C.I. 熒光增白劑263的毒理學數據及其使用安全性（二）

董仲生

（沈陽化工研究院，遼寧沈陽，110021）

（上接《中國洗滌用品工業》第10期第73頁）

4.5 急性毒性-腹腔注射

（1）1972年用FWA 263進行了一項非-GLP研究[4]，用劑量為100、250、500、1000mg/kg bw的FWA 263商品制劑（純度約45%），每個劑量組15只雄性Wistar大鼠進行了腹腔注射實驗，觀察期14天。

結果：劑量mg/kg/死亡大鼠數量/ 有癥狀大鼠數量/大鼠數量

癥狀：給藥30 min～7 days，全身狀況明顯降低。LD50＞2500 mg/kg bw。

（2）1972年用FWA 263還進行了一項非-GLP研究[4]，用劑量為100、250、500、 1000、1250、1500、1600、1700、1750、2000、2500 mg/kg bw的 FWA 263工業級（純度100%），每個劑量組15只雄性Wistar大鼠進行了腹腔注射實驗，觀察期14天。

結果：劑量mg/kg/死亡大鼠數量/ 有癥狀大鼠數量/大鼠數量

癥狀：給藥1～3天后有死亡發生。全身狀況明顯降低，鎮靜、呼吸困難。LD50＞1725 mg/kg bw。

4.6 眼睛刺激

（1）兔子(性別和品系不詳) 被施用50mg三種不同劑型的FWA 263：鈉/鉀鹽的液狀劑型，大約28%的無水酸工業品；(純度100%)工業品；大約45%的FWA 263四鈉鹽。FWA 263被用于兔子眼睛，使用方式不詳。只有FWA 263液狀劑型的引起眼結膜的輕微變紅。

結果：在該實驗中FWA 263四鈉鹽對兔子的眼睛沒有刺激[5]。

（2）Kimmerle、Thyssen和Bayer公司分別于1972年、1974年和1975年，用 FWA 263(100%的FWA 263及含有切削劑和液體配方的制品)對兔子眼睛的刺激性進行了實驗[3]，結果：FWA 263對兔子眼睛沒有刺激作用。

（3）1972年用FWA 263進行了一項非-GLP 研究[4]，用2只兔子，單一劑量的 FWA 263為50mg/kg bw。結果：FWA 263對兔子眼睛無刺激性。

（4）1975年用FWA 263進行了一項非-GLP 研究[4]，用沒有稀釋的 FWA 263液體制劑處理2只兔子的眼睛。結果：在施用1h后兔子眼睛輕微變紅。

（5）1986年根據OECD準則405 (急性眼刺激性/腐蝕性)和GLP，用雌、雄性新西蘭白兔各3只，將FWA 263 0.1g放入兔子的右眼睛中，左眼不處理用于對照。在1、24、48和72h對眼刺激進行了評估[1]。

結果：在處理1h后，觀察到一只被處理的眼睛角膜表面的正常光澤消光，隨后沒有觀察到這只眼睛的角膜混濁。在整個研究階段其他被處理的眼睛角膜表現正常。

在處理1h后兩只處理的眼睛發現虹膜炎，同時其他被處理的眼睛虹膜表現正常。在24、48和72h沒有觀察到虹膜炎癥，結果見表4。

在處理后的1和24h觀察到所有處理的眼睛出現結膜炎，在48和72h正常。

結論：在施用FWA 263后，在24、48和72h計算得分平均值，所有動物角膜不透明性＜1分，虹膜炎＜1分，結膜變紅和水腫＜2。該物質不滿足被分類為眼睛刺激的標準

因此，根據CLP法規(EC 1272/2008), 該物質可以被分類為無刺激。

4.7 皮膚刺激/致敏

（1）1972年拜耳公司對14只豚鼠進行的皮內實驗[4]表明，FWA 263（100%純度）不是致敏劑。

（2）1972年進行了一項非-GLP研究[4]，用FWA 263含量約為45%的商品制劑，用2只兔子的內耳分別進行了24h的半封閉斑貼實驗。結果顯示：對兔子的皮膚無刺激。

