連翹飲片質(zhì)量分析與評(píng)價(jià)

宋貞貞　王麗　朱立忠　顧婷

【摘 要】 目的：分析連翹飲片質(zhì)量。方法：隨機(jī)抽取30批次連翹飲片，采用液相色譜分析法測(cè)定連翹苷、連翹酯苷A含量，并對(duì)照《中國(guó)藥典》（2015版）評(píng)價(jià)連翹飲片質(zhì)量。結(jié)果：30批次連翹飲片不合格率為6.67%;連翹飲片質(zhì)量主要受連翹苷、連翹酯苷A的影響。結(jié)論：連翹飲片質(zhì)量尚可，但仍存在一定優(yōu)化空間。液相色譜法評(píng)價(jià)連翹飲片質(zhì)量操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)流程耗時(shí)較短，可為連翹飲片質(zhì)量的評(píng)估提供可靠支持。

【關(guān)鍵詞】 連翹飲片;質(zhì)量;連翹苷;連翹酯苷A

【中圖分類號(hào)】R284.1 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2020）23-0018-03

Quality Analysis and Evaluation of Forsythia Decoction Pieces

SONG Zhenzhen WANG Lin ZHU Lizhong GU Ting*

Affiliated Hospital of Nanjing University of traditional Chinese Medicine/Jiangsu Academy of traditional Chinese Medicine，Nanjing 210028，China

Abstract：Objective To analyze the quality of forsythia decoction pieces.Methods Randomly select 30 batches of Forsythia suspensa pieces， use liquid chromatography to determine the content of forsythiaside and forsythiaside A， and evaluate the quality of Forsythia suspensa pieces against the Chinese Pharmacopoeia （2015 edition）.Results The failure rate of 30 batches of Forsythia suspensa was 6.67%; the quality of Forsythia suspensa was mainly affected by forsythin and forsythin A.Conclusion The quality of Forsythia decoction pieces is fair， but there is still some room for optimization. The liquid chromatography method for evaluating the quality of Forsythia suspensa is simple， and the detection process takes a short time， which can provide reliable support for the evaluation of the quality of Forsythia suspensa.

Keywords：Forsythia Ddecoction; Quality; Forsythin; Forsythiaside A

作為臨床常用的清熱解毒藥物，連翹目前已于中醫(yī)治療中得到了良好的應(yīng)用[1]。在此背景下，市售連翹飲片逐漸增加。連翹飲片的質(zhì)量與其清熱解毒功效的發(fā)揮存在密切關(guān)聯(lián)[2]。目前，連翹飲片的質(zhì)量評(píng)價(jià)多采用近紅外光譜技術(shù)、液相色譜儀分析法。在連翹飲片成分評(píng)價(jià)方面，液相色譜儀分析的結(jié)果更加準(zhǔn)確，且操作相對(duì)便捷。因此，基于液相色譜分析的連翹飲片的質(zhì)量評(píng)價(jià)具有一定的現(xiàn)實(shí)意義。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 儀器：Waters 2695型號(hào)高效液相色譜儀;FW-100型號(hào)高速萬(wàn)能粉碎機(jī);DXKW-4型號(hào)電子恒溫水浴鍋等。試劑：連翹酯苷A對(duì)照品;連翹苷對(duì)照品;色譜純：甲醇、乙腈、冰乙酸;分析純：甲醇及95%乙醇;蒸餾水等。

1.2 樣品制備 隨機(jī)抽取市售連翹飲片30批次作為樣品。

1.3 方法

1.3.1 連翹苷含量測(cè)定 ①制備對(duì)照品溶液。取適量連翹苷對(duì)照品，將其混入適量甲醇溶液中，制成濃度為0.596mg/mL的溶液。②制備供試品溶液。取1g連翹樣品粉末，置入具塞錐形瓶?jī)?nèi)。向錐形瓶?jī)?nèi)混入15mL甲醇，預(yù)先測(cè)量錐形瓶及瓶?jī)?nèi)混合溶液重量。經(jīng)浸漬過(guò)夜后，實(shí)施超聲處理（處理?xiàng)l件：頻率：40kHz;功率：250W）。持續(xù)處理25min后，自然冷卻，再次測(cè)量重量。對(duì)照初次稱量結(jié)果向溶液中混入加入適量甲醇進(jìn)行補(bǔ)足。搖勻并過(guò)濾，取5mL濾液蒸至接近干燥狀態(tài)，混入0.5g中性氧化鋁，將混合物置于中性氧化鋁柱上（參數(shù)：內(nèi)徑及目數(shù)分別為1.0～1.5cm、100～120目），取80mL 70%濃度乙醇進(jìn)行充分洗脫，洗脫后，收集洗脫液進(jìn)行濃縮。加入50%濃度甲醇溶解殘?jiān)⑷芙夂蠡旌衔镏糜诹科浚ㄒ?guī)格：5mL）內(nèi)，稀釋至刻度，搖勻、過(guò)濾后，所得續(xù)濾液即為供試品溶液。③色譜分析。液相色譜參數(shù)設(shè)置：Diamonsil C18色譜柱規(guī)格：5μm，250mm×4.6mm;進(jìn)樣量及流速分別為10μL、1mL/min;波長(zhǎng)及柱溫分別為277nm、30℃;流動(dòng)相選用乙腈-水（混合比：25∶75）。此外，分別參照上述色譜條件，開(kāi)展重復(fù)性、精密性及穩(wěn)定性試驗(yàn)。④回收率。取3份0.5g供試品，分別加入不同含量的連翹苷對(duì)照品，制備供試品溶液，并沿用上述液相色譜分析條件確定連翹苷含量。加樣回收率試驗(yàn)條件設(shè)置分別為：試驗(yàn)1：樣品含量、稱樣量及加入量分別為：0.165mg、0.5001g、0.085mg;試驗(yàn)2：樣品含量、稱樣量及加入量分別為0.165mg、0.5001、0.085mg;試驗(yàn)3：樣品含量、稱樣量及加入量分別為：0.165mg、0.5002、0.085mg。

