苗藥大果木姜子揮發油對幽門螺桿菌的體外抑菌實驗研究

吳碧清 吳賢倩 陳麗玄 鮑杰 王平

【摘?要】?目的：研究大果木姜子揮發油對幽門螺桿菌的體外抑菌作用。方法：采用水蒸氣蒸餾法提取大果木姜子揮發油，以幽門螺桿菌國際標準菌株ATCC26695為實驗菌株，采用紙片法測定抑菌圈大小，倍比稀釋法測定最低抑菌濃度（MIC）和最低殺菌濃度（MBC）。結果：大果木姜子揮發油得油率為6.4%，不同稀釋濃度下，抑菌圈直徑為7.80～26.04mm，幽門螺桿菌的MIC值為6.25mg/mL，MBC值為12.5mg/mL，結論：大果木姜子揮發油具有抗幽門螺桿菌作用，其具體機制值得進一步深入研究。

【關鍵詞】?大果木姜子;揮發油;幽門螺桿菌;體外抑菌

【中圖分類號】R29?【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2020）24-0007-05

Abstract：Objective To investigate the anti Helicobacter pylori activity of essential oil isolated from the fruit of Cinnamomum migao H.W.Li.Methods The volatile oil of the Fruit of Cinnamomum migao was extracted by steam distillation. The international standard strain （Helicobacter pylori ATCC26695 ） was used as the experimental strain.The bacteriostasis experiment was carried out by filter paper method， and the minimum inhibitory concentration （MIC） and the minimum bactericidal concentration （MBC） were measured by two times dilution method and the nutrient agar diffusion method. Results The yield of volatile oil was 6.4%， the diameter of bacteriostatic circle was from 7.80mm to 26.04mm， the MIC of Helicobacter pylori was 6.25mg/mL， and MBC was 12.5mg/mL. Conclusion The volatile oil isolatedfrom the fruit of Cinnamomum migaohad obvious bacteriostasis effect on H.pylori，and its mechanism deserves further study.

Keywords：Cinnamomum migao H.W.Li;Volatile Oil;Helicobacter Pylor;Bacteriostasis in Vitro

幽門螺桿菌（Helicobacter pylori）感染是慢性胃炎、消化性潰瘍、胃黏膜相關淋巴組織淋巴瘤和胃腺癌發生的主要誘導因素之一[1]。幽門螺桿菌是世界范圍內常見的、具有強傳染性的病原菌之一。有研究報道，全球有超過50%的人群感染此菌[2]。研究H.pylori致病機制，有效防治幽門螺桿菌相關性疾病已成為全球關注重大公共衛生健康問題。由于現階段抗生素耐藥性的增加，幽門螺桿菌根除率逐年下降。探索幽門螺桿菌感染治療的新路徑是當前研究的熱點問題，其中中醫藥治療引起越來越多的關注。中醫藥治療幽門螺桿菌感染具有療效確切、毒副反應小、根除率高等優勢，是西藥療法的有益補充[3]。目前研究已發現多種中藥具有明確的抗幽門螺桿菌作用。

大果木姜子是樟科樟屬植物米槁（Cinnamomum migao H.W.Li）的干燥成熟果實，味苦、辛，性溫，能夠散寒祛濕、行氣止痛，常用于治療胃痛、腹脹、腹痛、胸悶、嘔吐等病癥。主要分布在我國西南地區，如貴州、云南和廣西等省，為貴州十大苗藥之一[5-6]。研究發現，大果木姜子揮發油對金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌、表皮癬菌等具有較好的體外抑菌作用[7]。但目前尚未見其對幽門螺桿菌抑菌效果的相關報道。通過體外抑菌試驗，發現大果木姜子揮發油對幽門螺桿菌有較強的抑菌作用，現將研究結果匯報如下。

1?儀器與材料

1.1?試驗菌株幽門螺桿菌?ATCC26695由貴州醫科大學微生物學教研室惠贈，由課題組保管于貴州中醫藥大學形態實驗室。

1.2?材料?大果木姜子購自貴陽市萬東藥材市場，由貴州中醫藥大學藥學院陳曉蘭教授鑒定為正品。幽門螺桿菌固體培養基（HB8647）、腦心浸液肉湯干粉（HB82971）、幽門螺桿菌抑制劑（HB8646a，10mL/支）購自青島海博生物技術有限公司;無菌新鮮羊血購自貴陽超研生物科技有限公司;過氧化氫酶試劑（HB8650）、氧化酶試紙片（HB2100）購自于青島海博生物技術有限公司;尿素酶試紙（121102）購自珠海市克迪科學技術開發公司;氨芐西林藥敏紙片（AMP，10ug）購自湖南長沙快邁生物科技有限公司;微需氧產氣袋（8057ZJ-2，日本三菱）購自上海舒濟生物有限公司。

1.3?儀器?ULTS1386超低溫冰箱（美國賽默飛世爾科技公司），BSC-1300 ⅡA2生物安全柜（蘇州安泰空氣技術有限公司），SW-CJ-1FD超凈工作臺（蘇州安泰空氣技術有限公司），BNA610電熱恒溫培養箱（日本Yamato公司），GI54DWSGI60DP立式壓力蒸汽滅菌器（廈門致微儀器有限公司），麥氏比濁儀（法國Biomerieux SA公司），WND-2000高速中藥粉碎機（浙江省蘭溪市偉能達電器有限公司），多功能酶標儀（瑞士Tecan Spark）。