密花香薷顯微及理化鑒別分析

楊得毅 黃紅英

（青海省中醫(yī)院 青海 西寧 810000）

密花香薷為唇形科植物密花香薷Elsholtzia densa Benth.的干燥地上部分。具有發(fā)汗解表，化濕和中的功效，臨床用于暑濕感冒、頭痛身重、無(wú)汗惡寒、腹痛吐瀉、水腫[1]。《度母本草》云：“齊柔木布于草甸，田邊，莖方形，多分枝。葉狀如玉佩，花狀如黃花香薷，花穗狀如虎豹尾。”《晶珠本草》云：“齊柔分黃，黑兩類，黑者又分藍(lán)紫兩種，黃齊柔生長(zhǎng)在高山草甸，泉邊，沼澤草甸，葉狀如蕁麻葉，花穗狀如虎豹尾，花黃色；黑齊柔生長(zhǎng)在黑土，畜圈周圍，莖方形，葉卵形，花狀如唇形[2]。”現(xiàn)代化學(xué)研究表明：密花香薷含有揮發(fā)油0.3%，其中主要成分為香薷二醇，并且還有甾醇，酚性物質(zhì)和黃酮苷類等活性成分。莖葉含黃酮類化合物：刺槐素，5-羥基-7，4′-二甲氧基黃酮醇等。含有多種呋喃香豆精類：如5-（3″-甲基丁基）-8-甲氧基呋喃香豆精[2]。本文從密花香薷藥材的顯微及理化鑒別方面進(jìn)行了相關(guān)研究，記錄了主要的鑒別特征，可為密花香薷的真?zhèn)舞b定及資源開發(fā)提供參考。

1.實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

儀器：顯微鏡（HKZ-F-GS OLYMPUS），電子分析天平（BS 224 S北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司），紫外分光光度計(jì)(UV-1102)，日本島津高效液相色譜儀(SHZMADZU)，尼康80i顯微成像系統(tǒng)儀（日本尼康公司），紫外二極管陣列檢測(cè)器(SPD-M10AvP),輸液泵(LC-10AtvP),手動(dòng)進(jìn)樣閥(7725i),柱溫箱(CTO-10AsvP),系統(tǒng)控制器(SCL-10AvP)。

試劑：水合氯醛試劑 稀甘油 蒸餾水 乙醇（分析純）甲醇（色譜純）超純水

藥材：采于青海省大通縣城關(guān)鎮(zhèn)，海拔2800米，由青海省第四次全國(guó)中藥資源普查項(xiàng)目組鑒定。

2.實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果

2.1 顯微鑒定

2.1.1 根橫切面顯微特征 木栓層不完整或多脫落，細(xì)胞黃棕色；皮層較窄；韌皮部較窄，韌皮部束不明顯；形成層成環(huán)；木質(zhì)部占大部分，射線較寬，導(dǎo)管多呈放射狀排列，導(dǎo)管略呈方形，旁有木纖維。（見圖1）

圖1 密花香薷根的橫切面圖

2.1.2 粉末顯微特征

藥材粉末灰黃色，氣微，味微辛。腺鱗由八個(gè)細(xì)胞組成，呈放射狀排列；小腺毛由一個(gè)細(xì)胞組成，表面有不規(guī)則的疣狀突起；氣孔直軸式，葉肉薄壁細(xì)胞黃綠色，內(nèi)含黃色油滴及細(xì)小的草酸鈣方晶；木栓細(xì)胞黃棕色，由扁平的細(xì)胞層狀排列；非腺毛有兩種：一種由2到8個(gè)細(xì)胞組成，細(xì)胞與細(xì)胞連接處溢縮，溢縮部位有黃色物，整個(gè)非腺毛呈連珠狀，細(xì)胞壁透明。另一種為單細(xì)胞，呈酒杯狀；導(dǎo)管較短，以梯紋、網(wǎng)紋、螺紋為主，見圖2。

圖2 密花香薷全草粉末圖

2.2 理化鑒定

2.2.1 紫外吸收指紋圖譜

稱取密花香薷粉末兩份，各約6克，精密稱定。分別用95%乙醇和甲醇冷浸24小時(shí)。取濾液適量分別用95%乙醇和甲醇配成0.04%的溶液（即100ml含生藥0.04g），分別以95%乙醇和甲醇作為空白對(duì)照，測(cè)定紫外光譜[3]。平行測(cè)定6次，在280nm左右有最大紫外吸收。并且在300nm～500nm其峰形和最大吸收波長(zhǎng)幾乎一致，無(wú)顯著差異，見圖3。

圖3 密花香薷的紫外吸收?qǐng)D譜

2.2.2 高效液相色譜圖譜

2.2.2.1 色譜條件 高效液相色譜儀（日本島津）；色譜柱（250mm×4.6mm，5um）；流動(dòng)相：甲醇-水（1：1）；流速1.0ml／min；檢測(cè)波長(zhǎng)216nm；進(jìn)樣量10ul；柱溫35℃[4][5]。理論塔板數(shù)以槲皮素峰計(jì)算應(yīng)不低于1000。

2.2.2.2 供試品的制備 稱取密花香薷粗粉6g，精密稱定。置500ml圓底燒瓶,用甲醇300ml浸泡24小時(shí)，濾過(guò)，殘?jiān)粗翢o(wú)色，水浴揮至20ml，置25ml容量瓶中，甲醇定容作為供試品溶液，按本法色譜條件測(cè)定光譜，平行進(jìn)樣3次，在1～15分鐘內(nèi)其峰形基本一致[5]，各組分之間分離度好，見圖4。

圖4 密花香薷高效液相圖譜

3.討論

密花香薷一種非腺毛呈連珠狀，細(xì)胞壁透明，另一種為單細(xì)胞，呈酒杯狀。腺毛細(xì)胞表面灰黑色，有疣狀突起。腺鱗由八個(gè)細(xì)胞組成，呈放射狀排列。導(dǎo)管為螺紋導(dǎo)管。葉肉薄壁細(xì)胞含黃色油滴，并可見細(xì)小的草酸鈣方晶。本實(shí)驗(yàn)從密花香薷的顯微及理化鑒定方面對(duì)其進(jìn)行研究，其方法簡(jiǎn)單，易于鑒別，實(shí)驗(yàn)中充分采用現(xiàn)代影像技術(shù)及顯微成相系統(tǒng)，方法便捷，能直觀真實(shí)的反映各組織的形態(tài)、細(xì)胞特征。利用理化鑒定中的高效液相及紫外吸收進(jìn)行鑒定分析研究，方法簡(jiǎn)單、重現(xiàn)性強(qiáng)，是一種行之有效的分析方法。上述部分可作為密花香薷的鑒別要點(diǎn)，可為密花香薷的生藥學(xué)研究和質(zhì)量評(píng)價(jià)的修訂提供參考。