獻血者ABO 血型正反鑒定不一致的原因分析及處理

龔宏偉

江陰市紅十字血站質管科，江蘇江陰 214431

人類血型系統中重要的血型系統之一為ABO 血型系統，其在臨床輸血工作中占有舉足輕重的位置，對臨床患者的生命安全有直接影響[1]。 ABO 血型正反定型血型一致是鑒定ABO 血型的重要因素，ABO 血型正反定型不一致的影響因素較多，包括不規則抗體、血型抗原、年齡以及疾病等，對血型鑒定有重要影響[2-3]。所以，在面對ABO 血型正反定型不一致的過程中，需開展其他有關血型血清學試驗，與病史、妊娠史以及輸血史等有效結合進行合理的ABO 血型鑒定，只有這樣，才可以確保臨床輸血的安全與有效[4]。為了探究獻血者ABO 血型正反鑒定不一致原因分析與處理措施，該研究選取2017 年2 月—2018 年12 月該站送檢的無償獻血者標本21 例，并選取同一時期29例臨床患者標本，所有標本都進行血型血清學檢驗，并對正反定型不一致的原因與處理措施予以分析，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該站送檢的無償獻血者標本21 例，所有獻血者都滿足《獻血者健康檢查要求》，其中有男性標本9例，所占比例42.86%，女性標本12 例，所占比例57.14%；最小年齡19 歲，最大年齡56 歲，平均年齡（38.46±20.23）歲。同時，選取同一時期29 例臨床患者標本，男性標本13 例，所占比例44.83%，女性標本16例，所占比例55.17%； 最小年齡1 歲，最大年齡85歲，平均年齡（43.45±42.63）歲。 由血站采供科對獻血前予以血型初篩，檢驗科進行復檢，把ABO 血型正反定型不一致標本送到血型參比室鑒定血型。

1.2 試劑與儀器

1.2.1 試劑 選擇上海血液生物醫藥有限責任公司生產的抗A、A1、B、H 以及抗球蛋白試劑等； 選擇上海血液生物醫藥有限責任公司提供的抗體篩選細胞、譜細胞、以及ABO 試劑紅細胞。上述實際都為檢驗合格試劑，都在有效期之內。

1.2.2 儀器 選擇日本久保田KA-2200 型離心機。

1.3 血型血清學檢測方法

①重新采集臨床送檢的29 例患者血液標本。 核對申請單詳細與準確的填寫，并將患者的性別、藥物史、疾病史以及輸血史等資料充分注明。并對21 例獻血者的藥物史、 年齡以及病史等資料進行電話咨詢。標本通過EDTA-Na2 抗凝后處理，對所用試劑準確核對，根據操作規程對ABO 正反定型進行檢測，將認為因素或者操作失誤因素充分排除；②對患者血液標本與獻血者標本予以相關試驗操作，如ABO 正反定型試驗、 直接抗球蛋白試驗以及不規則抗體篩選試驗、抗體鑒定等，按照試驗結果、電話咨詢臨床資料情況，對可能引發正反定型不一致的原因進行全面分析。 ABO 血型鑒定、抗體鑒定、ABH 血型物質檢測等根據臨床標準操作。

2 結果

經研究發現影響ABO 正反定型結果不一致原因包括年齡、淋巴瘤、自身免疫性溶血貧血、白血病、冷抗體、亞型、ABO 以外抗體；其中患者在淋巴瘤、自身免疫性溶血貧血、白血病、冷抗體、亞型、ABO 以外抗體上分別有3 例、7 例、2 例、8 例、0 例、9 例，所占比例分別為10.34%、24.14%、6.90%、27.59%、0.00%、31.03%；獻血者在淋巴瘤、自身免疫性溶血貧血、白血病、冷抗體、亞型、ABO 以外抗體上分別有0 例、0 例、0 例、11 例、2 例、8 例，所 占 比 例 分 別 為0.00%、0.00%、0.00%、52.38%、9.52%、38.10%。主要原因分析與處理措施見表1。

表1 ABO 正反定型結果不一致原因分析與處理措施

3 討論

引發ABO 血型正反定型不一致的原因較多，包括自身免疫性溶血性貧血、 抗體減弱以及ABO 血型亞型等，另外，也會受到人為因素與技術因素的影響。針對ABO 血型正反定型不一致標本，需根據操作標準規程再次試驗，按照實際問題對可能引發正反不一致的原因有效分析，并予以針對性的處理措施[5-6]。

該研究選擇的無償獻血者標本21 例與29 例臨床患者標本都為本地人，都滿足《獻血者健康檢查要求》，經過電話詢問將有關疾病可能導致血型抗原表達異常的因素充分排除，如腫瘤以及血液系統等疾病[7]。通過統計分析發現獻血者出現ABO 血型正反定型不一致的原因包括冷抗體、 亞型、ABO 以外抗體等，該結果與國內其他文獻報道一致。 因為年齡因素、遺傳因素以及自身免疫因素等導致ABO 血型正反定型不一致的主要原因有年齡、淋巴瘤、自身免疫性溶血貧血、白血病、冷抗體、亞型、ABO 以外抗體等[8]。

