螟黃赤眼蜂在梨園的保護釋放技術分析

張 燁，朱文雅，李 唐

（山西省農業科學院植物保護研究所，農業有害生物綜合治理山西省重點實驗室，山西太原030031）

赤眼蜂（Trichogramma spp.）是一類體型微小的卵寄生蜂，與其他寄生或捕食性天敵相比，它能通過自身的產卵行為破壞寄主卵，將害蟲殺死于孵化階段，故常被作為一種重要的天敵昆蟲資源，廣泛應用于農林類害蟲的生物防治[1]。

赤眼蜂主要是通過在田間的淹沒式釋放來達到防治靶標害蟲的目的[2-4]，根據其釋放方式的不同，可分為人工釋放和機械釋放。人工釋放即依靠人力將蜂卡懸掛于作物的特定部位，而機械釋放則需要借助飛行裝置對蜂卡進行高空投放。由于卡紙上通常為發育至蛹態后期的蜂，為了保證其在田間較高的羽化率，對釋放過程中及釋放后蜂卡的合理保護是非常有必要的。基于此，一些具有保護性功能的釋放裝置被逐一研發，包括紙袋放蜂器[5]、盒式放蜂器[6]、杯型放蜂器[7-8]、球狀放蜂器[9-11]等。根據不同作物的生長環境特點，選擇合適的保護裝置作為釋放載體單獨或配套使用以防治靶標害蟲，例如，將盒式放蜂器和球狀放蜂器應用于玉米田防治玉米螟，將球狀放蜂器應用于水稻田防治二化螟[12]，將紙袋放蜂器應用于棉田防治棉鈴蟲[13]，將杯型放蜂器應用于梨園防治梨小食心蟲等。此外，也有學者將懸浮溶液作為赤眼蜂無人機釋放時的保護介質[14]。這些保護性措施均在一定程度上提升了赤眼蜂的田間釋放效率。

螟黃赤眼蜂（Trichogramma chilonis Ishii）寄主種類較為廣泛，可寄生的農林類害蟲高達80 多種，是目前規模化生產及應用的赤眼蜂之一[15-17]。梨小食心蟲（Grapholita molesta Busck）是一種世界性分布的果樹害蟲，其寄主包括梨、桃、蘋果、李等薔薇科的多種果樹[18]，嚴重影響果實的品質和產量[19]。除了松毛蟲赤眼蜂（Trichogramma dendrolimi Matsumura）和暗黑赤眼蜂（Trichogramma pintoi Voegele）[20-22]，螟黃赤眼蜂也是一種對梨小食心蟲具有潛在寄生能力的卵寄生蜂。已有學者探討了螟黃赤眼蜂對梨小食心蟲的防治效果，但相關研究集中在適宜蜂種的篩選，以及赤眼蜂釋放同生物農藥噴施相結合的生物防治配套技術的應用[23]，并未涉及到梨園不同栽培狀態及赤眼蜂不同釋放模式對蜂卡的出蜂情況及田間防效的影響。

本研究分別對套袋和無袋梨園，螟黃赤眼蜂經常規釋放和保護釋放后蜂卡的出蜂、釋放后蜂種的存活及其對梨小食心蟲的田間防效情況進行了比較分析，旨在找到一種簡便高效的赤眼蜂釋放方法，以期為赤眼蜂的科學合理化利用提供技術支持和理論支撐。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

螟黃赤眼蜂：采自山西省運城市鹽湖區泓芝驛鎮梨園梨小食心蟲寄生卵，經鑒定純化，以米蛾（Corcyra cephalonica Stainton）卵為寄主繁育多代建立穩定的室內飼養種群。飼養條件為溫度25 ℃、相對濕度75%、光周期15L∶9D。