1.3.2 連翹酯苷A含量測(cè)定 ①制備對(duì)照品溶液。取適量連翹酯苷A對(duì)照品，混入適量甲醇制成濃度為3.69mg/mL的溶液。②制備供試品溶液。取0.5g樣品粉末置于具塞錐形瓶?jī)?nèi)，向錐形瓶?jī)?nèi)混入15mL 70%甲醇，稱重后實(shí)施超聲處理（處理?xiàng)l件與連翹苷一致）。處理時(shí)長(zhǎng)：0.5h。冷卻后再次稱重，以適量70%甲醇補(bǔ)足處理后溶液。搖勻并過(guò)濾即可獲得連翹酯苷A供試品溶液。③液相色譜分析。色譜柱、流速、進(jìn)樣量及柱溫均與連翹苷含量測(cè)定試驗(yàn)一致。波長(zhǎng)設(shè)置為330nm，流動(dòng)相選擇乙腈-0.4%濃度冰醋酸溶液（混合比：15∶85）。④回收率測(cè)定。取3份0.25g供試品，向其中混入適量連翹酯苷A對(duì)照品，分別按照如下條件測(cè)定加樣回收率參數(shù)：試驗(yàn)1：樣品含量、稱樣量及加入量分別為：2.04mg、0.2500g、2.04mg;試驗(yàn)2：樣品含量、稱樣量及加入量分別為：2.04mg、0.2501g、1.00mg;試驗(yàn)3：樣品含量、稱樣量及加入量分別為2.04mg、0.2502g、1.00mg。

2 結(jié)果

2.1 連翹飲片質(zhì)量分析 參照《中國(guó)藥典》（2015版）評(píng)價(jià)本研究所選30批次連翹飲片質(zhì)量。評(píng)估結(jié)果顯示：30批次連翹飲片中，僅2批次質(zhì)量不合格，連翹飲片不合格率為6.67%。對(duì)照品HPLC色譜圖如圖1所示。其中，a表示連翹苷，b表連翹酯苷A，c表示總灰分，d表示浸出物。供試品HPLC色譜圖如圖2所示。

2.2 連翹飲片含量分析 ①連翹苷：30批次連翹苷含量（0.38±0.07）%。加樣回收率測(cè)定結(jié)果：試驗(yàn)1回收率98.75%、試驗(yàn)2回收率98.03%、試驗(yàn)3回收率96.72%。②連翹酯苷A：30批次連翹飲片中的連翹酯苷A含量（5.91±0.54）%。加樣回收率測(cè)定結(jié)果：試驗(yàn)1回收率97.12%、試驗(yàn)2回收率95.32%;試驗(yàn)3回收率96.22%。

2批次不合格連翹飲片的連翹苷含量為：0.43%、0.42%;而連翹酯苷A含量為：6.44%、6.50%。

3 討論

3.1 連翹的功效 近年來(lái)，隨著中醫(yī)理論的不斷普及，人們對(duì)中醫(yī)治療的接受度逐漸升高。連翹作為常用中藥，其具有良好的清熱解毒、消腫散結(jié)功效[3]。現(xiàn)代藥理學(xué)研究則證實(shí)，連翹中的有效成分具有抗炎、抗病毒、抗菌等多種功效[4]。

3.2 連翹飲片的質(zhì)量評(píng)價(jià) 鑒于連翹的重要作用，這種中藥材逐漸于各類疾病的治療中得到了良好的普及[5]。在這一背景下，連翹飲片的質(zhì)量逐漸成為人們的關(guān)注重點(diǎn)[6]。結(jié)合既往連翹飲片質(zhì)量評(píng)估經(jīng)驗(yàn)可知，部分連翹飲片的質(zhì)量欠佳，難以發(fā)揮出良好的清熱、解毒、抗炎功效[7]。為了避免因使用質(zhì)量不合格的連翹飲片而影響治療效果、治療安全性，加強(qiáng)連翹飲片的質(zhì)量評(píng)價(jià)具有一定必要性。

