癲癇患者磷酸肌酸激酶同工酶亞型的鑒別及臨床意義

郝蘇怡 張旭 汪昕(通信作者)

223001淮安市第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇淮安

癲癇是由于不同原因引起腦部神經(jīng)元高度同步化及陣發(fā)性異常放電而導(dǎo)致的中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能失調(diào)的一組慢性腦部疾病。據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，癲癇在我國(guó)發(fā)病率為0.5%[1]。筆者研究發(fā)現(xiàn)，在癲癇患者發(fā)作時(shí)及治療過(guò)程中，患者會(huì)出現(xiàn)血液指標(biāo)水平變化。張亞?wèn)|等[2]關(guān)于癲癇患者血清肌酸肌酶變化的報(bào)道，提示癲癇患者發(fā)作時(shí)可發(fā)生血清部分肌酸肌酶濃度水平的變化，而且不同發(fā)作類型癲癇患者血清肌酸激酶水平變化也有不同程度差異。我們?cè)趯?shí)際工作中經(jīng)常發(fā)現(xiàn)癲癇患者血清磷酸肌酸激酶及其同工酶有不同程度增高，通過(guò)對(duì)同工酶亞型的分析，可對(duì)癲癇患者診斷、治療及預(yù)后有一定幫助。目前，癲癇患者心肌酶譜檢查主要包括血清乳酸脫氫酶、羥丁酸脫氫酶、肌酸激酶及磷酸肌酸激酶同工酶MB 等，磷酸肌酸激酶同工酶MB 采用免疫抑制法檢測(cè)其活性，所以在臨床應(yīng)用時(shí)有一定局限性。肌酸激酶是由M、B亞基組成的二聚體，它有三種同工酶，即CK-MM、CK-MB、CK-BB，主要存在于人體的骨骼肌、心肌、大腦等組織，通常情況下，CK-MM主要存在于骨骼肌和心肌組織中，CK-BB 主要存在于腦組織中，心肌組織以CK-MB 為主。楊志榮等[3]2017年報(bào)道了癲癇發(fā)作誘發(fā)Takotsubo心肌病1例，患者心肌酶CK值為4 533.6 U/L，CK-MB 為124.2 U/L，但是未對(duì)CK-BB、CK-MM進(jìn)行檢測(cè)。如果以CK-BB 升高為主，則可確定癲癇發(fā)作存在大腦損傷。對(duì)臨床已經(jīng)診斷為癲癇的患者心肌酶升高以及同工酶亞型進(jìn)行鑒別，進(jìn)一步了解心肌酶升高的可能來(lái)源，能夠幫助臨床更全面的了解患者病情，從而提供更科學(xué)合理的治療方案，進(jìn)一步提高臨床的診療質(zhì)量。

資料與方法

收治癲癇患者9例，收集血液標(biāo)本，離心后取上層血清進(jìn)行常規(guī)生化檢查，對(duì)心肌酶升高患者標(biāo)本放置-86℃低溫冰箱保存后集中電泳。同時(shí)隨機(jī)選取21例健康人作為對(duì)照組。

方法：①肌酸激酶及同工酶MB活性測(cè)定：采用速率法，生化分析儀相應(yīng)分析參數(shù)設(shè)置按照肌酸激酶(CK)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)測(cè)定試劑盒說(shuō)明書和貝克曼5811 全自動(dòng)生化分析儀的說(shuō)明書進(jìn)行設(shè)置，用朗道的復(fù)合校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)，每批次均用朗道的未定值質(zhì)量控制血清進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控。②磷酸肌酸激酶同工酶電泳：由HYDRAGEL瓊脂糖凝膠電泳自動(dòng)化操作完成。

結(jié) 果

9例癲癇患者臨床資料及生化結(jié)果：見表1。

9例癲癇患者肌酸激酶同工酶電泳結(jié)果：9例癲癇患者中7例為電泳陰性，2例為電泳出巨CK1，健康對(duì)照組同工酶電泳結(jié)果為陰性。見表2。

表1 9例癲癇患者臨床資料及生化結(jié)果(U/L)