米蛾卵：以麥麩混配大豆面、玉米面和小麥面作為人工飼料飼養米蛾，獲取新鮮干凈的米蛾卵并于紫外燈下照射30 min 以殺死卵內胚胎，后用于螟黃赤眼蜂的繁育。

1.2 試驗方法

1.2.1 簡易杯形放蜂器的制備 一次性紙杯1 個，細鐵絲1 根。將細鐵絲沿紙杯內壁穿過杯底，待鐵絲到達杯口處稍長些，將其向外彎折以勾住杯口外壁。使用時，將細鐵絲一端纏繞在果樹枝干，使杯口朝下懸掛于合適的放蜂位置。

1.2.2 蜂卡的批量繁育 將滅活后的新鮮米蛾卵均勻撒在涂有白乳膠的卡紙（長4.00 cm、寬2.50 cm）上，卵粒間無堆砌和重疊，待晾干后形成未寄生卵卡，保證1 000 粒卵/卡。選擇出蜂率較好的寄生卵卡作為蜂種，按照寄生卵卡∶未寄生卵卡＝1∶7 的數量比例進行接蜂，培養條件為溫度25 ℃、相對濕度75%、光周期15L∶9D。待米蛾卵寄生變黑后，選擇寄生率在90%以上的卵卡作為果園釋放蜂卡備用。

1.2.3 果園釋放赤眼蜂及釋放后存活情況和防效調查 于放蜂區選擇套袋梨園和無袋梨園，分別進行赤眼蜂的保護釋放和常規釋放。保護釋放：將蜂卡用膠棒黏于杯形放蜂器內壁，用尾端鐵絲將其懸掛于果樹枝干，使放蜂點位于梨樹樹冠中部；常規釋放：將蜂卡直接用大頭針固定于梨樹樹冠中部葉片的背部。放蜂點在果園分布均勻，且保證每公頃450 張蜂卡。放蜂同時，選擇果園邊角及中心未設置放蜂點的梨樹，用大頭針將已滅活且未寄生的米蛾卵卡固定于梨樹樹冠中部葉片的背部，保證每公頃75 張卵卡。

放蜂時間分別為7 月中旬至下旬、8 月上旬至中旬，每批放蜂3 次，每次放蜂時間間隔3～5 d，具體時間根據當地氣候變化進行適當調節。自每月第2 次放蜂結束起，開始回收前一次的蜂卡及卵卡，其中，蜂卡取回后直接于室內鏡檢觀察，統計寄生卵數和出蜂卵數，計算出蜂率。卵卡取回后，先于溫度25 ℃、相對濕度75%、光周期15L∶9D 環境下培養至其出蜂，后鏡檢觀察，統計寄生卵數和出蜂卵數，計算出蜂率，方法同上。3 次放蜂結束后進行1 次防效調查，分別統計保護放蜂區、常規放蜂和未放蜂區梨果上寄生（黑卵）及未寄生（白卵）的梨小食心蟲卵數，計算防效。

1.3 數據處理及分析

試驗中所獲得的出蜂率數據先進行反正弦轉換。采用單因素方差分析及多重比較檢驗出蜂率在各處理間的差異顯著性，采用秩和檢驗分析寄生卵數在各處理間的差異顯著性，采用卡方檢驗分析防效在各處理間的差異顯著性。所有試驗數據均采用SPSS 20.0 軟件對其進行統計分析（P＜0.05）。

2 結果與分析

2.1 不同栽培狀態及釋放模式下蜂卡的出蜂情況差異比較

表1 不同栽培狀態及釋放模式下蜂卡的出蜂情況

對不同栽培狀態及釋放模式下蜂卡的出蜂率情況進行方差分析，結果發現，在無袋和套袋梨園，蜂卡經常規釋放和保護釋放后的出蜂率無顯著性差異（P＞0.05），均處于85%以上（表1）。分別將2 種釋放模式下的出蜂率值繪制成箱線圖，結果發現，當采用常規釋放時，蜂卡出蜂率分位值間的差距較大，數據分散程度較高，而保護釋放時，分位值間的差距較小且數據相對集中（圖1）。

