抗苗勒管激素和促卵泡激素等聯合檢測在不孕癥患者卵巢儲備功能中的價值研究

蔣毅，呂玉珍，劉祎琳

(焦作市婦幼保健院，河南 焦作 454000)

女性在未采取任何避孕對策且1年以上未懷孕即為不孕癥。據有關資料顯示[1]，我國大約10%的女性存在不孕癥，且患病人數越來越多，該病癥的存在對夫妻正常生活造成了嚴重影響，而且影響了家庭和諧與穩定，同時也發展成育齡夫婦面臨的主要問題[2]。近年來，隨著醫學技術的發展，輔助生殖技術(ART)不斷完善，ART治療期間，患者卵巢儲備能力在輔助生殖技術選擇中具有重要作用，根據卵巢有關指標可對卵巢狀況進行有效判斷，準確評價卵巢儲備功能[3]。基于此，本研究選擇不孕癥患者為研究對象，探討抗苗勒管激素(AMH)、雌激素(E2)、促卵泡激素(FSH)、黃體生成素(LH)對其卵巢儲備功能的預測價值，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年1月—2018年12月采取體內受精不孕患者68 例，以獲取卵泡數目為依據分為卵巢低反應組(n=28)與卵巢正常反應組(n=40)。卵泡低反應組患者年齡(30.21±2.41) 歲，不孕時間(3.31±0.35) 年；卵巢正常反應組患者年齡(30.18±2.38) 歲；不孕時間(3.28±0.36) 年。兩組患者月經均正常、規律，無卵巢手術史。本研究經我院倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 藥物、設備及試劑

藥物包括促性腺激素(Gn)、促性腺激素釋放激素激動劑(GnRH-a)。采用德國西門子CENTAUR XP全自動化學發光儀檢測LH，E2和FSH，聯合配套試劑。采取羅氏Cobas E601電化學發光免疫分析儀檢測AMH，并聯合配套試劑。

1.2.2 方法

1.2.2.1 檢測系統性能驗證試驗

根據美國臨床及實驗室標準化協會(CLSI)EP15-A2文件及其相關說明書，分別驗證羅氏Cobas E601電化學發光免疫分析儀與德國西門子CENTAUR XP全自動化學發光儀的正確度及精密度。經檢測均符合標準，與臨床檢測需求相符。全面落實標準中的質量控制，并按照操作步驟進行校準。每日與質量控制下開展標本檢測，確保檢測質量。

1.2.2.2 檢測方法

治療1 個月前，予以GnRH-a 1 mg注射，目的是對垂體進行調節，14 d后檢測血清中各激素水平，與降低要求相符時，也就是E2在50 pg/mL以下、卵泡直徑在10 mm以下和LH在5 mIU/mL以下時，予以促性腺激素，加快排卵速度，在此過程中，檢測卵泡大小、LH和E2水平，并于第3天檢測基礎黃體生成激素(bLH)、基礎FSH(bFSH)、AMH及基礎雌二醇(bE2)，收集3 mL肘靜脈血液，置于干燥紅色血管中，以3 000 r/min的速度離心10 min，血清分離后進行檢測。采用化學發光法檢測bFSH，bE2及bLH水平，電化學發光法檢測AMH水平，嚴格落實每項操作步驟。

1.3 觀察指標

比較各組卵巢儲備各參數值，通過ROC曲線分析聯合預測卵巢低反應率、AMH，bE2，bFSH/bLH，bFSH及bLH，并分析每個指標ROC曲線特異度及靈敏度。

1.4 統計學方法

2 結 果

2.1 兩組卵巢儲備各參數值比較

兩組bE2水平及不孕時間比較，差異無統計學意義(P>0.05)；卵巢正常反應組的獲卵數、AFC，AMH，bLH高于卵巢低反應組，而bFSH及bFSH/bLH低于卵巢低反應組，差異有統計學意義(P<0.05)(見表1)。

