抗生素、采集方法兩個獨立因素對痰樣本細菌學檢驗結果的影響比較*

李亞輝

（河南醫(yī)學高等專科學校檢驗系，河南鄭州451191）

在所有引起疾病感染的病原菌內，細菌L 型主要為細菌細胞壁發(fā)生部分性缺損或者全部喪失而生成的細菌種類。而細胞壁發(fā)生缺失的過程有些為自發(fā)性，有一些屬于人工誘導，因人工誘導出現缺失的頻率明顯比自發(fā)性高出很多。痰液樣本檢驗過程中通常使用瓊脂培養(yǎng)基，菌落呈現“油煎蛋”狀［1］。對痰液樣本細菌學檢驗結果造成影響的因素諸多，本研究結合實際情況選擇2015 年6 月至2018 年6 月本校附屬河南省第二人民醫(yī)院收治的1 280 例呼吸道感染者為研究樣本，全面分析抗生素、采集方法兩個獨立因素對痰液樣本細菌學檢驗結果影響情況，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015 年6 月至2018 年6 月1 280 例呼吸道感染患者為研究樣本。經診斷以及相關檢查，受試者確診，符合衛(wèi)計委頒布的關于此類疾病的相關診斷標準。本研究經倫理委員會審批通過且受試者均知情同意。

將入院日期為單號的640 例患者依照就診順序隨機平均分為觀察Ⅰ組及對照Ⅰ組，各320 例。觀察Ⅰ組男179 例，女141 例，年齡49～78 歲，平均（63.62±4.85）歲。對照I 組男177 例，女143 例，年齡48～77 歲，平均（62.25±5.14）歲。兩組患者基線資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

將入院日期為雙號的640 例患者依照是否使用抗生素分為觀察Ⅱ組以及對照Ⅱ組。觀察Ⅱ組共324 例，未使用抗生素，男183 例，女141 例，年齡50～80 歲，平均（65.28±5.24）歲。對照Ⅱ組共計316 例，使用抗生素。男162 例，女154 例，年齡50～79 歲，平均（65.25±3.96）歲。除使用抗生素情況外，兩組患者基線資料差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 樣本收集方式

醫(yī)護人員在收集患者痰液樣本24 h 前，應當開展有關健康知識宣傳教育工作，包括收集痰液樣本的方式、檢驗重要性和檢驗過程中需要注意的事項等。醫(yī)護人員應當結合患者的實際情況，填寫痰液培養(yǎng)檢驗項目，同時注明抗生素使用情況和應用時間。所有患者均在入院后第一日開展樣本收集工作，詳細情況為：①對照Ⅰ組。使用自然咳痰法收集痰液樣本，病患在清晨起床之后用清水漱口，連續(xù)進行3 次，此后用力咳出痰液，使用經無菌化處理的容器，接收第一口痰液，并于60 min 內送至檢驗科等待檢測，工作人員對于痰液樣本開展常規(guī)化細菌學檢測［2］。②觀察Ⅰ組。使用改進后的痰液樣本收集方式，完成樣本采集工作。病患清晨起床之后先刷牙，醫(yī)護人員對患者開展樣本采集、健康知識宣教，之后使用清水漱口，連續(xù)進行3 次，咳出痰液使用經無菌化處理的容器接收后，將痰液樣本送到檢驗科等待檢驗。工作人員首先應當將痰液放置在無菌試管內，并加入劑量為15～20 ml 的無菌等滲鹽水，震蕩處理5～10 s，利用接種環(huán)蘸取試管底痰液樣本到另一試管之中，如此進行2 次后開展細菌學檢驗工作。③對照Ⅱ組以及觀察Ⅱ組的痰液樣本收集方式與對照Ⅰ組收集方法相同。

1.3 樣本合格標準

①理想樣本：在低倍鏡視野下，樣本的鱗狀上皮細胞數目在10 個以下，白細胞數目25 個以上；②合格樣本：低倍鏡視野線下，白細胞數量在25 個以上，鱗狀上皮細胞數目在25 個以下，在此同時細菌種類在3 種以下；③不合格樣本：鱗狀上皮細胞數目在25 個以上。針對不合格樣本，應當進行二次采集工作，直至合格后方可進行細菌培養(yǎng)。痰液樣本的細菌學檢測工作步驟依照我國臨床檢驗操作規(guī)程中的有關規(guī)定加以執(zhí)行。

