CA125，HE4和MMP7聯合檢測在I型和II型上皮性卵巢癌患者診斷中的價值

付妮娜，范婧暉，鐘 慧

（1.寶雞市婦幼保健院檢驗科，陜西寶雞 721000；2.陜西省核工業二一五醫院婦科，陜西咸陽 712000）

卵巢癌是女性群體中第二大高發癌癥，其死亡率位居婦科惡性腫瘤的首位。據統計數據分析，每年我國約有5.2萬人死于卵巢癌，占全球總死亡人數的42%。卵巢癌因發病隱匿，缺乏明顯癥狀和有效診斷指標等，因此約有70%的病人在就診時已屬晚期，5年生存率僅為25%～30%[1-2]。卵巢癌病人預后差、易復發、生存年限低，因此研究卵巢癌有效的臨床診斷指標對于改善患者的生存質量具有重要意義[3-5]。

糖類抗原125(CA125)是目前國內外普遍認可和廣泛應用的用于卵巢癌臨床診療的標志物，但其特異度不高，在非卵巢癌(如子宮內膜癌、子宮腺肌瘤、卵巢囊腫等)中也具有一定的陽性率，這樣會對臨床鑒別診斷造成不小的干擾[6-9]。

人附睪蛋白4(HE4)與CA125相類似，也可用于卵巢癌的診療中且特異度較高[10]。基質金屬蛋白酶7(MMP7)是一種與癌的轉移、侵襲相關的蛋白[11]。關于上皮性卵巢癌（epithelial ovarian cancer，EOC）的臨床研究學者大多會集中于單一指標的診斷價值分析，而對于多指標聯合檢測的價值分析報道較少。本文擬評估CA125，HE4和MMP7三者單獨與聯合使用在上皮性卵巢癌中的診斷價值。

1 材料和方法

1.1 研究對象 本研究納入自2016年1月～2017年9月我院收治的243例卵巢癌住院患者。納入標準：在我院接受治療并證實為卵巢癌的患者且病理報告完整。排除標準：出現顆粒細胞癌或惡性畸胎瘤以及轉移灶的腫瘤患者。對年齡在47～56歲之間的婦女進行更年期狀態檢查，定義為閉經一年。其中良性卵巢腫瘤140例(57.6%)，絕經前患者32例，平均年齡41.3±4.2歲；絕經后患者108例，平均年齡66.3±3.6歲。交界性腫瘤30例(12.3%)，絕經前患者17例，平均年齡40.3±3.6歲；絕經后患者13例，平均年齡64.8±4.3歲。EOC患者73例(30.0%)，絕經前患者14例，平均年齡44.3±3.9歲； 絕經后患者59例，平均年齡65.2±4.2歲。根據研究對象的臨床病理將EOC進一步分為I型和II型腫瘤。I型包括低級（G1）漿液性，低級（G1）子宮內膜樣，所有透明細胞、黏液和過渡（brenner）癌。 II型包括高級（G2-G3）漿液性，高級（G2-G3）子宮內膜樣，未分化癌和惡性混合性中胚層腫瘤。其中EOC受試者中14例為絕經前婦女，I型7例，II型7例，59例為絕經后婦女，I型20例，II型39例。本研究經由醫院倫理委員會批準，所有患者或其親屬均簽署書面知情同意書。

1.2 試劑和儀器 高速離心機購于廣州吉迪儀器有限公司；酶聯免疫吸附實驗試劑盒購自美國Immutopics公司；真空采血管購于廣州兆康生物科技有限公司。

1.3 方法 根據國際婦產聯合會(International Federation of Obstetrics and Gynecology，FIGO)的標準術后將EOC可分為I～IV期。其中，Ⅰ和Ⅱ期是EOC的早期階段，Ⅲ和Ⅳ期是EOC的晚期階段，Ⅰ和Ⅱ型腫瘤分別又可分為早期和晚期階段（選取組織樣本Ⅰ型和Ⅱ型腫瘤，剔除未分化組織樣本4例），見表1?？崭共杉颊哽o脈血3 ml立即將其置于真空試管內(無抗凝劑)，室溫下靜置30min，待自然凝固狀送至檢驗科分析。使用酶聯免疫法(ELISA)分別檢測CA125，HE4和MMP7的濃度水平。

表1 I型和II型EOC類型分類

1.4 統計學分析 采用SPSS17.0和Stata 12.1統計軟件進行數據統計分析。兩組數據之間的比較使用t檢驗分析。組間或三個或更多個組的關系采用Kruskal-Wallis單因素方差分析。對各指標繪制受試者工作特征曲線(receiver operating characteristic curve，ROC)，并計算曲線下面積(area under curve，AUC)值。針對I型和II型的個體標記及其組合，陽性預測值(positive predictive value，PPV)和陰性預測值(negative predictive value，NPV)計算敏感度和特異度，以P ＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 CA125，HE4和MMP7的表達水平在I，II型EOC中的診斷價值 I，II型EOC中的CA125均顯著高于良性腫瘤組(P＜0.001)。I，II型EOC中的HE4均顯著高于良性腫瘤組(P＜0.001)。MMP7在良性腫瘤中未發現，而在I，II型EOC中的陽性表達率分別為62.3%和70.6%。