表1 比較兩組卵巢儲備各參數值

2.2 bFSH，bE2，AMH，bFSH/bLH及卵巢低反應率聯合預測的ROC曲線分析

AMH，bE2，bFSH，bFSH/bLH及聯合預測這四項指標的線下面積(AUC)值分別是(0.79±0.12)，(0.54±0.01)，(0.61±0.08)，(0.68±0.05)和(0.89±0.09)。其中，bE2的AUC值與參考值比較，差異無統計學意義(P>0.05)；AMH，bFSH/bLH，bFSH及聯合預測的AUC均大于參考線，差異有統計學意義(P<0.05)，通常情況下，0.50.9以上說明診斷值較高。bFSH，bE2，AMH，bFSH/bLH及卵巢低反應率聯合預測ROC曲線分析特異度及靈敏度見表2。

表2 各指標ROC曲線分析特異度與靈敏度分析 %

3 討 論

近些年來，我國女性不孕癥患者越來越多，目前，多用ART方法進行治療。人工授精指通過非性交方法向女性生殖道傳遞精子，以此實現女性受孕，該方式屬于輔助生殖技術[4]。就排卵障礙患者而言，治療原則為加快排卵速度，在此期間密切監測卵巢儲備功能具有重要作用。女性卵巢儲備功能指女性卵巢分泌卵子的質量及數目能力[5]。現階段，評價指標中常用AFC，E2，AMH，FSH及LH等，其中檢測操作方便的指標包括bLH，bE2，FSH，上述指標適用范圍越來越廣。AMH指的是卵巢竇卵泡顆粒細胞中分泌的活性因子，其為近幾年評價提供了新指標。據有關資料顯示[6]，年齡超過25 歲女性卵巢儲備功能評價指標中，AMH具有重要作用，早期年齡越大，AMH水平越低，其能夠有效預測女性卵巢儲備功能，而且與月經周期無關，具備較強的穩定性。相關研究表明[7]，AMH在卵巢反應預測中具有較高的特異度與靈敏度。AMH可用于卵巢儲備檢測及卵巢刺激反應預測，所以，AMH是加快排卵個體治療中非常重要的一項指標[8]。ROC曲線可以從客觀角度對檢測中多項指標進行評價，AUC值與診斷價值成正相關[8]。

女性卵泡數量隨著年齡的增加越來越少，而且卵泡對促性腺激素敏感度與卵巢儲備功能逐漸降低。據有關資料顯示，女性30 歲以后，生育能力越來越低，而且35 歲后降低速度加快顯著，40 歲后妊娠率較低。通過本次研究發現，卵巢反應性隨著年齡的提高越來越低。機體在產生卵泡時，血清E2水平提高明顯，所以，卵巢儲備功能檢測中，bE2具有較高的應用價值。相關資料表明[9]，卵巢低反應診斷中，血清E2具有較低的靈敏度與特異度。本研究中卵巢正常反應組的bE2水平低于卵巢低反應組，但差異無統計學意義(P>0.05)；通過分析ROC曲線，AUC值在0.7以下，具有較低的診斷值，而且較聯合檢測值低，由此可見，卵巢低反應監測中，bE2具有較低的診斷價值。bFSH從一定程度上反映卵巢儲備功能，而且兩者成反比，bFSH水平越高儲備功能越低[9]。本研究中卵巢正常反應組的bFSH低于卵巢低反應組。通過分析ROC曲線，AUC在0.6以上，屬于中等診斷值范圍內。bFSH/bLH提高則表示卵巢儲備功能降低，同bLH及bFSH相比，其特異度、靈敏度更高。隨著年齡的增加，AMH水平越來越高，直至青春期，25 歲后，該指標水平逐漸降低，絕經期則可能無法準確檢測出。由此可見，AMH水平直接影響著卵巢儲備，而且同獲卵數成正比。本次實驗結果顯示，在AMH水平及獲卵數方面，卵巢低反應組明顯降低。通過分析ROC曲線可知，AUC水平在0.7以上，而且相比于其他激素，具有較高的靈敏度、特異度，但是聯合4項指標，卵巢儲備功能檢測中診斷價值較高[10]。

總而言之，卵巢儲備功能診斷期間，聯合LH，AMH，E2和FSH 4項指標有助于提高診斷準確率，具有較高的應用價值。