表4 兔子眼睛給藥后的反應和評估得分

（3）1975年進行了一項非-GLP 研究[4]，用FWA 263的液體制劑，對4只兔子的內耳分別進行了4～24h的半封閉斑貼實驗。結果顯示：對兔子的皮膚無刺激。

（4）用豚鼠（5只雄性、9只雌性，品系不詳）經最初皮內注射0.05mL0.1%的FWA 263四鈉鹽生理鹽水懸浮液之后，進行9次附加的0.1mL懸浮液誘導注射，觀察FWA 263四鈉鹽的致敏情況。在最后誘導注射14天以后，用0.5mL的懸浮液激發。結果顯示：沒有發現不良反應。在該實驗中FWA 263四鈉鹽對豚鼠不致敏[5]。

4.8 經口-重復劑量毒性

（1）1972年拜耳公司進行了一項亞慢性重復劑量毒性實驗[5]，Wistar大鼠 (15只/性別/劑量) 經口灌胃劑量為30、100和300 mg/kg-bw/day 的FWA 263四鈉鹽（純度100%）13周。

結果顯示：沒有發現死亡和臨床癥狀。與對照相比，在體重、組織病理學參數、臨床化學或尿分析上沒有差別。尸檢顯示沒有肉眼可見的不良發現，器官重量也無改變。無可見有害作用水平NOAEL = 300 mg/kg-bw/day (最高實驗劑量)。

（2）1991年根據OECD指南407（嚙齒動物重復-劑量28-天經口毒性）和歐洲方法B.7重復-劑量（28-天）毒性（口服）以及GLP，用標稱劑量0，50，200，1000 mg/kg-bw/day 的FWA 263口服灌胃 Wistar 大鼠（0、1000劑量組雌、雄性各10只；50、200劑量組雌、雄性各5只）每天一次，共計28天，然后給予14天無給藥的恢復期[1]，同時進行對照實驗。

結果顯示：在研究期和恢復期均未觀察到與處理相關的臨床表現。在尸檢前無過早死亡發生。在食物消費量(絕對/相對)和器官重量(相對)方面觀察到的各種統計差異(增加/減少)被認為與毒理學無相關性，因此，沒有任何證據證明FWA 263在任何劑量水平上的毒性，NOAEL=1000mg/kg bw/day (標稱)。

4.9 遺傳毒性

4.9.1 基因突變

（1）1982年根據Green等人的平板滲入方法并按照GLP，使用大腸桿菌E. coli WP2 uvrA測定了FWA 263的潛在基因突變活性。在有和無肝臟微粒體活化（S9-混合物）的情況下，以8種濃度1.58、5、15.8、50、158、500、1580和5000μg/plate對FWA 263進行了3平行實驗，同時進行對照實驗。

結果顯示：在所述細菌誘變性實驗中，在有或無S9-混合物的情況下，未觀察到實驗物質的毒性作用，FWA 263沒有顯示潛在基因突變活性的跡象。

（2）1989年根據OECD 準則 471（細菌回復突變實驗）和GLP，用菌株：S. typhimurium（鼠傷寒沙門氏菌）TA 1535、TA 1537、TA 1538，TA 98和TA 100 在有和無代謝活化作用下，以FWA 263濃度0、40、200、1000、5000 μg/plate進行了實驗。同時進行對照實驗。

結果：鼠傷寒沙門氏菌在有和無代謝活化作用下其遺傳毒性均為陰性。

（3）1991年的一份報告介紹，根據OECD準則471 (細菌回復突變實驗)和GLP，用菌株：TA 1535、TA 1537、TA 1538、TA 98和TA 100在有和無代謝活化系統存在下，FWA 263以濃度實驗.I：10.0、100.0、333.3、1000.0和5000.0 μg/plate和實驗II：100.0、333.3、1000.0、2500.0和5000.0 μg/plate進行細菌體外基因突變研究，同時進行對照實驗。

結果顯示：菌株有和無新陳代謝活化作用下均無遺傳毒性。在所述誘變性實驗期間以及在所報告的實驗條件下，FWA 263并未通過所用菌株基因組中的堿基對變化或移碼來誘導點突變。

