非洲豬瘟監測樣品采集、 保存及運輸

丁 飛 李師師 匡利平

（佳和農牧股份有限公司， 湖南長沙 410016）

樣品采集是非洲豬瘟疫病監測過程中十分重要的一項內容，樣品的質量好壞會直接影響實驗室的檢測結果。為保證實驗室檢測結果的準確性，本文從檢測樣品的采樣前準備、采樣方法、樣品采集與處理、樣品的保存與運輸等技術環節進行介紹，以供廣大畜牧獸醫工作者參考和借鑒。

1 采樣原則

非洲豬瘟的采樣需要關注以下4 個方面：①樣本來源全面；②采樣方式安全可靠；③采樣時間間隔科學合理；④采樣數量分批分段。

1.1 樣本來源

非洲豬瘟威脅時期，檢測對象不僅包括豬只，還應包括豬場環境（如大門、走廊、用具、欄舍、出豬臺等），場內工作人員及外來人員、車輛、物資等，通過全方位無死角嚴格監控，讓PCR 檢測結果充當“顯微鏡”“放大鏡”。樣本來源一般可分為豬只、環境、人員、車輛、物資等5 大類。

1.2 采樣方式

豬只樣本采集主要包括鼻拭子、豬血液、唾液、組織等，環境、車輛、人員、物資的采樣可通過棉拭子蘸取生理鹽水后采樣。

1.3 采樣時間間隔

非洲豬瘟病毒感染的潛伏期為4～19 d，如果在日常監測過程中血液樣本中沒有檢出非洲豬瘟病毒陽性，并不代表豬群絕對安全，有可能正處于疾病潛伏階段，建議在豬群正常的情況下，采集豬的唾液樣本進行PCR檢測，每隔21 d 采樣檢測1 次。

1.4 采樣數量及采樣頻率

不同監測類別、采樣對象、樣品類型及采樣時間見表1。

2 采樣前的準備和采樣

檢測非洲豬瘟病毒需要采集的樣本一般分為棉拭子樣本和非棉拭子樣本2 大類，從外部環境、車輛、人員、物資采集的樣本多為棉拭子樣本；檢測豬只時，采集的樣本有棉拭子、血樣、唾液、組織等。

表1 不同監測類別、 采樣對象、 樣品類型及采樣時間

2.1 采樣前準備

2.1.1 采樣人員準備

采樣人員必須洗手消毒，戴上一次性PE 手套、一次性口罩，穿上一次性防護服、一次性鞋套，帶上采樣所需的所有物品到達洗消點。

2.1.2 采樣物品準備

醫用無菌棉簽、裝有生理鹽水的1.5 mL 離心管、真空采血管、不褪色油性記號筆、離心管盒、手術剪、鑷子、75%酒精棉球、噴壺、樣品箱、樣品密封袋、冰袋、消毒桶等。

2.2 采樣方法

2.2.1 環境樣本

不同環境樣本采樣點/區域及采樣后處理方法見表2。

2.2.2 人員樣本

人員樣本采樣點/區域、采樣方法及采樣后處理方法見表3。

2.2.3 車輛及駕駛人員采樣

車輛及駕駛人員采樣點/區域、采樣方法及采樣后處理方法見表4。

2.2.4 豬群的采樣

豬群采樣點/區域、采樣方法見表5。

2.2.5 物資樣本

物資樣本采樣點/區域、采樣方法及采樣后處理方法見表6。

表2 不同環境樣本采樣點/區域及采樣后處理方法

表3 人員樣本采樣點/區域、 采樣方法及采樣后處理方法

表4 車輛及駕駛人員采樣點/區域、 采樣方法及采樣后處理方法

表5 豬群采樣點/區域、 采樣方法

表6 物資樣本采樣點/區域、 采樣方法及采樣后處理方法

3 樣品的保存和運輸

樣品采集后須以最快最直接的途徑送往實驗室。如果樣品能在采集后24 h 內送達實驗室，則可放在4℃左右的容器中運送。若在24 h 內不能將樣品送往實驗室，需將樣品放置于 -20℃以下凍結保存數小時后再送檢，并且保證運輸過程中的低溫狀態（可將樣品放置于含有冰袋的保溫箱或泡沫箱中密封）。