蛋雞注射油乳劑滅活疫苗不良反應病歷分析與預防

黃安群 李新正 韓占兵

油乳劑滅活疫苗具有安全、穩定、易于保存、便于運輸和免疫期長等優點，廣泛應用于雞傳染病的控制。但油乳劑滅活疫苗吸收較慢，通常在注射免疫后1周內會引起局部組織輕微水腫，完全吸收需要3～4周。在實際生產中，由于免疫接種人員操作不規范或疫苗質量問題會導致疫苗注射部位出現局部組織壞死、增生等不良反應，嚴重時導致雞只死亡。本文對鄭州正德牧業禽病醫院20172018兩年內收集到的56例因注射油乳劑滅活疫苗引起不良反應病例剖檢記錄進行調查、數據分類和整理，分析不良反應產生的原因，并提出有效預防措施。

一、病例來源

對鄭州正德牧業禽病醫院2017-2018兩年內臨床上確診為因注射油乳劑滅活疫苗出現不良反應就診病例進行登記，統計注射疫苗種類、注射部位、注射方法、注射劑量、注射前疫苗是否預溫、注射疫苗后出現反應的比例和死亡率等情況，并進行跟蹤調查。

二、臨床癥狀

注射油乳劑滅活疫苗出現不良反應的雞只，在注射疫苗7天后表現出精神沉郁、羽毛松亂、縮頸閉眼、食欲減退或廢絕、排黃白色稀便等癥狀，病雞出現漸進性消瘦。

頸部皮下注射后的不良反應主要表現為：雞頭面部、肉髯出現腫脹，眼眶周圍和上額腫脹發硬，形成典型的“獅子頭”，腫脹部位質地堅硬無熱疼感。頸部出現大小不等的結節，質地稍堅硬、大小不一，小的如黃豆粒、大的如棗樣。

注射部位在腿部時，主要癥狀為局部腫脹，運動障礙及不愿運動。運動時出現明顯的跛行，嚴重時局部皮膚出現潰爛，流出黃色膿性分泌物。

注射部位在胸部肌肉時，不良反應主要表現為胸肌局部形成硬塊狀增生和壞死。

三、病理剖檢變化

1. 局部病變

注射局部出現嚴重蜂窩織炎、局部組織增生和白細胞浸潤、局部肌肉壞死和腫瘤樣增生等病理變化。

頸部皮下注射不良反應，在頸部皮下疏松結締組織中形成大小不等的結節，大的如棗樣，外觀呈腫瘤樣結節，有結締組織包膜，切開后有乳白色油狀物流出，或混有灰黃色干酪樣壞死;小結節如黃豆粒，在外層有薄膜包裹，內部為乳白色油狀物或灰黃色干酪樣壞死，在頸部皮下氣管和食道周圍有大量的結締組織增生，壓迫氣管。頭部和肉髯腫脹的病例，切開頭部和肉髯皮膚，皮下有纖維素性增生，在增生物中有白色油狀物。

腿部肌內注射不良反應，切開腫脹部位的皮膚，在局部肌肉組織中出現肌肉腫脹，皮下有灰黃色漿液浸潤，切開肌肉呈灰白色熟肉狀壞死，在肌間有灰黃色干酪樣物和乳白色油狀物（圖1）。若油乳劑滅活疫苗注射過深，在坐骨神經和血管周圍有白色油狀物和白細胞浸潤及周圍組織的壞死;若油乳劑滅活疫苗注射過淺，在跗關節周圍腫脹，剖開皮膚在皮下有黃色干酪樣物和油狀物。

胸部肌內注射不良反應和腿部肌內注射不良反應病理變化相似（圖2）。

2.全身病變

剖檢病死雞，發現雞只瘦弱、發育較差。肝臟腫大、出血，質脆易碎如爛泥，在腹腔內集有大量不凝固血液;脾臟腫大。

四、診斷

1.細菌分離培養

對出現疫苗不良反應死亡雞進行病變局部和肝臟無菌采集病料，用普通營養瓊脂做細菌分離培養。結果56例病例中54例為細菌陰性，2例有細菌混合感染。

2.組織切片檢查

對瘤樣增生組織做石蠟切片，HE染色進行顯微鏡觀察，發現瘤樣增生病變組織由大量大小不等的結節、大小不等的空泡、成纖維細胞和大量嗜伊紅細胞組成。增生組織有五層結構，中心為均質紅染的壞死物，壞死物周圍是大量的核濃縮、核碎裂壞死細胞;再向外是一層較薄的上皮樣細胞帶（內有多核巨噬細胞，可見巨噬細胞吞噬油苗顆粒，而呈大小不等的圓形空泡狀）;再向外為一層寬大的炎性水腫疏松區，其中細胞數量較少;最外層是成纖維細胞、淋巴細胞構成的類似包膜的組織。

