動脈粥樣硬化患者高同型半胱氨酸血癥與膽固醇逆向轉運的關系

趙 佳，左 林，姜小建，姚創利，朱建偉

（1.西安市中心醫院檢驗科，西安 710003；2.空軍軍醫大學唐都醫院放射科，西安 710038）

動脈粥樣硬化（atherosclerosis, AS）是老年人的常見病、高發病，是導致心腦血管疾病的病理基礎。近年來，隨著生活水平的提高和飲食結構的改變，AS發病率逐年上升，且呈現年輕化趨勢。高同型半胱氨酸（high homocysteine, HHcy）被認為是動脈粥樣硬化性心腦血管疾病的一個獨立危險因素[1]。但是HHcy如何通過參與血脂代謝介導AS形成的具體機制尚不十分清楚。本研究通過探討AS患者同型半胱氨酸（homocysteine, Hcy）與血脂和卵磷脂膽固醇酰基轉移酶（lecithin cholesterol acyl transferase, LCAT）的關系，分析HHcy對膽固醇逆向轉運（reverse cholesterol transport, RCT）的影響。

1 材料與方法

1.1 研究對象 本研究選取2018年9月～2019年6月在西安市中心醫院神經內科行頸部多普勒超聲診斷有頸動脈粥樣硬化斑塊的185例患者作為研究對象。所有研究對象均排除高血壓、冠心病、嚴重肝腎功能不全、感染、惡性腫瘤、吸煙、目前或近期服用藥物（包括B族維生素類和降血脂類藥物）。根據患者是否存在HHcy（即空腹血漿Hcy＞15 μmol/L），將所有研究對象分為HHcy組和對照組。本研究所有患者均知情同意。

1.2 試劑和儀器 Hcy測定試劑盒購自北京九強生物技術股份有限公司；總膽固醇（total cholesterol, TC）、三酰甘油（Triglyceride, TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol, HDLC）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol, LDL-C）、載脂蛋白AⅠ （apolipoprotein AⅠ，ApoAⅠ）和載脂蛋白B（apolipoprotein B, ApoB）測定試劑盒購自北京利德曼生化股份有限公司；LCAT試劑盒購自上海飛軒生物科技有限公司。血清Hcy，TC，TG，HDL-C，LDL-C，ApoAⅠ和ApoB水平測定應用HITACHI 7600全自動生化分析儀；血清LCAT濃度測定應用匯松MB-580多功能酶標分析儀。

1.3 方法 統計HHcy組和對照組的性別、年齡和體重指數（body mass index, BMI），其中BMI=體重(kg)/身高(m)2。采集HHcy組和對照組的空腹靜脈血4ml于促凝管中，離心分離血清，于-80℃保存備用。Hcy水平測定采用循環酶法；TC，TG，HDL-C和LDL-C水平測定采用終點法；ApoAⅠ和ApoB水平測定采用免疫比濁法；LCAT濃度測定采用ELISA法，在450nm波長處測定各孔的A值，計算LCAT濃度。嚴格按照試劑說明書進行操作。

1.4 統計學分析 應用SPSS 20.0軟件進行統計學分析，所有數據均采用均值±標準差（±s ）的形式表示。計量資料兩組數據間的比較采用獨立樣本t檢驗，計數資料兩組數據間的比較采用χ2檢驗，兩變量相關性分析采用Pearson相關分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 HHcy組和對照組一般臨床資料和相關指標的比較 見表1。HHcy組HDL-C，ApoAⅠ水平和LACT濃度顯著低于對照組，差異均具有統計學意義（t=2.318，2.405，2.484，均P＜0.05）；HHcy組Hcy水平顯著高于對照組，差異具有統計學意義（t=11.266，P＜0.001）。另外，HHcy組年齡，性別，BMI，TC，TG，LDL-C和ApoB水平與對照組比較，差異均無統計學意義（t=0.006～1.709，均P＞0.05）。