2.2 不同釋放模式下，梨園赤眼蜂對米蛾卵卡的寄生及出蜂情況比較

對不同釋放模式下梨園赤眼蜂對米蛾卵卡的寄生卵數進行秩和檢驗，結果發現，常規釋放和保護釋放后米蛾卵卡上的寄生卵數在套袋及無袋梨園所表現出的差異性一致。其中，7 月第1 次放蜂后，保護釋放區已寄生米蛾卵卡上的黑卵數顯著高于常規釋放區（P＜0.05），但7 月第2，3 次放蜂后，不同釋放區之間的黑卵數差異并不明顯（P＞0.05）；8 月3 次放蜂后，保護釋放區已寄生米蛾卵卡上的黑卵數均顯著高于常規釋放區（P＜0.05）（圖2 和圖3）。此外，結果還發現，常規釋放及保護釋放區回收的米蛾寄生卵卡，其出蜂率與所釋放蜂卡之間無顯著性差異（P＞0.05），均保持在80%以上（表2）。

表2 不同類型寄生卵卡間的出蜂情況

2.3 不同釋放模式下赤眼蜂對梨園梨小食心蟲的防效情況比較

從圖4 可以看出，對不同釋放模式下梨園梨小食心蟲的寄生率進行卡方檢驗，結果發現，未放蜂區、常規釋放區和保護釋放區的梨小食心蟲寄生率之間差異顯著（P＜0.05）。具體表現為，梨園放蜂區梨小食心蟲的寄生率均顯著高于未放蜂區梨小食心蟲的寄生率，且保護釋放區要優于常規釋放區。

3 結論與討論

3.1 不同釋放模式對蜂卡出蜂率及梨小食心蟲寄生率的影響

釋放蜂卡是赤眼蜂在田間應用的常見方式，出蜂數量的多寡[24]和質量的好壞直接關系到后期的防治效果。因此，采取適當方法，適時適量地將蜂散放田間，是赤眼蜂應用研究的關鍵環節[25]。

本研究在探討不同栽培狀態及釋放模式下蜂卡的出蜂情況時發現，在無袋和套袋梨園中，常規釋放和保護釋放下蜂卡的出蜂率基本保持一致。但相較于常規釋放，保護釋放下蜂卡的出蜂率波動較小，相對更穩定。故筆者認為，保護釋放雖不能顯著提升蜂卡的出蜂率，但對于維持各放蜂點出蜂的穩定性方面具有積極作用。這主要是因為所釋放赤眼蜂大多處于待羽化期[25]，其從卵發育至蛹態后期的階段基本在室內適宜條件下完成，成蜂羽化階段受外界環境因子影響時間較短，故紙杯放蜂器對蜂卡的保護作用并未能完全體現。此外，對不同釋放模式下梨園梨小食心蟲的寄生情況進行調查時發現，釋放螟黃赤眼蜂能夠有效提升梨小食心蟲的田間寄生率，相較于常規釋放，保護釋放下梨小食心蟲的田間寄生率相對更高。研究表明，螟黃赤眼蜂可作為防治梨小食心蟲的天敵資源之一，且保護釋放能夠提升其對梨小食心蟲的寄生效果。鑒于每次所釋放赤眼蜂為同一批次同一條件下繁育，其成蜂質量應大致相同，因此，推測造成寄生率差異的主要原因是不同釋放模式下成蜂存活情況的不同，這一結論在釋放后梨園赤眼蜂對米蛾卵卡的寄生試驗中得到證實。

3.2 不同釋放模式下， 梨園赤眼蜂對米蛾卵卡的寄生和出蜂情況比較

赤眼蜂釋放到田間后，易受到外界惡劣氣候條件、田間噴施化學農藥及它種天敵攻擊等生存逆境的影響，因此，赤眼蜂羽化后在田間的存活情況是影響防治效果的一個重要因素[26]。

