Foxa2與老年胃息肉惡性進展的相關性

陳微微 代敏濤 吳旭 聶軍

(遵義醫科大學第三附屬醫院(遵義市第一人民醫院)消化內科，貴州 遵義 563000)

胃息肉常好發于胃竇部及胃體，是生長在胃黏膜表面并向胃腔凸起的組織，常表現為局部胃黏膜結節樣、顆粒樣凸起，表面光滑、界限清楚，直徑常<2 cm，胃息肉的臨床表現缺乏特異性，單純的胃部息肉常無明顯的臨床表現，當機體合并其他消化道疾病，表現為腹部飽脹感、慢性反流、腹部疼痛及消化不良等癥狀，常在胃鏡檢查時發現。根據胃息肉的組織病理學特征將其分為增生性息肉、腺瘤性息肉、炎性息肉、胃底性息肉，胃息肉被認為是癌前病變的征象，特別是直徑>2 cm的胃腺瘤性息肉〔1，2〕。胃癌是臨床嚴重的惡性腫瘤之一，治療預后較差，嚴重威脅生命安全，我國是胃癌高發國家，發病率與死亡率約占世界總發病與總死亡率的50%，疾病負擔相對較重，是癌癥防治重點〔3〕。研究表明，胃息肉和腫瘤抑制基因與癌基因的突變有關，基因突變導致腫瘤進展加快，臨床針對直徑>0.5 cm的胃息肉為防止癌變的可能，應行胃鏡下切除、活檢，并行幽門螺桿菌(HP)根除治療，對胃息肉惡性進展的早期進行預防、治療具有重要意義〔4，5〕。叉頭框蛋白(Fox)a2為鼠疫DNA結合蛋白，其在個體胚胎發育的多個環節發揮重要作用，相關研究表明，Foxa2在諸多腫瘤中，如乳腺癌、肝細胞癌中均呈現低表達〔6，7〕。本研究旨在探討Foxa2在老年胃息肉患者機體中的表達，并分析其與老年胃息肉惡性進展的相關性。

1 資料與方法

1.1納入對象 本研究嚴格遵循本院醫學倫理委員會相關標準，選取遵義市第一人民醫院2015年10月至2018年9月內鏡中心胃鏡檢查患者，根據計算機隨機抽取65例胃部息肉患者，隨機抽取同時期我院胃腸外科胃癌手術標本35例，根據鏡檢病灶組織的病理類型進行分組，將炎性或增生性胃息肉患者65例納入觀察1組，將進展期胃癌患者35例納入觀察2組。觀察1組男43例，女22例；年齡60～80歲，平均(70.85±5.32)歲。觀察2組男23例，女性12例；年齡60～80歲，平均(70.76±5.27)歲。選擇該時期內體檢健康者45例為對照組，其中男28例，女17例；年齡60～80歲，平均(71.52±6.89)歲。納入標準：①胃鏡檢查明確胃部息肉存在；②臨床資料完整；③入組受試者均簽訂知情同意書。排除標準：①伴心、腦、腎等重要臟器功能受損者；②凝血功能異常者；③伴其他部位惡性腫瘤者。3組一般資料差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2Foxa2檢測方法 采用免疫組織化學染色檢測胃息肉組織中Foxa2表達情況，方法選用標準生物素-鏈霉卵白素-過氧化氫酶法進行組織染色，取石蠟4 μm進行切片、脫蠟、水化，采用pH為6.0的0.01 mol/L檸檬酸鹽緩沖液對其進行熱修復抗原，在室溫下冷卻15～20 min，3 ml/L Triton-X 100處理30 min，30 ml/L過氧化氫-甲醇封閉內源性過氧化物酶活性，切片經兔抗人Foxa2抗體與小鼠抗人E-鈣黏蛋白(cadherin)抗體在4℃條件下孵育12 h，沖洗之后，加入生物素標記的山羊抗小鼠二抗工作液，再次在室溫下孵育0.5 h；加入鏈霉卵白素工作液，在室溫下孵育0.5 h；加入二氨基聯苯胺(DBA)顯色，然后使用蘇木精輕度復染、脫水、封片。