討 論

癲癇是目前神經(jīng)內(nèi)科比較常見疾病之一，它以大腦神經(jīng)元過(guò)度異常放電導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能失常為特征，具有反復(fù)性、發(fā)作性和短暫性，嚴(yán)重威脅患者身心健康。因此癲癇臨床確診和疾病發(fā)作類型的準(zhǔn)確診斷是醫(yī)師正確治療、臨床合理用藥及患者預(yù)后判斷的先決條件。臨床上有一部分癲癇患者腦電圖檢查正常，但強(qiáng)烈的肌肉運(yùn)動(dòng)會(huì)導(dǎo)致血清CK增高，因?yàn)楣趋兰≈性撁傅暮渴切募〉?倍。研究表明，凡1周內(nèi)有過(guò)癲癇發(fā)作史者，無(wú)論其入院后是否發(fā)作，腦電圖是否有異常，均有血CK的升高?？赡苁羌∪獐d攣時(shí)，骨骼肌運(yùn)動(dòng)負(fù)荷增大所致，也有可能與癲癇發(fā)作時(shí)交感神經(jīng)異?？哼M(jìn)或低氧血癥有關(guān)。根據(jù)血CK值的增高，結(jié)合相關(guān)病史，可診斷近期曾有癲癇發(fā)作。由于癲癇是大腦異常放電而導(dǎo)致的腦部疾病，發(fā)作會(huì)對(duì)大腦造成一定損傷，張亞?wèn)|等[2]報(bào)道癲癇患者強(qiáng)直陣攣發(fā)作與自動(dòng)癥發(fā)作肌酶變化分析，提示癲癇發(fā)作心肌酶升高，但是文章中并無(wú)說(shuō)明酶的來(lái)源，作者推測(cè)可能作為腦損傷標(biāo)志之一。Nass等[4]研究認(rèn)為，癲癇發(fā)作后磷酸肌酸水平升高是臨床常見情況。目前其他文獻(xiàn)報(bào)道少見對(duì)癲癇患者肌酸激酶同工酶各種亞型的分析。

本研究電泳結(jié)果顯示，9例CK 值升高的癲癇患者中，有7例CK 電泳結(jié)果為CK-MM，CK-MM＞97%，CK-MB＜3%。9例患者均為未電泳出CK-BB，電泳結(jié)果均在正常范圍。2例癲癇患者電泳結(jié)果有巨CK1，比例分別為1.3%和1.1%。因此可見，研究對(duì)象所見肌酸激酶升高的癲癇患者CK 亞型以CK-MM 為主，CK-MB＜3%。磷酸肌酸激酶在人體各組織器官分布情況為CK-MM主要存在于骨骼肌和心肌，以骨骼肌為主，根據(jù)結(jié)果可以判斷酶的來(lái)源為骨骼肌和心肌。通常骨骼肌中98%磷酸肌酸激酶組分為CK-MM 亞型，而2%為CK-MB，心肌中70%～80%為CK-MM，20%～30%為CK-MB。CK-BB 主要存在于腦組織中。9例患者均未檢測(cè)出CK-BB。所以，9例癲癇患者CK 升高可能以骨骼肌為主。因此筆者認(rèn)為在癲癇發(fā)病期，特別是自動(dòng)癥、過(guò)度運(yùn)動(dòng)發(fā)作、肌陣攣發(fā)作、癲癇性痙攣、強(qiáng)直性發(fā)作等情況下，肌肉受損，細(xì)胞內(nèi)CK合成增多，釋放到外周血，而且這一過(guò)程以骨骼肌釋放的肌酸激酶為主，多數(shù)與心肌損傷和腦損傷無(wú)關(guān)。

表2 9例癲癇患者同工酶電泳結(jié)果(%)

本文另一個(gè)發(fā)現(xiàn)是在9例癲癇患者中，發(fā)現(xiàn)2例巨CK1，健康對(duì)照組沒(méi)有發(fā)現(xiàn)巨CK1。Delanghe 等[5]流行病學(xué)調(diào)查研究顯示，健康人群CK1 的檢出率為4.3%。由于本研究樣本量較小，尚不能解釋巨CK1 的檢出與癲癇患者年齡、性別及臨床發(fā)作類型有明顯關(guān)系。巨CK1是一種CK 同工酶(抗原)與患者自身抗體的復(fù)合物，最常見的是血清CK-BB 與血清IGG 或血清IGA 的復(fù)合物，也有少數(shù)為CK-MM與IGG或IGA的復(fù)合物。血清CK值升高與血清免疫球蛋白一起出現(xiàn)變化可能是導(dǎo)致巨CK1 檢出率升高的原因之一。說(shuō)明癲癇患者免疫系統(tǒng)可能存在改變。巨CK2 通常存在于組織的線粒體膜上，當(dāng)線粒體崩解時(shí)，線粒體膜上小碎片進(jìn)入血液。桂曉美等[6]研究結(jié)果顯示，血清巨CK1 的檢出在臨床上是良性現(xiàn)象，通常與肌炎、心血管疾病等有關(guān)，而巨CK2與惡性腫瘤密切相關(guān)。

綜上所述，在本研究中，癲癇患者肌酸激酶及其同工酶升高，其同工酶電泳結(jié)果顯示其亞型主要為CK-MM，因此可認(rèn)為肌酸激酶及其同工酶的升高主要來(lái)自于骨骼肌，大多數(shù)與癲癇患者心肌損傷及腦損傷不相關(guān)，9例癲癇患者并未檢出CK-BB 亞型。巨CK1 的檢出可能與癲癇患者疾病特點(diǎn)相關(guān)，可能與患者骨骼肌過(guò)度活動(dòng)及患者免疫變化有關(guān)。臨床上對(duì)癲癇患者進(jìn)行肌酸激酶同工酶電泳來(lái)鑒別患者血清中磷酸肌酸激酶及其同工酶的亞型，有助于了解導(dǎo)致血清酶升高的來(lái)源，有利于臨床對(duì)癲癇患者診斷與治療。