（4）1998年根據OECD 準則 471（細菌回復突變實驗）和GLP，用菌株：S. typhimurium TA 1535、TA 1537、TA 98和TA 100和菌株：E. coli WP2 uvr A進行了一項細菌體外基因突變研究。代謝活化系統為苯巴比妥和β-萘酚黃酮誘導的大鼠肝微粒體（S9）。FWA 263濃度為33、100、333、1000、2500和5000 μg/plate。同時進行對照實驗[1]。

結果顯示：鼠傷寒沙門氏菌以及菌株以及大腸桿菌株在有和無新陳代謝活化作用下，其遺傳毒性都為陰性。

4.9.2 染色體畸變

4.9.2.1 體外

（1）1989年根據OECD準則475（哺乳動物骨髓染色體畸變）、OECD準則473 (體外哺乳動物染色體畸變實驗)以及GLP，中國地鼠卵巢細胞（CHO）在有和無代謝活化作用下，使用FWA 263濃度：1000、2000、3000、4000和5000 μg/mL（無代謝活化物）和2000、3000、4000和5000μg/mL（有代謝活化物）進行了體外細胞染色體畸變實驗，同時進行對照實驗[1]。

結果顯示：FWA 263在中國倉鼠卵巢細胞中沒有引起染色體畸變，對中國倉鼠卵巢細胞在有和無新陳代謝活化作用下均無遺傳毒性。

（2）1991年的一份報告顯示，根據OECD準則473和GLP，中國倉鼠肺成纖維細胞（V79）在有和無代謝活化作用下，使用FWA 263濃度：10 μg/mL (18h有和無S-9混合物)；100 μg/ml (18h有和無S-9混合物)；150 μg/mL (7、18和28h 有和無S-9 混合物)進行了哺乳動物細胞的體外細胞遺傳性/染色體畸變研究，同時進行對照實驗。

結果顯示：在實驗條件下，FWA 263在V79中國倉鼠細胞系中沒有引起結構染色體畸變，對中國倉鼠肺成纖維細胞（V79）在有和無新陳代謝活化作用均無遺傳毒性。

（3）1991年的另一項實驗介紹，根據OECD準則473和EU方法B.10 (體外哺乳動物染色體畸變實驗)以及GLP，中國倉鼠肺成纖維細胞（V79）在有和無代謝活化作用下，使用FWA 263濃度：

實驗 I (有和無S9 混合物)

實驗 II (有 S9 混合物)

進行了哺乳動物細胞的體外細胞遺傳性/染色體畸變研究。同時進行對照實驗。

結果顯示：FWA 263在V79中國倉鼠細胞系中沒有引起結構染色體畸變，FWA 263對中國倉鼠肺成纖維細胞（V79）在有和無新陳代謝活化作用下均無遺傳毒性。

4.9.2.2 體內

（1）1977年根據OECD準則478 (遺傳毒性: 嚙齒動物顯性致死實驗)，用NMRI小鼠，FWA 263單一劑量為5000mg/kg bw，50只雄性一次口服灌胃處理，250只雌性未處理。同時進行對照實驗，研究染色體畸變。

結果顯示：沒有動物死亡。雄性動物的繁殖力未受FWA 263影響。無與物質相關的植入后損失，也未發現FWA 263對每個雌性植入率、活植入率和死植入率產生影響。FWA 263不會誘發生殖細胞染色體畸變所致胚胎或胎兒死亡的遺傳毒性。

（2）為了研究FWA 263在小鼠骨髓細胞中的嗜多染紅細胞誘導（引起）微核的潛能，1990年根據OECD 準則474（哺乳動物紅血細胞微核實驗）和GLP，用FWA 263單一劑量5000 mg/kg bw對雌、雄性NMRI小鼠各5只口服灌胃進行了實驗[1]，同時進行對照實驗。施藥后的24h、48h和72h采集骨髓細胞用于微核分析。