病原菌檢測使用API（Analytic Products INC）全自動生物鑒定分析軟件系統和配套的鑒定及藥敏測試板，常規(guī)試驗培養(yǎng)基和鑒定試劑。

1.4 統計學方法

使用SPSS 20.0 統計軟件對數據進行分析。計數資料以百分比（%） 表示，采用χ2檢驗。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 對照Ⅰ組以及觀察Ⅰ組痰液樣本合格情況及病原菌檢出情況

與對照Ⅰ組比較，觀察Ⅰ組的樣本合格率明顯更高，差異有統計學意義（P＜0.05）。觀察Ⅰ組的痰液樣本陽性檢出率比對照Ⅰ組高，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 對照I 組以及觀察I 組痰液樣本合格情況及病原菌檢出情況 例（%）

2.2 對照Ⅱ組以及觀察Ⅱ組痰液樣本合格情況及病原菌檢出情況

觀察Ⅱ組與對照組Ⅱ組的樣本合格率比較差異無統計學意義（P＞0.05）。與對照Ⅱ組比較，觀察Ⅱ組痰液樣本病原菌陽性率更高，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 對照Ⅱ組以及觀察Ⅱ組痰液樣本合格情況及病原菌檢出情況 例（%）

3 討論

細菌的細胞壁之所以會產生缺陷，主要是由于在特定情況下細胞壁肽聚糖結構受損或者在細胞壁合成過程中發(fā)生抑制［3］。革蘭陽性球菌細胞壁通常表現為全體缺失，在這種狀況下，原生質中僅有一層細胞膜將其包繞，體現為球形，被稱為原生質體［4］。

革蘭陰性桿菌通過溶菌酶處理之后，因細胞壁內包含較少量肽聚糖，且留存有部分或者全部外膜加以保護，使其內部滲透壓明顯比革蘭陽性球菌低，其所有滲透環(huán)境相對較小，并且也存在抵抗能力，學術界通常稱之為原生質圓球體［5］。

患者咳出的痰屬于病理性產物，主要是由于支氣管、肺部以及氣管內發(fā)生炎癥而產生的分泌物。臨床對于患者檢查痰液樣本主要開展病原菌檢查，所取得的結果對患者病情診斷和判定有一定的作用。因此，相關人員在收集痰液樣本的過程中，應全面依照相關操作規(guī)程完成痰液樣本收集［6］。

在開展痰液樣本采集過程之中，以往臨床通常使用自然咳痰法完成該項工作。但值得說明的是，這種方法所收集的樣本容易混合唾液和鼻涕等異物，進而令樣本受到咽喉部細菌影響，導致結果失真，對患者臨床診斷和治療造成影響［7］。

本次實驗相關研究結果指出，觀察Ⅰ組樣本合格率以及陽性率比對照Ⅰ組高，這也在一定程度上證實經過規(guī)范嚴格化的收集方法，能夠明顯提升痰液樣本的檢出質量，進而令相關結果更符合實驗要求。對患者開展痰液樣本檢查，相關知識宣教可以提升患者對于檢查的認識，并盡可能的配合醫(yī)護人員完成采集工作，取得高質量樣本。另外，使用這種方法還能夠降低患者因不當操作引起的疲勞感，醫(yī)護人員對病患開展口咽部清潔指導，其中包括正確的漱口、刷牙方式，有助于降低口咽部細菌對痰液樣本影響。對所取得的痰液樣本開展震蕩洗滌可更有效地消除口咽部細菌所造成的影響，進而全面提升樣本合格率［8-9］。

抗生素會抑制相關細菌的生成，同樣會對患者痰液樣本檢測結果造成不良影響。因此，醫(yī)護人員在對患者開展痰液樣本采集之前，如果患者已經使用抗生素，將導致檢驗結果陽性率下降，從而難以判定患者病情，耽誤治療［10-11］。

本實驗相關研究結果指出，觀察Ⅱ組所取得的檢測結果陽性率明顯比對照Ⅱ組高，證實使用抗生素會對痰液樣本細菌學結果產生不良影響，導致檢驗結果陽性率降低。由此能夠看出，應盡可能在患者使用抗生素之前進行痰液樣本細菌學檢驗，可有效提升檢驗結果精準度。另外，痰液樣本檢驗結果也會受到送檢時間以及送檢條件等不良因素影響，某些細菌在離體后會在短時間內出現自融情況，從而導致檢驗結果不甚準確。所以在完成痰液樣本采集之后，應盡可能在短時間內送檢，以全面提升結果精準度，為臨床診斷和治療提供有效依據。