血清中CA125，HE4和MMP7臨界值分別設定為 60.0 U/ml，70.0 pmol/L和67 ng/ml。

相較于I型EOC中單一和多指標聯合的AUC值，II型EOC中多指標聯合(CA125+HE4+MMP7)的AUC檢測值較高，見表2。

表2 CA125，HE4和MMP7的表達水平診斷I，II型EOC的效能評價

2.2 CA125，HE4和MMP7在早晚期I，II型EOC中的診斷價值 早期I，II型EOC 患者CA125的M值顯著低于晚期(P=0.000)。早期I，II型EOC 患者HE4的M值顯著低于晚期(P=0.002)。早期I，II型EOC 患者中MMP7的M值與晚期差異無統計學意義(P=0.055)。

早期EOC 患者血清中CA125，HE4和MMP7臨界值分別設定為 68.0 U/ml、93.0 pmol/L和25.5 ng/ml；晚期EOC 患者血清中CA125，HE4和MMP7臨界值分別設定為 112.0 U/ml、136.0 pmol/L和48.2 ng/ml。

相較于早期I型單一和多指標聯合和II型單一指標中的AUC值，II型EOC晚期患者中多指標聯合(CA125+HE4+MMP7)的AUC檢測值較高，見表3。

表3 CA125，HE4和MMP7的表達水平診斷早晚期I， II型EOC的效能評價

2.3 CA125，HE4和MMP7在 絕 經 前 后I，II型EOC的診斷價值 見表4。絕經前EOC患者血清中CA125，HE4和MMP7臨界值分別設定為 33.0 U/ml，60.0 pmol/L和55.5 ng/ml；絕 經 后EOC患者血清中CA125，HE4和MMP7臨界值分別設定 為 56.0 U/ml，87.0 pmol/L和48.2 ng/ml。相 較于I，II型EOC患者與良性腫瘤組，多指標聯合(CA125+HE4+MMP7)在絕經后EOC患者的AUC檢測值較高。

3 討論

在過去的數十年間關于卵巢癌的研究已經取得了較大進展，但是由于該病相對較隱匿，患者一般發現時已處于晚期階段，且其五年生存率僅為46.2%，因此對于卵巢癌的早期檢測意義重大。CA125是目前國內外廣泛應用的用于卵巢癌臨床診斷和檢測的腫瘤標志物之一，有研究報道指出當卵巢出現異常時，CA125的濃度水平就開始偏高[12-13]，但是也有研究認為血清中CA125升高僅會出現在40%～50%的早期卵巢癌患者中。HE4的敏感度與CA125相當并且特異度更高[14-15]。MMP7是基質金屬蛋白酶家族中分子量最小的成員，其在腫瘤的發生、發展中發揮重要作用，研究認為其與癌細胞的轉移、侵襲有關[16]。

表4 CA125，HE4和MMP7的的表達水平診斷絕經前后I, II型EOC的效能評價

本研究旨在評估生物標志物CA125，HE4和MMP7單獨和聯合應用對I，II型EOC患者的診斷價值。結果發現CA125，HE4和MMP7是II型EOC患者的高度代表性標志物。CA125+HE4+MMP7聯合標記物在II型EOC患者中的檢測值較高，尤其在晚期階段。另外，CA125，HE4和MMP7單獨或CA125+HE4+MMP7聯合應用對I型EOC不具有良好的診斷能力。LU等[17]人以相同的分類方法分出I，II型EOC并測試分析14種血清標記物，結果發現CA125具備最大的診斷能力，II型EOC的AUC值為 0.93，I型EOC的AUC值為 0.89。這與本研究中報道結果相一致。

本研究基于FIGO的相關標準將EOC可分為I～IV期，使用ELISA分別檢測CA125，HE4和MMP7的濃度水平。最新的分子生物學特性將EOC作為一種高度異質性疾病，基于形態學和分子遺傳學，提出了一種新型的腫瘤起源和進展模型，將EOC分為I，II型腫瘤。I型腫瘤以懶惰的方式表現，有穩定的基因組和沒有TP53 (Tumor protein, TP53)突變[18-19]。II型腫瘤有高度的遺傳不穩定性，有大多數TP53突變[20]。

總體而言，分子生物學對于更好了解EOC的發病機制是至關重要的，其將有利于改善EOC患者的早期診斷和生存。本研究證實CA125，HE4和MMP7對II型EOC患者具有較好的診斷能力，尤其是晚期II型EOC。