李潔
(夏邑縣人民醫院 感染內科,河南 商丘 476400)
乙型肝炎在全世界范圍內發病率較高,有研究顯示每年因乙型肝炎病毒而出現終末期肝硬化和肝癌的患者所占比例為15%~25%,因此需盡早診斷乙型肝炎病毒感染,實施相應的治療干預[1]。乙型肝炎病毒血清標志物檢測和HBV DNA檢測屬于目前檢測乙型肝炎病毒的主要方法[2]。本研究應用化學發光微粒子免疫測定法和熒光定量聚合酶鏈反應測量乙型肝炎患者機體血清HBeAg、HBsAg、HBeAb、HBcAb及HBV DNA水平,并檢測HBcAb IgM陽性患者血清HBV-DNA水平,探討乙型肝炎血清標志物與HBV DNA水平的相關性。
1.1 一般資料選取2018年1月至2019年1月夏邑縣人民醫院收治的250例乙型肝炎患者,其中男176例,女74例,年齡13~69歲,平均(42.6±5.8)歲,慢性乙型肝炎患者223例,HBcAb IgM陽性乙肝患者27例。確診為乙型肝炎,排除嚴重肝腎疾病及腫瘤疾病患者。患者自愿參與本研究并簽署知情同意書。本研究經夏邑縣人民醫院醫學倫理委員會審批通過。
1.2 檢測方法首先測量患者HBV M水平,所用測量儀器為荷蘭Philips公司生產的HKDHG5500型自動化學發光儀,定期檢測HBV M水平,所應用的檢測試劑為儀器配套試劑。各項指標陽性判定標準為:HBsAg在50 IU·L-1及以上;HBeAg在1 S/CO及以上;HBcAb在1 S/CO及以上;HBsAb在10 IU·L-1及以上;HBeAb在1 S/CO及以下;HBcAb IgM在1 S/CO及以上。在檢測HBsAg時,采用試劑盒稀釋液進行500倍稀釋后進行檢測。然后開展HBV DNA定量檢測,HBV DNA水平檢測方法為FQ-PCR法,試劑盒購自上海斯諾科基因有限責任公司,儀器為美國GE公司生產的6300T RCR System。對參數做如下設置。93 ℃,2 min;93 ℃,45 s;55 ℃,1 min。10個循環。93 ℃,30 s;55 ℃,45 s。30個循環。在完成反應過程后,在Analysis菜單下,選擇Analyze,使儀器自動對結果進行分析,按照儀器和試劑盒說明書開展詳細操作。
1.3 統計學方法采用SPSS 17.0統計軟件進行數據處理,乙型肝炎患者HBV M水平和HBV DNA水平、HBcAb IgM和HBV DNA水平采用Pearson相關性分析,P<0.05為差異有統計學意義。
2.1 慢性乙型肝炎患者HBV M水平和HBV DNA水平相關性分析HBeAg陰性慢性乙型肝炎患者血清中HBsAg、HBeAg水平均與HBV DNA水平呈正相關(r1=0.541,r2=0.599,均P<0.05);HBcAb、HBeAb水平均與HBV DNA水平無關(r1=0.060,r2=0.114,均P>0.05)。
2.2 乙肝患者HBcAb IgM和HBV DNA水平相關性分析HBcAb IgM陽性患者HBcAb IgM水平和HBV DNA水平無關(r=0.171,P=0.217)。
HBV DNA水平可直接體現乙型肝炎病毒復制程度,其在乙型肝炎病情的早期診斷和療效觀察中發揮重要作用。本研究通過對單項HBV M水平和HBV DNA水平進行相關性分析后發現,HBeAg陰性慢性乙型肝炎患者血清中,HBsAg、HBeAg水平均與HBV-DNA水平呈正相關,這也和曹東華等[3]研究報道相符。HBsAg雖然屬于乙型肝炎病毒感染的標志物,但該標志物檢測結果為陰性時,并無法排除乙型肝炎病毒感染。不同于HBsAg,HBeAg在HBsAg陽性患者機體血清中存在,若患者機體血清HBeAg結果為陽性,則提示其機體內乙型肝炎病毒復制和傳染性均較強,是體現乙型肝炎病毒復制的重要血清標志物。HBeAg、HBV DNA水平盡管都能有效反映乙型肝炎病毒在機體內復制的活躍度,但在不同的乙型肝炎病毒基因型中其水平或許存在一定差異。
本研究結果顯示,HBcAb、HBeAb水平均與HBV DNA水平無關,但該結果無法說明HBcAb、HBeAb水平與HBV DNA的水平無明顯關聯。HBeAg病毒可能被免疫清除或病毒處于靜息狀態,但仍可復制。HBcAg來自于C基因區的第2個ATG翻譯,并且和HBeAg存在著大量相同的氨基酸[4]。HBcAg檢測難度大,可檢測相應抗體的HBcAb,其屬于人體感染乙型肝炎病毒后出現速度最快的抗體。本研究結果中HBcAb IgM陽性患者HBcAb IgM水平和HBV DNA水平無關,可能是研究對象中的HBcAb IgM陽性數量少,同時早期階段HBV DNA并不會出現較高水平的復制[5]。
綜上所述,慢性乙型肝炎患者機體血清HBeAg、HBsAg水平均與HBV DNA水平呈正相關,通過對HBV M和HBV DNA水平進行定量檢測,可有效監測HBV的動態變化,從而為臨床疾病診斷和治療提供參考。