福清市福清山羊綿羊肺炎支原體血清學調查

郭慧瑜 林裕勝 毛坤明 胡奇林

（1.龍巖學院生命科學學院 福建龍巖 360012；2.福建省農業科學院畜牧獸醫研究所 福州 350013；3.福清市畜牧獸醫技術服務中心 福建福清 350300）

綿羊肺炎支原體 （Mycoplasma ovipneumoniae，Mo）是引起羊支原體性肺炎（Mycoplasma pneumonia of sheep and goats，MPGS）的病原體，該病在全世界養羊國家廣泛流行。1963年，Mackay最早在綿羊中分離得到Mo，Carmicheal等證明了Mo的致病性，山羊亦可感染，其中羔羊最易感[1]。1982年，胡景韶等[2]首次在國內綿羊體內分離到了Mo，隨后寧夏和新疆等地也分離到了該病原。該病發病率達10%～80%，病死率在 15%～30%[3]。MPGS的臨床癥狀主要表現為體溫升高、咳嗽、流鼻液，精神沉郁、食欲減退、逐漸消瘦等，胸和胸膜發生漿液性和纖維素性炎癥。該病一年四季均可發生，主要集中在冬春季節，在寒冷潮濕、通風不良、飼養密度過大以及個體營養缺乏導致機體抵抗力下降等因素易引起病原的快速傳播，且容易引起繼發感染[4]。Mo在福建省各縣市均有發生[5]，已成為制約福建省養羊業健康發展的主要疫病之一，給我省造成的經濟損失較大。

福清市主要飼養福清山羊，養殖模式主要以散養為主，規模化養殖場較少，為了解Mo在福清市福清山羊中的流行情況，對2019年6月從福清市4個規模化羊場和10家散養戶隨機采集的350份血清樣品進行Mo抗體檢測。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清樣品 2019年6月采集福清市羊場的山羊血樣350份，加入抗凝劑混合10～12 min，離心20 min 左右（2 000～3 000 r/min），仔細收集血清，-20℃保存備用。

1.1.2 診斷試劑 Mo抗體酶聯免疫分析試劑盒購自上海赫果生物科技有限公司。

1.2 檢測方法 按照使用說明書操作，對待檢血清進行酶聯免疫吸附試驗檢測。該試劑盒采用間接法測定標本中Mo抗體水平，用純化的Mo抗體捕獲抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被的微孔板中依次加入Mo抗體，再與HRP標記的檢測抗體結合，形成抗原-抗體-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶催化下轉化成藍色，并在酸的作用下最終轉化成黃色。顏色的深淺與樣品中Mo抗體呈正相關。用酶標儀在450 nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中Mo抗體含量。

表1 福清市不同羊場山羊感染Mo血清學檢測結果

2 結 果

由表1可知，Mo陽性總份數為350，總抗體陽性率為88.3%。不同羊場Mo陽性率為76.7%～97.1%，平均陽性率為88.4%。

3 討 論

在樣品采集過程與養殖戶的溝通交流中發現，福清市無論是規模化養殖場還是散養戶飼養的福清山羊，在免疫程序上均有注射山羊傳染性胸膜肺炎（Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae，Mccp）滅活疫苗。然而本次血清學調查結果顯示，350份山羊血清樣品中Mo有309份陽性樣品，陽性率高達88.3%，其主要原因可能是現有的Mccp滅活苗與Mo缺乏交叉免疫保護性[6]；其次，是由于飼養管理水平不當以及對該病的認識不足，沒有引起足夠的重視。

Mo在國內其它省份發病率也較高，如倪文浩等[7]對新疆伊犁、巴州地區不同品種的綿羊感染Mo情況的血清學調查結果顯示，總抗體陽性率達到15.54%（253/1 628）；黃秀君等[8]對攀枝花不同地區山羊的Mo感染血清學調查結果顯示陽性率為46.0% （55/337）；張琳[9]對青海地區貴南縣貴德黑裘皮羊進行的Mo血清學調查結果顯示，陽性率為26.5%；韓林梅等[10]在廣西牛羊主要呼吸道疫病的血清學調查中，2016年和2017年廣西6市羊血清的 Mo個體陽性率分別為 32.2%（386/1 200）和49.2%（590/1 200）；吳錦艷等[11]對國內部分地區羊支原體肺炎的血清學調查結果顯示，Mo抗體陽性率為31.92%（1 086/3 402），其中陽性率最高的省 （自治區）為內蒙古76.8%（636/828），其次是河北50%（60/120）、吉林 21.99%（93/423）。

通過與其它省份對比發現，福清市福清山羊Mo的抗體陽性率相對偏高，說明Mo在福清山羊中廣泛流行。當地疫控中心需要加強對該病的監測，同時做好疫苗免疫，現在市面上已有Mo滅活疫苗，只有做好疫苗免疫才能使羊場健康有序發展。此外，要注意消除各種誘導因素，加強檢疫、淘汰患羊、凈化羊場，并在引種時加強防范，做好生物安全防護 措施。