糙米中嘧啶肟草醚的農藥殘留測定

賈 璇， 汪 元， 鐘祝濤， 翟夢穎， 楊俊柱

(1.南陵縣市場監督檢驗所，安徽 蕪湖 242400；2.安徽省化工研究院，安徽 合肥 230041)

嘧啶肟草醚是由韓國LG化學集團開發的嘧啶水楊酸類、廣譜選擇性芽后除草劑，其可被植物的莖葉吸收，在體內傳導，抑制敏感植物氨基酸的合成。可用于防除水稻、小麥等田地的禾本科雜草和闊葉雜草[1]。

關于嘧啶肟草醚在糙米中的殘留分析方法，陳曉琳等[2]利用石油醚液-液分配，固相萃取小柱方法進行凈化，操作復雜、繁瑣且費時；潘金菊等[3]采用改良的固相萃取凈化方法、配合超高效液相色譜-質譜儀，步驟較多，且儀器昂貴、使用成本較高。本文采用乙腈超聲提取，鹽析凈化和HPLC-UVD，建立了糙米中嘧啶肟草醚的殘留檢測方法，該方法不僅前處理簡單、快速、易操作，雜質干擾少，且準確度、精密度和靈敏度均能達到農藥殘留分析的要求。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

Agilent 1200 Series高效液相色譜儀：具可變波長紫外檢測器，美國安捷倫公司；XBLL-25多功能食品加工機，上海帥佳電子科技有限公司；AL104電子天平，梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司；Vortex Genie2渦旋儀，Scientific Industries；JP-100超聲波清洗器，深圳市潔盟清洗設備有限公司；TDL-40B高速離心機，上海安亭科學儀器廠。

乙腈、冰乙酸，色譜純，美國TEDIA公司；氯化鈉，分析純，國藥集團化學試劑有限公司；MilliQ超純水。嘧啶肟草醚標準品，≥98%，由沈陽化工研究院提供；過濾器，有機濾膜孔徑為0.22 μm。

1.2 高效液相色譜條件

色譜柱：Hypersil C18不銹鋼柱,250 mm×4.6 mm(id)×5 μm；柱溫：35 ℃室溫(溫差變化不大于20 ℃)；流動相：V(乙腈)∶V(水)=70∶30，經0.22 μm孔徑的濾膜過濾，并在超聲波浴槽中超聲脫氣10 min；流速：1.0 mL/min；檢測波長：210 nm；進樣體積：20 μL。在上述條件下，嘧啶肟草醚的保留時間為8.5 min。

1.3 實驗步驟

1.3.1 樣品制備

將糙米樣品用食品加工機粉碎，用四分法縮分，取1 000 g試樣，于-20 ℃儲存，以備實驗需要。

1.3.2 樣品前處理

稱取上述制備好的糙米樣品40 g(精確至0.01 g)于50 mL具塞塑料離心管中，依次加入10 mL水和10 mL乙腈，渦旋30 s，在(30±1)℃下超聲10 min,取出過濾，于濾液中加入5 g氯化鈉，渦旋30 s后以3 000 r/min離心5 min，取上清液過0.22 μm有機濾膜，待HPLC-UVD檢測。

2 結果與討論

2.1 色譜條件的選擇

2.1.1 檢測波長的選擇

運用紫外分光光度計，對某一濃度的嘧啶肟草醚標準溶液作全波長掃描，其最大吸收波長在200 nm左右。而水的紫外截止波長亦為200 nm,因此，綜合考慮多種因素，最終選定210 nm作為檢測波長，此時嘧啶肟草醚有較強吸收峰，同時，雜質響應值小，也避免了溶劑和流動相的干擾。

2.1.2 流動相的選擇

流動相選擇是決定高效液相色譜分離效果好壞的關鍵。在分析過程中，為了得到較好的峰形，又要達到簡便、快捷的要求，故選用甲醇、乙腈、四氫呋喃、水等各種體系和配比進行實驗。結果表明，以V(乙腈)∶V(水)=70∶30為流動相，流速為1.0 mL/min時,分析時間較短,保留時間適中，色譜峰形尖銳、對稱,基線平穩，且空白中無雜質干擾，可使復雜樣品中微量的目標分析物與雜質得到較好的分離,見圖1。

2.2 提取溶劑的選擇

采用丙酮、甲醇和乙腈等作為提取溶劑，結果表明,以乙腈提取效果最佳。因為乙腈對大多數農藥具有良好的溶解性，不僅可以高效率地提取目標化合物，且雜質較少，并可以通過鹽析除去水分，為樣品凈化和提高回收率提供了便利。

2.3 方法的線性關系

稱取一定量的嘧啶肟草醚標準品于50 mL容量瓶中，用乙腈稀釋配成0.02、0.05、0.20、0.50、2.00 mg/L系列標準溶液，在1.2的儀器條件下進行測定，以嘧啶肟草醚標準溶液的質量濃度為橫坐標和峰面積為縱坐標繪制標準曲線。結果表明，嘧啶肟草醚線性方程:y=508 448x-8 714.3，相關系數r=0.999 1，在0.020 mg/L～2.00 mg/L的范圍內，說明嘧啶肟草醚有良好的線性關系。

2.4 方法的準確度與精密度

取空白糙米樣品，添加水平為0.02、0.05、0.5 mg/kg，每個水平重復5次，按1.3.2和1.2做添加回收率實驗，結果見表1。結果表明，嘧啶肟草醚在糙米中的平均回收率為77.2～92.2%，相對標準偏差(RSD)為3.0～9.3%，均符合農藥殘留分析要求[4]。

2.5 方法的靈敏度

我國現行標準中規定了糙米中嘧啶肟草醚的最大殘留限量為0.05 mg/kg[5]。在上述儀器條件下，嘧啶肟草醚在糙米中的最小檢出量為4.0×10-10g，最低檢出值為0.02 mg/kg，低于規定的最大殘留限量，完全滿足于糙米中嘧啶肟草醚農藥殘留檢測的要求。

圖1 嘧啶肟草醚樣品色譜圖表1 嘧啶肟草醚在糙米中的準確度與精密度實驗

樣品添加含量/mg·kg-1回收率/%12345平均值RSD/%糙米0.5094.087.794.593.591.392.23.00.0571.573.776.389.675.077.29.30.0283.686.682.780.378.482.33.8

3 結論

本文建立了反相高效液相色譜檢測嘧啶肟草醚在糙米樣品中的殘留分析方法。該方法前處理簡單、快速、易操作，準確度，精密度、靈敏度均符合農藥殘留分析的要求，為大米及其制品中嘧啶肟草醚的快速檢測提供了參考依據。