結果顯示：施用FWA 263處理后，與陰性對照相比嗜多染紅細胞（PCEs）和正染紅細胞（NCEs）的比值不受影響，這表明無細胞毒性作用。與陰性對照比較，在施用FWA 263后的任何制備間隔，檢測到的微核發生率都沒有明顯的增加。表明FWA 263不能引起（誘導）微核，結果見表5。

（3）1995年根據OECD 準則478和GLP，用50只NMRI雄性小鼠，口服FWA 263劑量2500和5000 mg/kg，同時進行對照實驗，研究了FWA 263的毒性[1]。

結果顯示：雄性小鼠急性經口給藥后沒有癥狀，它們的外觀和身體活動未受影響，表現正常。給藥后的雄性受精率沒有影響，因此FWA 263不會引起植入前損失增加。此外，結果顯示：FWA 263對植入后損失沒有影響，沒有誘導致死性，致突變作用的跡象，遺傳毒性為陰性。

4.10 致癌性

(1) 1979的一份報告介紹，用FWA 263劑量0.5μg/cm2對雌雄性各50只Skh無毛小鼠皮膚2cm×3cm的面積進行致癌性實驗。暴露時間為320天，每周3次（1、3、5），在施用FWA 263 1h后開始紫外光照射。同時進行對照實驗。

表5 小鼠骨髓細胞微核實驗

結果顯示：所有動物的體重變化正常。死亡率在各組間無顯著性差異，所有組均發現紅斑和壞死。皮膚腫瘤各組間無顯著性差異。

結論：紫外線誘導，FWA 263不會引起致癌性。

4.11 生殖毒性

（1）2000年根據美國環境保護署(EPA)的EPA OPPTS 870.3800（繁殖和生育率影響）實驗方法，Crj: CD（SD）大鼠（26只/性別/組）經口灌胃劑量為0、100、300、1000 mg/kg bw/day的FWA 263。雙親（P）代在交配前10周直到安樂死。F1和F2代后代在子宮中和在哺乳期與FWA 263接觸。選擇組成F1親本組的F1后代在交配前（開始于年齡≥28天）暴露于FWA 263≥70天，直到安樂死。暴露頻率為每日一次。同時進行對照實驗[1]。

結果顯示：在雙親大鼠中，唯一與處理相關的影響是雌性大鼠的絕對和相對腎重量的增加。雙親中的雄性在1000 mg/kg bw/day沒有發現與處理相關的影響。在P或F1雙親中沒有發現生育參數受到與處理相關的影響。在F1和F2 后代的發育或成長中沒有發現不良的、與處理相關的改變。

（2）1999-2000年根據OECD準則421（繁殖/發育毒性篩選實驗）和GLP，用Sprague-Oawley大鼠進行了一-代生殖毒性研究。在該項研究中，評估了FWA 263對大鼠的繁殖毒性劑量水平。5組，每組每個性別10只動物經口灌胃，FWA 263劑量水平為0、30、100、300和1000 mg/kg/day。同時進行對照實驗。

暴露持續時間：在交配前給雄性和雌性大鼠施用FWA 263至少28天，雄性繼續給藥直到交配期結束（直到尸檢前一天）。雌性在交配期和妊娠期繼續接受給藥，直到哺乳期的第3天。

結果顯示：成年大鼠在交配前、交配后、懷孕期或哺乳期，所有的親本動物存活到預計的安樂死，而且沒有觀察到與FWA 263相關的臨床發現。

與對照比較，來自于處理組的成年動物在體重、體重增加、或食物消耗沒有觀察到具有統計學意義或與FWA 263相關的變化。在親本動物尸檢時沒有發現異常。施用FWA 263對死亡率沒有影響。

處理組和對照組比較，交配、死亡率和繁殖力指標相似。

雌性生育窩仔和活胎或死胎數量、懷孕期、或懷孕指數沒有與FWA 263相關的變化。在第0天幼崽/窩仔、活胎和死胎和存活到第4天的數量，在對照和處理組之間是相似的。

與對照組相比，沒有觀察到FWA 263對幼崽成長（體重增加）或外部發現相關的影響。

4.12 發育毒性

（1）1998-1999年根據EPA OPPTS 870.3700（產前發育毒性研究)和GLP，用新西蘭白兔和劑量為100、400和 800mg/kg bw的FWA 263，對它的發育毒性包括致畸性進行了評價[1]。給藥持續時間從孕第7天到第28天。每個劑量每組25只雌性，每日給藥一次。雌性兔子按照時間接受交配。同時進行對照實驗。

