比較嚴格。由于在蔬菜農藥殘留快速檢測過程中會出現一些環境因素和人為因素的影響,導致同一批次蔬菜樣品的檢測結果不同或出現較大的誤差,需要采取相應的辦法加以解決。
1) 檢測室內要配備空調、恒溫箱等設備,以確保試劑保存在最適宜的環境中。尤其是酶試劑及底物要在特定的溫度條件下保存,保持乙酰膽堿酯酶的活性。
2) 配置藥品時要嚴格按照藥劑說明書的比例配置。要使用蒸餾水或純凈水,不可使用礦物質水或自來水,以免造成檢測結果不準確。
3) 速測儀分光光度計要定期進行較準調試,以確保儀器的測試準確度。保持比色皿潔凈是減少判定結果出現誤差的一個重要因素,可在熱水浸泡后用洗滌劑清洗比色皿。
4) 不能使用同一個移液器吸取不同的試劑,要確保一個移液器配一種試劑,避免試劑發生交叉,影響判定結果。堅持“只吸不進”的原則,防止試劑污染。定量加液器的加液量誤差較大,建議使用量筒來稱量提取試劑。
5) 蔬菜自身的影響。蔥蒜類、香菜、韭菜、食用菌類、花椒等農產品的汁液中含有的物質會對判定結果產生影響,出現假陽性。處理這類樣品時,可采用整株或大塊蔬菜浸出提取液的方法。
6) 對蔬菜樣品進行前處理時,要正確使用合適的采樣工具,控制好取樣時間、取樣位置、取樣量。注意不要將樣品搗爛而使得提取液中蔬菜色素過多,以免影響分光光度計的測定結果。
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Rapid Detection Technology, Common Problems and Countermeasures
of Pesticide Residues in Vegetables
FENG Liandi
(Liaoning Agricultural Products Processing and Circulation Promotion Center, Shenyang 110001, China)
Abstract: The rapid detection of pesticide residues in vegetables is widely used by enterprises, wholesale markets and agricultural products detection departments because of its advantages of simple operation, low cost, rapid convenience and so on. This paper expounds the principle, advantages and disadvantages of rapid detection of pesticide residues in vegetables and analyzation of the causes and countermeasures of abnormal inhibition rate, analyzes the problems that are easy to occur in the detection process, and puts forward corresponding countermeasures to reduce errors and improve the accuracy of detection results.
Key words: rapid detection of pesticides residues in vegetables; principles; influencing factors; countermeasures