3.同批次疫苗接種試驗

將注射油乳劑滅活疫苗出現不良反應的剩余同批號疫苗，按原接種部位、方法，使用消毒注射器具、疫苗充分預溫，按生產廠家提供的接種量接種于相近日齡的雞只。每批接種5只健康的雞只，注射后觀察注射部位變化，觀察期為25天。如果7～15天個別雞只出現注射部位輕度腫脹，25天時用手觸摸局部無瘤樣腫塊，剖檢個別雞僅見有小的白色油包，未見組織壞死及潰爛現象，無明顯的組織增生和肉芽腫塊，說明油乳劑滅活疫苗是由正規廠家生產的合格產品，可安全使用。

五、疫苗不良反應情況分析

1.過最注射疫苗

因過量注射油乳劑滅活疫苗而出現疫苗不良反應的有47例，占總病例數的84%。據統計結果可知，出現油乳劑滅活疫苗不良反應與過量注射疫苗有關。

2.疫苗病原類型

統計發現，細菌性油乳劑滅活疫苗不良反應大于病毒性滅活疫苗。細菌性滅活疫苗不良反應發生率為24%，病毒性滅活疫苗不良反應發生率為15%。細菌性滅活疫苗不良反應死亡率為4%，病毒性滅活疫苗不良反應死亡率為2%。

3.疫苗預溫

根據56例油乳劑滅活疫苗出現不良反應的統計結果，有49例注射前未對油乳劑滅活疫苗進行充分預溫。從4℃冰箱中取出后直接注射，其發病率為16%，死亡率為2%;預溫不充分發病率為9%，死亡率為1%;而經充分預溫發病率為5%，死亡率僅為0.8%。

六、預防措施

措施一：油乳劑滅活疫苗是將病原微生物用理化方法滅活、添加乳化免疫佐劑加工而來，此類疫苗具有安全、穩定、易于保存和運輸、能夠反復刺激機體產生抗體、抗體持續時間長等優點，在雞的傳染病防控中應用較多。但油乳劑滅活疫苗在使用中一定要按廠家提供的劑量、方法使用，若在生產中隨意加大劑量，會導致疫苗中滅活劑、佐劑（白油、乳化劑）、未完全消除的尿囊蛋白超量，直接影響疫苗的正常吸收，引起注射部位出現水腫、肌肉壞死、瘤樣增生及肝臟壞死出血甚至死亡。本次調查56例疫苗不良反應中有84%是因為注射油乳劑滅活苗過量引起，所以養殖戶一定要按說明書中的劑量進行免疫，以減少不良反應的發生。

措施二：一般油乳劑滅活疫苗保存在溫度為4～ 8℃冰箱內，在注射前應進行預溫處理，防止在注射時冷應激引起白細胞浸潤，局部冷刺激還會導致局部毛細血管收縮、形成局部腫塊。本次調查中不預溫或預溫不充分而出現疫苗不良反應的占88%。因此使用油乳劑滅活疫苗時一定要進行充分預溫，方法是：在免疫前的1～2天，將油乳劑滅活疫苗放入雞舍預溫，或使用前用38℃溫水水浴，盡量使疫苗與雞只體溫相近，從而減少不良反應。

措施三：本次調查有12例是因注射細菌性油乳劑滅活疫苗引起的不良反應，發生率明顯高于病毒性油乳劑滅活疫苗（細菌性油乳劑滅活疫苗一般發病率在10%～40%，嚴重時達56%;而病毒性油乳劑滅活疫苗發病率一般在5%～20%）。這可能是因為細菌性油乳劑滅活疫苗在滅活過程中只考慮到細菌本身的滅活，沒有考慮到細菌產生的毒素滅活，注射后毒素刺激局部組織，從而加大了疫苗反應。生產中細菌性傳染病預防要謹慎使用疫苗，做好綜合性防控，使用時要確保產品合格，并嚴格按照說明書或在獸醫指導下使用，少量雞只試打后確認無不良反應再在大群中使用。

措施四：家禽體溫較高，一般在注射疫苗時很難引起細菌感染，本次調查56例疫苗不良反應中細菌感染僅有2例，其中1例是該群雞有葡萄球菌感染，另1例是使用注射用品未消毒和針頭過粗引起。因此要高度重視針頭選擇（雛雞用7號針頭，成年雞用9號針頭），注射前對注射器、針頭進行高溫、高壓消毒。

措施五：油乳劑滅活疫苗不良反應的發生與IV型變態反應有關，其中免疫佐劑、滅活劑和尿囊蛋白都是引起變態反應的抗原。因此，作為油乳劑滅活疫苗研發、生產廠家應進一步研發效果更佳的佐劑和滅活劑，加強油乳劑滅活疫苗安全性研究和生產管理，提供安全有效的疫苗，更好地服務于養殖企業。

（作者聯系地址：河南牧業經濟學院動物科技學院郵編：450046）