結果顯示：在800mg/kg/day觀察到死亡，在體重增加和食物消耗的統計學意義上的明顯降低以及流產增加作為過度的母體毒性的證據。因此，該組在研究進行完之前被終止。在400mg/kg/day觀察到較輕的母體毒性。

來自于800 mg/kg/day組的共8只兔子在孕期死亡，并且另一高劑量組母兔在極端情況下被安樂死。研究期間來自于高劑量組的另7只母兔流產。在100或400mg/kg/day組沒有觀察到與處理相關的死亡。

在400mg/kg/day觀察到的與處理相關的臨床發現，包括軟便和變色的糞便。在100或400mg/kg/day沒有觀察到體重、體重增加或食物消耗的變化。

來自于800mg/kg/day組的母兔尸檢結果發現，包括肝變色、胃水腫/或變色、腸子變紅和/或水腫、腸子中血紅的和/或黏液狀的內容物。在尸檢時，在400mg/kg/day組流產的兔子有胃水腫和液體的、血紅色的腸子內容物，也被認為是與處理相關。從800mg/kg/day組處理以前的三窩仔收集的胎兒檢查數據像是在各自的表格中，但是在該報告中沒有被總結、統計分析或討論。在100或400mg/kg/day組沒有觀察到對子宮參數的影響。

黃體、著床、活和死胎以及在吸收數量在載體對照和100和400mg/kg/day組之間是相似的。

當與載體對照組比較時，400mg/kg/day組的胎兒體重在統計學上是較低的。

基于母兔在400mg/kg/day組與處理相關的臨床觀察和時間發現，在該研究中母體影響的無觀察效應水平(NOEL)是100mg/kg/day，是最低的實驗劑量。在400mg/kg/day組胎兒體重有統計學意義上的降低。這些變化可能是從屬于在該研究中觀察到的母體毒性，被認為不是發育毒性的跡象。

胎兒： 胚胎毒性/ 致畸形性影響：無影響。

（2）1999年根據EPA OPPTS 870.3700 (產前發育毒性影響)和GLP，用大鼠和劑量為100、400和1000mg/kg bw的FWA 263，對FWA 263的發育毒性包括致畸性進行了評價。經口給藥持續時間從孕第6天到第19天。每個劑量每組動物數30只雌性。每日給藥一次。同時進行對照實驗。

結果顯示：由于在妊娠第6天至第19天期間大鼠給藥未觀察到對母體或胎兒的不良影響，因此，本研究的結果表明：FWA 263對大鼠無致畸作用。

NOEL（母體毒性）=1000mg/kg bw；

NOEL（發育毒性）=1000mg/kg bw。

4.13 人類致敏實驗

（1）1972年進行了一項由10名志愿者參與的人類重復傷害斑貼實驗[3]，目的是測試FWA 263（工業品，純度100%）對人類皮膚致敏性，給藥路徑是經皮封閉斑貼。每周暴露兩次，共5周，暴露時間為24小時，在周六用相同的濃度在另一應用區域激發。

結果顯示：10名志愿者都不致敏。

（2）1972年8名志愿者用FWA 263商品含量約45%的鈉鹽進行半封閉實驗，暴露期為7天。結果無刺激[3]。

（3）1973年進行了一項由78名男女性志愿者參與的人類重復傷害斑貼實驗[10]。目的是測試FWA 263對人類皮膚致敏性，給藥路徑是經皮封閉斑貼。0.35%洗滌劑混合物水溶液中含有24%的該FWA 263，以及分別含有0.7%和16%的其他熒光增白劑。

結果顯示：所有78名志愿者的結果都是陰性。

5人接觸FWA 263的途徑及其衍生無影響水平

工人和普通人群有可能接觸FWA 263的途徑和其衍生無影響水平（DNEL）[1]見下表6。FWA 263的衍生無影響水平是這樣一種暴露（接觸）水平，人類不應暴露在此水平之上。換句話說，在DNEL以下人類接觸FWA 263是安全的。

