幾丁質酶1和熱休克蛋白72對2型糖尿病腎病的早期診斷價值

岳新，陳燕芳

（1.河南中醫藥大學第一附屬醫院 內分泌科，河南 鄭州 450004；2.鄭州澍青醫學高等專科學校，河南 鄭州 450064）

臨床上糖尿病的發病率相對較高，給社會及患者家屬造成不同程度的負擔。2 型糖尿病在所有糖尿病中占比約為90%，而2 型糖尿病腎病是該病患者最為常見的一種慢性并發癥，由于2 型糖尿病腎病后期會不 可逆轉的發展為終末期腎病，在一定程度上增加致殘率和病死率，對患者的生命健康安全造成嚴重影響[1-2]。2 型糖尿病腎病患者主要臨床表現包括由糖代謝紊亂、血壓升高等引起的血流動力學變化，且在病程延長的過程中癥狀更為嚴重[3]。既往，臨床上主要采用微量尿白蛋白排泄率（urinary albumin excretion rate, UAER）、血清肌酐等指標對早期2 型糖尿病腎病進行診斷，然而上述指標容易受到飲食、腎損傷程度等多種因素的影響，從而導致其無法準確地診斷患者的病情，存在一定的局限性[4]。而隨著相關研究的逐漸深入，有學者發現幾丁質酶1[5]、熱休克蛋白72[6]相比傳統指標可更早反映腎功能損害。鑒于此，本研究通過探討幾丁質酶1、熱休克蛋白72 在2 型糖尿病腎病中的表達及其臨床意義，旨在為臨床2 型糖尿病腎病的早期診斷及病情嚴重程度的評估提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年3月—2017年12月河南中醫藥大學第一附屬醫院內分泌科收治的2 型糖尿病患者180 例為研究對象。納入標準：①所有患者符合中華醫學會糖尿病學分會所制定的2 型糖尿病相關診斷標準[7]； ②年齡＞40 歲；③臨床病歷資料完整；④入院前未接受任何相關治療。排除標準：①合并肝、肺、心等臟器功能嚴重障礙者；②先于糖尿病發病的慢性腎炎、類風濕性關節炎、系統性紅斑狼瘡及泌尿系統感染；③伴有神經系統疾病或交流溝通障礙者；④合并其他原因導致的慢性腎臟病；⑤急性心腦血管疾病、創傷、感染、應激狀態等其他可引起熱休克蛋白72 升高的情況。將所有患者根據24h UAER 不同分為糖尿病無腎病組（UAER＜30mg/24h）55 例、早期糖尿病腎病組（UAER 為30～300mg/24h）61 例及臨床糖尿病腎病組（UAER ≥300m/24h）64 例[8]。另選取同期于本院體檢的健康志愿者50 例作為健康對照組。研究經本院醫學倫理委員會批準，患者及其家屬知情并簽署知情同意書。各組受試者年齡、性別、體重指數（body mass index, BMI）、收縮壓（systolic blood pressure, SBP）、舒張壓（diastolic blood pressure, DBP）、合并高血壓例數等一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 研究方法

各組受試者入院后均采集清晨空腹靜脈血5ml，離心獲取血清保存于-80℃冰箱冷凍保存待檢。分別采用酶聯免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）檢測血清幾丁質酶1、熱休克蛋白72水平，具體操作嚴格按照試劑盒說明書進行，相關試劑盒均購自上海酶聯生物有限公司。采用日立7180全自動生化儀分析尿素氮（blood usea nitrogen, BUN）、肌酐（Creatinine, Cr）、尿酸（uric acid，UA）以及糖化血紅蛋白（glycosylated hemoglobin, HbA1c）水平。

1.3 統計學方法

數據分析采用SPSS 20.0 統計軟件。計量資料以均數±標準差（±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，進一步兩兩比較采用LSD-t檢驗；計數資料以構成比或例數表示，比較采用χ2檢驗；相關性采用Pearson 相關性分析，采用ROC 曲線分析早期診斷價值，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組一般臨床資料比較

各組性別、年齡、BMI、SBP、DBP、合并高血壓例數比較，差異無統計學意義（P＞0.05），甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。糖尿病無腎病組、早期糖尿病腎病組、臨床糖尿病腎病組TG、TC 高于健康對照組（P＜0.05）。見表1。