本研究通過在梨園放蜂區懸掛米蛾卵卡，借助卡紙上被寄生的黑卵數以反映釋放后園內赤眼蜂的存活情況。結果發現，7 月第1 次放蜂及8 月的3 次放蜂操作中，保護釋放區已寄生米蛾卵卡上的黑卵數均顯著高于常規釋放區，但7 月第2，3 次放蜂后，不同釋放區之間的黑卵數差異并不明顯。這主要是因為，7 月第2 次放蜂后不久便出現短時大量的降雨，且第2，3 次放蜂間隔時間較短，卵卡在梨園投放時間也很短，故回收后統計的黑卵數結果偏低，數值異常；7 月第3 次放蜂由于受不連續降雨的影響，時間相對靠后，處于7 月下旬，而同時段的梨小食心蟲動態監測發現，該時間正是梨小的發生高峰期，推測此時梨園內的野生赤眼蜂也正處于種群增長的時期。投放的米蛾卵卡位于梨園這樣一個開放的生態系統中，因此，統計的黑卵數除了人工釋放的螟黃赤眼蜂寄生量外，還應包括梨園赤眼蜂自然種群的寄生量，這也解釋了為何回收后統計的黑卵數偏高，結果異于其他批次。基于此，筆者認為，保護釋放能夠提升羽化后成蜂在田間的存活概率。此外，研究還發現，滅活米蛾卵在田間也可作為赤眼蜂天敵的優良中間寄主，能夠被很好的寄生且維持一個相對較高的出蜂率。因此，在進行放蜂操作時，可同時投放一定數量的未寄生米蛾卵，為梨園卵寄生性天敵提供臨時的食源和寄生場所，以應對短期突發性的惡劣天氣及由于害蟲種群密度過低造成的搜尋困難等不良因素的干擾。

現代生物防治主張充分利用生物手段對有害生物進行適度治理，尤其是希望通過天敵的引進、釋放對主要害蟲進行持續控制，最終目的是建立一個可以自我維持的系統以降低有害生物的種群水平[27]。因此，赤眼蜂在田間應用時，無論以何種方式進行釋放，最終都希望能在釋放區建立一定的種群數量。但田間受自然環境及人為因素的干擾頻繁，影響赤眼蜂成蟲存活的因素有很多。董杰等[2]在探討溫度、濕度、食物和葉片等因子對松毛蟲赤眼蜂存活的時間影響時發現，在田間環境下，溫度和食物是影響赤眼蜂成蟲存活時間的主要因子，也有其他學者分別探討了溫度[28-30]和食物[31]對赤眼蜂壽命、生殖力、子代羽化率等生理指標的影響，并認為不適宜的溫度和不充足的食源會不同程度影響赤眼蜂的寄生潛能。本研究選址于運城市鹽湖區，該地區梨園防治梨小食心蟲的最佳時期為6 月中下旬至8 月中旬，而該時間段恰逢高溫酷暑，加上一定頻次的化學農藥的施用，使得田間的氣候環境不太利于赤眼蜂對梨小食心蟲的后續防治。本研究利用以紙杯放蜂器為核心的保護釋放技術，緩解了田間高溫、風雨及它種天敵對蜂卡的傷害，并為羽化后成蜂提供了庇護所。此外，補充中間寄主米蛾卵的操作，也一定程度解決了田間食物不充足或寄主密度相對較低時釋放赤眼蜂難以生存的困境，利于其種群的維系和建立。但試驗中也有一些問題需要后續研究來完善，例如，保護釋放后田間米蛾卵卡上的黑卵數相對常規釋放后更多，這種寄生量的相對增多是因為保護釋放后成蜂數量的增加還是成蜂壽命的延長導致。此外，赤眼蜂在田間寄生米蛾卵卡后，雖然能正常羽化出蜂，但其子代蜂的質量如何需要進一步評估。