9種病原體檢測對兒童呼吸道感染的臨床分析意義

(太原市婦幼保健院，山西 太原 030012)

呼吸道感染是目前臨床上較為常見的兒科病癥之一，具有病原復雜化、多樣化的特點[1,2]。目前沒有唯一的判斷依據和標準來鑒別感染類型，病原培養過程較長，不符合對兒童進行快速診治的要求。本研究針對呼吸道感染患兒展開調查研究，為呼吸道感染的研究提供病原學調查依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

從太原市婦幼保健院在2017～2018年收治的確診為呼吸道感染的門診和住院的患兒中，篩選出1 248例患兒作為本次研究的樣本對象。納入標準[3]：年齡在12周歲及以下；入院時發熱達到38℃以上；有呼吸道如咳嗽、咯痰等癥狀；經檢查體內炎性指標增高，胸片可見肺部病變；參與研究的患兒及其家屬對研究內容均知情，且明確表示同意參與。排除標準[4]：排除因結核或其他感染等引起呼吸道癥狀的患兒；排除患兒合并其他嚴重器質性病變或肝腎功能不全者；排除肺部腫瘤或存在呼吸道嚴重合并感染。在參與研究的患兒當中，共有男753例，女495例，平均年齡(7.82±2.56)歲，病程在3～78 d之間，平均(31.57±10.08)d。

1.2 方法

在患兒及其家屬同意參與研究后對其進行血清樣本采集，對收集好的樣本進行妥當保管并定時批量檢驗。患兒的血清樣本采用間接免疫熒光法對其進行檢測，檢測時注意剔除存在血脂過量或其他受到不明污染的血清樣本。將制備并稀釋好的血清滴與含有抗原的載玻片上，同時向載玻片孔內加入陰性陽性質控品，觀察標本中是否出現特異性抗體與抗原結合。當特異抗體與相應抗原結合，則對載玻片使用磷酸緩沖液和蒸餾水進行清洗，以除去實驗中未與抗原結合的IgM。待載玻片干燥后加入熒光素結合物，等待其與樣本充分發生反應后，重復對載玻片使用磷酸緩沖液和蒸餾水的清洗，在進行封閉處理后進行觀察。觀察儀器為日本OLYMPUS倒置熒光顯微鏡IX53，試劑盒采用西班牙VIECELL公司呼吸道感染病原IgM九聯檢試劑盒[國食藥監械(進)字2010第3400365號]。

1.3 觀察方法

載玻片上的9種病原體分型為嗜肺軍團菌血清1型、肺炎支原體、貝納柯克斯體、肺炎衣原體、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒及副流感病毒1、2、3 型。其中，當腺病毒、呼吸合胞病毒、甲型流感病毒和副流感病毒為陽性時，載玻片上的觀測結果為細胞核體及其細胞質呈現綠色熒光；當病毒為陽性時，載玻片上的觀測結果為菌體呈現綠色熒光；細胞外呈現綠色熒光。而當病毒為陰性時，載玻片上的觀測結果無熒光可見；細胞呈紅色。觀察載玻片熒光檢測性狀并記錄病原分布情況。

按照世界衛生組織2018年年齡劃分標準[5]將研究對象劃分為嬰兒組(出生后28 d～1周歲之間)，幼兒組(1～3歲之間)，學齡前兒童組(4～6歲之間)，學齡兒童(7～12歲之間)。觀察不同年齡段之間的病原陽性檢出率情；同時根據患兒感染時間，將樣本按照春季(3～5月)、夏季(6～8月)、秋季(9～11月)、冬季(12月～次年2月)進行劃分，觀察不同季節間的病原陽性檢出率。

1.4 統計學方法

采用SPSS 18.00對采集到的數據進行分析，計數資料用%表示，使用χ2檢驗，當P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 呼吸道病原體檢測概況