表1 各組一般臨床資料的比較

2.2 各組血清幾丁質酶1 和熱休克蛋白72 水平比較

各組血清幾丁質酶1 和熱休克蛋白72 水平比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。糖尿病無腎病組、早期糖尿病腎病組、臨床糖尿病腎病組血清幾丁質酶1與熱休克蛋白72 均高于健康對照組（P＜0.05）；糖尿病無腎病組、早期糖尿病腎病組、臨床糖尿病腎病組的血清幾丁質酶1 和熱休克蛋白72 水平逐漸上升。見表2。

2.3 各組腎功能指標比較

各組BUN、Cr、UA、HbA1c 水平比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。糖尿病無腎病組、早期糖尿病腎病組、臨床糖尿病腎病組BUN、Cr、UA、HbA1c 水平高于健康對照組（P＜0.05）；糖尿病無腎病組、早期糖尿病腎病組、臨床糖尿病腎病組UA、HbA1c 水平逐漸上升。見表3。

2.4 幾丁質酶1、熱休克蛋白72 與腎功能指標的相關性

經Pearson 相關分析顯示，幾丁質酶1 與UA、HbA1c呈正相關（r=0.597 和0.606，均P=0.000），與BUN、Cr無相關性（r=1.214 和2.012，P=0.261和0.196）；熱休克蛋白72 與UA、HbA1c 呈正相關（r=0.352 和0.522，P=0.001 和0.000），與BUN、Cr無相關性（r=2.523 和2.689，P=0.172 和0.154）。

表2 各組血清幾丁質酶1 和熱休克蛋白72 水平的比較 （±s）

表2 各組血清幾丁質酶1 和熱休克蛋白72 水平的比較 （±s）

注：①與健康對照組比較，P ＜0.05；②與糖尿病無腎病組比較，P ＜0.05；③與早期糖尿病腎病組比較，P ＜0.05。

熱休克蛋白72/ （pg/ml）健康對照組 50 30.06±5.19 38.80±14.00糖尿病無腎病組 55 37.48±5.76① 60.04±10.35①早期糖尿病腎病組 61 53.27±10.98①② 102.68±30.15①②臨床糖尿病腎病組 64 73.38±18.63①②③ 182.72±35.14①②③F 值 149.931 363.803 P 值 0.000 0.000組別 n 幾丁質酶1/ （ng/ml）

表3 各組腎功能指標比較 （±s）

表3 各組腎功能指標比較 （±s）

注：①與健康對照組比較，P ＜0.05；②與糖尿病無腎病組比較，P ＜0.05；③與早期糖尿病腎病組比較，P ＜0.05。

組別 n BUN/（mmol/L） Cr/（μmol/L） UA/（μmol/L） HbA1c/%健康對照組 50 4.72±1.07 67.44±11.64 300.80±55.32 4.20±1.03糖尿病無腎病組 55 7.14±1.49① 86.36±13.13① 333.09±91.45① 8.47±2.02①早期糖尿病腎病組 61 7.26±1.25① 87.56±14.09① 357.08±94.39①② 9.89±2.17①②臨床糖尿病腎病組 64 7.35±1.33① 88.21±14.54① 404.96±98.20①②③ 11.73±5.27①②③F 值 49.771 28.786 14.334 55.196 P 值 0.000 0.000 0.000 0.000

2.5 幾丁質酶1、熱休克蛋白72 對2 型糖尿病腎病的早期診斷價值

以健康對照組、糖尿病無腎病組為陰性樣本，早期糖尿病腎病組和臨床糖尿病腎病組為陽性樣本，再將幾丁質酶1 和熱休克蛋白72 2 項指標水平劃分成8個組段，建立ROC 診斷分析模型。ROC 曲線結果顯示，幾丁質酶1、熱休克蛋白72 具有較高的2 型糖尿病腎病的早期診斷價值，在其理論閾值（分別為42 ng/ml，75 pg/ml）處，曲線下面積（area under curve, AUC）為 0.7～0.8，敏感性和特異性＞0.7。見表4和圖1。