表1 HHcy組和對照組一般臨床資料和相關指標的比較

2.2 Hcy水平與血脂水平的相關性分析 相關性分析顯示，Hcy水平與HDL-C和ApoAⅠ水平均呈負相關（r =-0.197，P =0.008；r =-0.212，P =0.006；均P＜0.01）。Hcy水平與TC，TG，LDL-C和ApoB水平均無顯著相關性（r =0.071，P=0.204；r =0.068，P=0.219；r =0.085，P = 0.161；r =0.108，P =0.112）。

2.3 Hcy水平與LCAT濃度的相關性分析 相關性分析顯示，HCY水平與LCAT濃度呈負相關（r =- 0.221，P = 0.005）。

3 討論

AS是一種與脂質代謝障礙有關的全身性疾病，可累及全身動脈血管。AS可由多種機制介導，致使血液中的脂質沉積于血管壁，形成粥樣斑塊，造成血管腔狹窄，甚至完全閉塞，導致組織器官供血障礙；有些不穩定斑塊容易發生破裂、脫落，形成栓子，隨血流阻塞遠端血管，導致栓塞發生。

高密度脂蛋白（High density lipoprotein,HDL）可通過RCT途徑將外周組織中的膽固醇運送回肝臟重新代謝，因此HDL具有抗AS的作用，低HDL血癥被認為是AS的重要危險因素[2]。RCT過程十分復雜，由許多脂蛋白和酶參與，HDL是RCT過程中的關鍵介質，而其它脂蛋白主要參與脂質的傳遞。RCT過程主要包括膽固醇流出、酯化、轉移和攝取等，具體機制如下[3]：HDL由肝臟和小腸分泌后，在血液中LCAT的催化下，已結合ApoAⅠ的新生HDL表面卵磷脂上的酰基轉移到游離膽固醇上，生成膽固醇酯（cholesterol ester, CE），生成的CE不斷進入HDL顆粒內部，形成成熟的大球形HDL。HDL中的CE在膽固醇酯轉移蛋白（cholesterol ester transfer protein, CETP）的作用下，轉移給其它脂蛋白。HDL中剩余的CE被肝臟攝取，經肝臟代謝后由膽汁排出體外。在RCT過程中，LCAT是重要的關鍵酶；ApoA I是HDL的主要載脂蛋白，對維持HDL結構和功能起到重要作用，也是LCAT的激活劑[4-5]。

Hcy是一種含硫的非蛋白氨基酸，也是蛋氨酸代謝過程中的重要中間產物。許多研究表明，HHcy可通過多種機制如介導脂質代謝紊亂、氧化應激和免疫炎癥等促進AS的形成和發展[6-8]。本課題組前期研究結果顯示，HHcy可能通過影響脂質代謝和介導氧化應激促進冠心病的發展[9]。本研究進一步探討HHcy影響脂質代謝的機制，HHcy是否可能通過抑制RCT導致AS的進展。本研究結果顯示，HHcy組HDL-C，ApoAⅠ水平和LACT濃度顯著低于對照組，AS患者Hcy水平與HDL-C，ApoAⅠ水平和LCAT濃度均呈負相關。提示HHcy可能通過降低ApoAⅠ，HDL和LCAT水平，影響它們在RCT中的作用，導致AS的形成和發展。有文獻報道，ApoAⅠ或LCAT突變失活會抑制HDL的生物合成和成熟[10]。ApoAⅠ水平減少會降低LCAT活性，影響HDL成熟[11]。HHcy影響HDL抗AS功能的機制可能有[12]：①降低ApoAⅠ水平；②降低LCAT活性；③抑制HDL成熟；④HDL合成相關基因的表觀遺傳改變。由此可見，HHcy可以通過多種途徑降低HDL功能，抑制RCT過程，促進AS進展。但是HHcy如何影響Apo AⅠ，LCAT和HDL功能的具體機制還有待進一步研究。