抗體減弱或者缺失在新生兒與老年患者中比較常見。 伴隨年齡的不斷增大，機體抗原抗體水平日益減弱或者缺失[9]。針對此種情況，可選擇增強抗原抗體反應技術，如增大血清量，在4℃內放置增強反應等，并且通常以O 型紅細胞或自身細胞進行陰性對比。針對抗體集減弱或者消失的患者與獻血者而言，需與臨床資料有效結合對結果進行全面判斷[10]。

疾病會對血型的鑒別造成影響。多發性骨髓瘤或淋巴瘤患者血漿蛋白紊亂會產生緡錢狀凝集表現，選擇生理鹽水適當稀釋血清后予以試驗，于顯微鏡下發現紅細胞緡錢狀凝集時，添加一滴生理鹽水能夠有效消除。 試管試驗發現存在緡錢狀凝集表現，使試管離心，把上清液傾去并瀝干，再添加兩滴生理鹽水，重懸，會使假凝聚有效消失，而真凝聚不會消失，嚴重情況可再次試驗一次[11]。 自身免疫性溶血貧血患者直抗陽性影響正定型，溫抗體型自身免疫性溶血貧血紅細胞通過生理鹽水洗滌與氯喹放散后予以正定型，選擇自身紅細胞吸收60 min 后的血清予以反定型，若出現冷抗體型，可選擇45℃熱生理鹽水對紅細胞多次洗滌后對血型科學判定。

研究中抗原減弱在亞型與白血病中十分常見。亞型在獻血者中十分常見，亞型與白血病在患者中較為常見。 亞型屬于基因突變導致，與疾病的出現沒有聯系；白血病是一種血液系統惡性腫瘤，會引發ABO 血型抗原顯著減弱，通常為暫時性的，會伴隨疾病的改善而恢復。

吸收放散試驗與唾液血型物質檢測能夠對弱A與弱B 抗原進行檢測，確定有無若抗原出現，對ABO血型有效鑒定。 并根據受檢者的病史、輸血史等情況對ABO 血型進行確定。 血液病導致的血型變異會伴隨病情的改善而恢復期原本血型，需對其充分關注。隨后檢測ABO 血型基因，使結果更加明確[12]。

于獻血者與患者中冷抗體與ABO 意外抗體都存在。 高效價冷抗體在冬季十分常見，會引發反定型產生凝聚表現，在37℃水浴箱內放置2 min 對結果認真觀察，凝聚消失，或者選擇溫生理鹽水對紅細胞進行洗滌，將冷抗體的影響充分去除，正反定型一致。導致ABO 血型正反定型不一致的同種抗體主要為血型系統抗體。 研究中ABO 意外抗體主要以抗-M 抗體為主，反定型O 細胞凝聚而自身對比陰性時，需對同種抗體的可能性充分考慮。借助譜細胞對其抗體特異性有效鑒定，按照反應格局確定抗-M 抗體，選擇M 抗原陰性的紅細胞作為試劑紅細胞予以反定型鑒別，使同種抗體的影響充分消除。 該研究結果顯示：經研究發現影響ABO 正反定型結果不一致原因包括年齡、淋巴瘤、自身免疫性溶血貧血、白血病、冷抗體、亞型、ABO 以外抗體；其中患者在淋巴瘤、自身免疫性溶血貧血、白血病、冷抗體、亞型、ABO 以外抗體上分別有3 例、7 例、2 例、8 例、0 例、9 例； 獻血者在淋巴瘤、自身免疫性溶血貧血、白血病、冷抗體、亞型、ABO 以外抗體上分別有0 例、0 例、0 例、11 例、2 例、8 例。 張趁利等[5]學者探究了無償獻血者ABO 血型正反鑒定不一致的原因與處理策略，研究選取血站2011 年1月—2012 年12 月期間28 例無償獻血者正反不符標本，并對所有標本予以檢測，結果顯示：全部血型鑒定不一致者通過檢測后，發現正反一致與正反不一致者分別有5 例、23 例，正反不一致者主要表現為抗體減弱、冷凝集、ABO 以外抗體、亞型，分別有5 例、8 例、6例、4 例，說明分析血型鑒定不一致原因，并借助相應試驗對獻血者血型進行鑒定，合理鑒定血型，可確保臨床患者安全與有效的輸血，此研究結果與該研究結果相近。

綜上所述，合理鑒定獻血者ABO 血型，避免不合格血液在臨床上運用，保證臨床用血的安全與有效。