表4 幾丁質酶1、熱休克蛋白72 的ROC 曲線參數

圖1 幾丁質酶1、熱休克蛋白72 的ROC 曲線

3 討論

近年來，隨著人們生活水平的不斷提高以及人口老齡化問題的日益加重，2 型糖尿病的發病率正呈逐年升高趨勢，從而導致2 型糖尿病腎病的發病率也相應增加[9-10]。2 型糖尿病腎病是導致2 型糖尿病患者死亡的重要原因之一，該類患者主要臨床特征為持續的尿白蛋白升高且伴有不同程度的腎功能降低，最終引發腎衰竭，需予以透析治療或腎臟移植，預后不佳[11-12]。因此，尋找一種有效的早期診斷方式顯得尤為重要。迄今為止，2 型糖尿病腎病的具體發病機制尚未完全明確，大多數學者認為因高血糖導致的代謝紊亂及血流動力學異常是引發2 型糖尿病腎病的重要因素[13-14]。既往臨床上主要是將BUN、Cr、內生肌酐清除率等作為診斷2 型糖尿病腎病的重要標志物，然而上述指標的改變通常具有滯后性，部分患者在上述指標發生異常之前便已存在腎功能損害，甚至已經發生不可逆性腎損害。由此，尋找新的早期診斷標志物成為臨床研究熱點。其中全身內皮細胞功能障礙在腎臟的損傷過程中發揮著重要作用，而幾丁質酶1 參與機體多種炎癥反應，包括內皮細胞功能障礙、心血管生成等[15]。熱休克蛋白72 在多種因素引發的腎小管損傷中存在明顯表達，是早期反映急性腎小管損傷的重要分子之一[16]。由此，本文通過研究上述2 項指標在2 型糖尿病腎病早期診斷中的應用價值，以期為臨床2 型糖尿病腎病的診斷、治療及預后評估提供新的靶點和思路。

本研究結果發現，健康對照組、糖尿病無腎病組、早期糖尿病腎病組、臨床糖尿病腎病組的血清幾丁質酶1 與熱休克蛋白72 水平均呈逐漸上升趨勢，說明2 型糖尿病腎病患者幾丁質酶1 與熱休克蛋白72 水平存在高表達，提示上述2 項指標可能在2 型糖尿病腎病的發生、發展過程中起著至關重要的作用。幾丁質是廣泛存在于自然界的一種含氮多糖類生物性高分子，是人體健康以及生存必須的第6 元素，有助于改善人體健康狀態，且具有免疫激活與免疫抑制的雙向免疫調節作用，有利于改善糖尿病[17]。因此，筆者認為幾丁質酶1 可能是通過降低機體內幾丁質水平，從而抑制機體免疫機能活性，繼而促進糖尿病腎病的發生、發展。熱休克蛋白72 是臨床上廣泛用以反映器官缺血再灌注損傷的敏感指標之一，通過監測其水平的變化不但可早期發現腎小管缺血損傷，同時也可在一定程度上鑒別腎損傷類型，因此熱休克蛋白72 可能成為2型糖尿病腎病早期診斷的有效指標之一[18-19]。此外，糖尿病無腎病組、早期糖尿病腎病組、臨床糖尿病腎病組BUN、Cr、UA、HbA1c 水平均高于健康對照組

；且健康對照組、糖尿病無腎病組、早期糖尿病腎病組、臨床糖尿病腎病組UA、HbA1c 水平也均呈逐漸上升趨勢。UAER 水平與機體腎損傷關聯密切，隨著UAER 的逐漸升高，機體各項腎功能指標水平升高，提示機體腎功能損傷進一步加重[20]。經Pearson 相關性分析可得：幾丁質酶1、熱休克蛋白72 與UA、HbA1c 均呈正相關。ROC 曲線分析結果顯示，幾丁質酶1、熱休克蛋白72 對2 型糖尿病腎病的敏感性和特異性＞0.7。提示了幾丁質酶1 與熱休克蛋白表達水平與2 型糖尿病患者各項腎功能評估指標存在著密切關聯，可用作評估患者腎功能損傷的指標，且隨著2項指標水平的不斷升高，提示機體腎損傷程度加重，并且其在2 型糖尿病患者體內表達較上述常規腎功能評估指標更早，該指標對2 型糖尿病腎病具有較高的早期診斷價值。因此，在臨床工作中可嘗試將上述2項指標作為篩查早期2 型糖尿病腎病的重要標志物。綜上所述，幾丁質酶1 與熱休克蛋白72 在早期2型糖尿病腎病中存在高表達，且與UA、HbA1c 水平存在正相關，兩者聯合檢測可能有助于2 型糖尿病腎病的早期診斷和有利于臨床治療方案的制定，進一步達到改善患者預后的目的。