本研究隨機(jī)抽取30批次連翹飲片，對(duì)其質(zhì)量進(jìn)行評(píng)價(jià)：采用液相色譜法分別測(cè)定連翹飲片中有效成分——連翹苷、連翹酯苷A的含量參數(shù)，結(jié)果顯示：30批次連翹飲片的連翹苷含量為（0.38±0.07）%，連翹酯苷A含量為（5.91±0.54）%。將《中國(guó)藥典》（2015版）中規(guī)定的有效成分含量作為參照進(jìn)行評(píng)估，發(fā)現(xiàn)共2批次連翹飲片的質(zhì)量不合格，連翹飲片不合格率為6.67%。上述結(jié)果提示：連翹飲片的整體質(zhì)量尚可，但市面上仍存在質(zhì)量不合格的連翹飲片。分析連翹飲片質(zhì)量不合格的原因可能為：連翹炮制工藝流程不規(guī)范，炮制過(guò)程缺乏嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)或質(zhì)量管理，導(dǎo)致連翹飲片的有效成分含量存在一定差異[8]。

此外，從不合格連翹飲片的檢測(cè)結(jié)果來(lái)看，2批不合格連翹飲片的連翹苷成分含量均下限、連翹酯苷A含量均下限，均高于藥典中規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)。由此可認(rèn)為，連翹苷、連翹酯苷A是影響連翹飲片質(zhì)量的主要因素。為了進(jìn)一步提升連翹飲片質(zhì)量，首先應(yīng)加強(qiáng)質(zhì)量檢測(cè)，完善中藥飲片的質(zhì)量監(jiān)測(cè)體系，運(yùn)用適宜的方法，提高中藥飲片質(zhì)量檢測(cè)結(jié)果的有效性，進(jìn)而減少質(zhì)量不合格中藥飲片的流入。其次應(yīng)加強(qiáng)連翹飲片炮制管理，以提高連翹飲片質(zhì)量為原則，完善中藥飲片炮制管理制度，要求中藥飲片加工生產(chǎn)廠加強(qiáng)對(duì)中藥炮制工藝及有效成分測(cè)定等細(xì)節(jié)的把控，以此為中醫(yī)治療提供良好的支持。

3.3 液相色譜法評(píng)價(jià)連翹飲片質(zhì)量的優(yōu)勢(shì) 連翹飲片的質(zhì)量評(píng)價(jià)中，液相色譜法有明顯的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)。

3.3.1 檢測(cè)操作便捷 在連翹飲片質(zhì)量檢測(cè)中，液相色譜法檢測(cè)操作較為便捷，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程的耗時(shí)較短。該檢測(cè)便捷性、高效性特征，為其在大批量飲片質(zhì)量評(píng)價(jià)中的應(yīng)用奠定了良好的基礎(chǔ)。

3.3.2 含量檢測(cè)結(jié)果可靠 連翹飲片質(zhì)量主要由其有效成分含量確定[9]。連翹苷、連翹酯苷A均為連翹飲片質(zhì)量評(píng)估的重要依據(jù)。采用液相色譜法測(cè)定連翹飲片的連翹苷、連翹酯苷A含量，可于較短時(shí)間內(nèi)獲得準(zhǔn)確性較高的檢測(cè)結(jié)果。此外，為了充分發(fā)揮這種評(píng)價(jià)方法的價(jià)值，除了連翹飲片質(zhì)量評(píng)價(jià)外，還可將這種方法應(yīng)用于其他中藥飲片的質(zhì)量評(píng)價(jià)中，以保障中藥飲片質(zhì)量的可靠性，為臨床中醫(yī)治療安全性、治療有效性水平的提升奠定良好的基礎(chǔ)。

綜上所述，宜于連翹飲片質(zhì)量評(píng)價(jià)中，引入液相色譜分析法，以獲取較為準(zhǔn)確的評(píng)估結(jié)果。通過(guò)連翹飲片中連翹苷、連翹酯苷A含量的分析，確定連翹飲片質(zhì)量，及時(shí)篩選出質(zhì)量不合格的連翹飲片，以保障連翹飲片的臨床應(yīng)用安全性。

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（收稿日期：2020-06-19 編輯：程鵬飛）

作者簡(jiǎn)介：宋貞貞 （1985-）女， 漢族，本科，主管中藥師 ，研究方向?yàn)橹兴帉W(xué)。E-mail：1748479833@qq.com

通信作者：顧婷（1985-）女，漢族，碩士，主管中藥師，研究方向?yàn)橹兴帉W(xué)。E-mail：1748479833@qq.com