由于人們對健康和環保意識的加強，從目前的FWA 263生產和應用情況看，工人和普通人群不可能長期接觸到DNEL這樣高濃度或劑量的FWA 263，因此，人們不必擔心FWA 263會帶來健康危害。

6 FWA 263安全性評價——持久性、生物累積性和毒性評估結論[1]

6.1 持久性或高持久性（即P或vP）的證據及評估

篩選標準基于REACH 的附錄XIII（為確認持久性、生物累積性和毒性物質及高持久性和高生物累積性物質的標準）和在淡水或河口水中的半衰期T1/2≤ 40天[1]。

在標準的生物降解實驗中，該物質既不易也非固有的可生物降解。然而，該物質可直接光解，在自然光下湖泊和河流的透光層中光降解速度快。在晴朗的夏天，在接近于天然水的表面FWA 263的半衰期大約為4～5h。其他過程如生物降解和水解不能使該物質以良好的速度降解。吸附將把FWA 263部分地帶到懸浮顆粒的表面，而且也將有助于物質吸附到沉積物里。因此，認為FWA 263為潛在的持久性物質，結論為持久性而非高持久性物質（即P 而非vP）。

表6 人接觸FWA 263的途徑以及DNEL

6.2 生物累積（B或vB）的證據及評估

由于該物質的辛醇-水分配系數log Kow為-13.14～-1.58，所以，它沒有生物累積潛能。而且實驗測試了FWA 263以及類似的熒光增白劑CAS 16090-02-1在魚體中的生物累積[6]，在暴露水平高達1mg/L的所有魚毒性實驗中，只有微量濃度（小于0.05mg/kg)的FWA 263存在于魚中，在大多數情況下，沒有發現可測量的FWA 263。

又基于篩選標準辛醇-水分配系數log Kow≤4.5為非累積性和非高累積性物質（非B和非 vB）,而該物質的log Kow=-13.14～-1.58，比篩選標準B的閾值低很多。因此，認為FWA 263為非累積性和非高累積性物質（即非B 和非vB）。

另據REACH法規附件XIII中標準BCF≤2000L/kg為非B和非vB。根據該物質的BCF[11]=3.16L/kg wet-wt，認為FWA 263是非B和非vB。

6.3 毒性證據以及評估

標準基于REACH的附錄XIII，非毒性物質（即非-T）基于：對于海洋/淡水有機物（長期毒性）EC10 或 NOEC≥0.01mg/L。FWA 263的NOEC（21d）大型蚤=6.59mg/L，所以FWA 263為非毒性物質（即非-T）。

又根據指令67/548/EEC（危險品分類和標簽），該物質沒有被歸類為致癌物（1或2類）、致突變物（1或2類）或生殖毒物（1、2或3類）。或根據法規EC No1272/2008（物質和混合物分類、標簽和包裝的法規）該物質沒有被分類為致癌物（1A或1B類）、生殖細胞誘變物（1A 或1B類）或生殖毒物（1A、1B或2類）。所以FWA 263既沒有被分類為有環境毒性也沒被分類為致癌、致畸、致生殖毒性物質（即CMR）。

又根據指令67/548/EEC，該物質沒有其他的慢性毒性證據被分類為T、R48或Xn、R48（即T-有毒物質, 或Xn-有害物質、R48-長期接觸有嚴重損害健康的危險）；或根據EC No 1272/2008，該物質沒有其他的證據存在重復暴露之后特殊的靶器官毒性（1或2類）。所以，FWA 263既沒有被分類為有環境毒性也沒被分類為T、R48或 Xn、R48。

由此可見，FWA 263對哺乳動物和水生生物沒有毒性。該物質既不能被分類為環境毒物也不能被分類為CMR（致癌、致畸、致生殖毒性物質）或T（有毒物質）, R48（長期接觸有嚴重損害健康的危險）或Xn（有害物質）。由此可得出結論：FWA 263沒有毒性。

總之，FWA 263不是PBT/vPvB物質。

（全文完）