在1 248例患兒中有363例患兒為9種呼吸道病原體陽性，陽性檢出率為29.09%。其中753例男性患兒中檢出221例患兒為陽性，檢出率為29.34%，在495例女性患兒中檢出142例患兒為陽性，檢出率為28.69%，兩個性別的陽性檢出率差異無統計學意義(χ2=0.06，P=0.80)。在363例檢測為陽性的患兒當中，檢出單種病原感染的患兒為269例，檢出兩種及以上病原感染的患兒為94例。

2.2 陽性患兒中的病原體分布概況(見表1)

2.3 不同年齡患兒之間的陽性檢出率比較(見表2)

2.4 不同季節之間患兒的陽性檢出率比較(見表3)

表1 陽性患兒中的病原體分布情況[n(%)]

表2 不同年齡患兒之間的陽性檢出率比較[n(%)]

表3 不同季節之間患兒的陽性檢出率比較[n(%)]

3 討論

臨床上根據感染位置的不同將呼吸道感染分為上呼吸道感染與下呼吸道感染，隨著細菌敏感型抗生素的推廣和使用，由細菌類典型病原體引起的呼吸道感染得到了有效的控制[6]。而目前臨床上所常見的呼吸道感染多由非典型性病原體引起，由于此類病癥在感染早期難以通過明顯癥狀或指標判斷病原類型，無法針對其類型采取抗菌或抗病毒治療，從而極易引發用藥不當或治療不及時等問題的出現[7]。因此對呼吸道感染開展病原學研究和流行病學調查，對此類疾病的防治工作開展有著較為重要的意義。

本研究采用IgM抗體檢測法，在1 248例患兒當中檢出363例患兒為9種呼吸道病原體陽性，總陽性檢出率為29.09%；而363例病原體陽性的患兒當中，肺炎支原體檢出陽性的患兒比例為最高30.03%，與王芳等[8]研究結果相比較低；其次則是乙型流感病毒7.63%，與王麗等[9]研究結果相比較為一致。此種差異主要源于呼吸道感染的流行特征受到地域、當地醫療水平、年份等因素的影響，故在不同地區、不同時間的研究結果也可能存在一定差異，對于本研究的未檢出陽性病例，可能與患兒體內的抗體水平和其他無法覆蓋的病原體類型有關，此點與國內外一些研究的結果較為一致[10]。

從四個年齡段的病原學檢查情況來看，嬰兒組的肺炎支原體陽性比例最高為38.28%，其次是乙型流感病毒為23.26%，在總檢出情況上嬰兒的陽性例數也較其他年齡段更高，這提示由于剛剛渡過新生兒時期的嬰兒其身體抵抗力較其他年齡段更弱，且其器官功能發育未完全，此時間段內任何感染源都易引起呼吸道感染，因此該群體擁有更高的發病率。其次，研究結果中還表明，學齡兒童組中的陽性檢出例數也較高，肺炎支原體陽性檢出比例21.88%也較高，其原因可能與學齡兒童常常處于學校等人員較為密集且活動集中的地點有關，因此對學校開展一定的衛生宣講教育在呼吸道感染的防治上具有重要意義。從不同季節的病原學檢查情況來看，呼吸道感染在不同季節表現出了明顯的差異，從陽性檢出例數來看，春季和冬季的陽性檢出例數最高，且肺炎支原體、乙型流感病毒、嗜肺軍團菌血清1型三種病原體在冬季的陽性檢出率較其他季節更高。以上結果表現，冬季由于氣溫較低，空氣流動較弱，人群也極易長時間處在密閉的空間內，使得呼吸道疾病極易在室內傳播，同時由于多數城市冬季與春季間交替不明顯，因此在春季時呼吸道感染的病原檢出率也較夏季和秋季更高。

綜上所述，目前臨床上兒科呼吸道感染的病原體以肺炎支原體、乙型流感病毒和嗜肺軍團菌為主，同時伴有其他多種非典型病原合并感染，因此在治療前對患兒進行較為全面的病原學檢查，對于治療非典型病原感染引起的的呼吸道疾病有著重要意義。