1.3陽性表達判定 磷酸鹽緩沖液(PBS)代表一抗視為陰性對照，利用染色強度與陽性細胞的占比率聯合判定：染色強度主要采用0～3分4個等級：0分為陰性；1分為弱陽性；2分為中度陽性；3分為強陽性；陽性細胞百分比分級標準：0分為陽性細胞≤5%；1分為6%～25%；2分為26%～50%；3分為51%～75%；4分為>75%。Foxa2陽性表達：染色強度×陽性細胞占比≥2分。

1.4統計學方法 應用SPSS20.0統計學軟件進行單因素方差分析、χ2檢驗、雙變量Spearman相關性檢驗。

2 結 果

2.13組Foxa2表達 對照組、觀察1組、觀察2組Foxa2表達分別為(3.58±1.28)、(33.11±8.01)、(96.32±0.91)，3組差異有統計學意義(F=2 931.831，P<0.001)。

2.23組Foxa2陽性率比較 觀察2組Foxa2陽性率〔35例(100%)〕>觀察1組〔30例(46.15%)〕>對照組〔2例(4.44%)〕，差異有統計學意義(P<0.05)。

2.3老年胃息肉惡性進展與Foxa2的相關性 Foxa2表達與老年胃息肉患者惡性進展呈正相關(r=0.538，P<0.001)。

3 討 論

近年來，全球胃癌發病率呈逐年下降趨勢，但盡管如此，我國胃癌的發病率仍處于較高水平，因此未來相當一段時間內，胃癌仍是我國腫瘤防控的重要公共衛生問題之一〔8〕。因胃癌屬于慢性疾病，起病隱匿，疾病進展漫長復雜，患者偶可伴有消化道類似癥狀外，諸多胃癌患者無明顯癥狀，發現時已處于疾病晚期，錯過治療的最佳時期〔9，10〕。因此，早發現、早診斷、早治療對確定患者治療方案及改善預后具有重要意義。

胃息肉是胃黏膜的良性凸起，主要是由間質細胞、上皮細胞及其他膠原成分組成，諸多患者常伴隨非特異性臨床癥狀，如腹脹、腹痛等，常包括胃底腺息肉、增生性息肉、炎性息肉等病理類型〔11〕。針對臨床檢查發現的胃鏡下息肉是否需要切除應根據胃息肉是否發生癌變決定，了解胃息肉的發生機制及與癌變的關系，探尋臨床可用于篩選胃息肉癌變風險的預測指標，對降低臨床胃息肉癌變的概率具有重要意義〔12，13〕。本研究結果顯示，Foxa2表達與老年胃息肉患者惡性進展呈正相關。分析其原因為，臨床常見的用于評估胃癌的發生風險與預后的指標主要有血管內皮生長因子、胃干細胞與胃癌干細胞等，其主要為非特異性的廣譜分子標志，與細胞的增殖密切相關，其中血管內生長因子主要反映腫瘤中小血管生成情況，據相關研究證實，Hedgehog及Wnt信號通路在胃腸道息肉發生過程中發揮重要作用，Foxa2又稱為肝細胞核因子3β，作為一種DNA結合蛋白，在個體胚胎發育過程的諸多環節中發揮重要作用〔14～16〕。趙金磊等〔17〕研究指出，Foxa2在肝癌、肺腺癌、乳腺癌等諸多惡性腫瘤的組織中表達缺失，可發揮抑癌基因的功能，其研究結果顯示，胰腺癌組織中Foxa2蛋白陽性呈現低表達，其陽性表達率較癌旁組織低，可發揮抑癌基因的功能，與胰腺癌細胞增殖、遷移與侵襲發生密切相關。王立斌等〔18〕研究指出，在肝細胞癌組織和細胞中Foxa2呈現低表達，可使HepG2細胞體外增殖與裸鼠體內瘤體生長受到顯著抑制。Foxa2亞族蛋白對胃腸道內內分泌細胞與杯狀細胞的發育具有重要意義。Foxa2表達與胃息肉惡性進展的關系：正常胃黏膜中Foxa2僅少量存在腺體細胞中。

本研究仍具有不足之處：納入的樣本數量較少，且屬于單中心研究，上述因素均會導致本研究結果具有一定偏倚，因此希望在未來能夠就此展開多樣本、多中心的研究，對本研究結果加以證實，提高數據的真實性。

綜上，Foxa2表達與老年胃息肉惡性進展呈正相關，臨床可將Foxa2作為老年胃部息肉惡性進展的預測診斷指標。