日常飲用水檢驗中的微生物檢驗方法對比研究

王丹 郝俊峰 王敏

【摘 要】研究日常飲用水檢驗中微生物的檢驗效果，本文研究分析了2018年1月—2018年12月不同時間逾地點的500份飲用水水樣，其中250份應用多管發酵法檢測（A組），250份水樣采用濾膜法檢測（B組），回顧并分析了兩種方法檢測結果。結果顯示，A組檢驗合格率明顯高于B組，P<0.05，差異有統計學意義。由此得出，在生活飲水檢驗中，多管發酵法比濾膜法的水質檢測合格率更高。

【關鍵詞】飲用水檢驗;微生物檢驗;飲用水微生物

【中圖分類號】R123 【文獻識別碼】B 【文章編號】1002-8714（2020）01-0107-01

1 資料與方法

1.1一般資料

研究時間在2018年1—12月，研究對象為不同時間不同地點獲取的500份飲用水水樣，其中250份應用多管發酵法檢測（A組），250份水樣采用濾膜法檢測（B組），A組與B組水樣中均包括出廠水樣100份、管網末梢水樣100份、二次供水水樣50份。A組、B組在水樣數量、水樣來源等方面滿足可比性要求，P>0.05，差異無統計學意義。

1.2方法

不同水樣均以微生物中的大腸桿菌檢驗為主，具體檢驗方法如下：

1.2.1A組

采取多管發酵法，不同水樣樣本量為10mL，然后將其加入雙料乳糖蛋白胨培養液中，在10mL單料乳糖蛋白胨中加入上述1mL樣本，量取1mL樣本，將其加入到9mL無菌生理鹽水中，再在10mL單料乳糖蛋白胨的培養液中加入1mL樣本，不同稀釋度均需設置5管;每日檢測處理后的自來水，接種雙料培養基，共5份，每份接種10mL，并將受污染水源確定為檢測水源。接種期間：培養箱溫度設置：35～37℃，培養時間：22～26h;培養完成后，陰性標準：乳糖蛋白胨培養管沒有產酸與產氣;陽性標準：培養管出現產酸、產氣，此時需在伊紅美藍瓊脂板上接種發酵管中的菌落，培養箱內培養。溫度：35～37℃，培養時間：18～24h，觀察培養基中的菌落變化，選取菌落，并進行革蘭氏染色，通過顯微鏡進行菌落觀察與分析。

1.2.2B組

采用濾膜法，使用0.45μm的微孔濾膜對水樣進行過濾，整個檢驗過程如下：采用一次性無菌濾膜（47mm×0.45μm×600）完成水質監測，有多種孔徑可滿足不同微生物檢測要求。本文選擇的濾膜孔徑為0.45μm，所有膜片均為無菌獨立包裝，表面有網格，便于菌落計數。使用前應詳細閱讀使用說明書，并使用無菌鑷子夾取無菌濾膜，將其置于滅菌濾床上，放置位置合適后，固定過濾器，于過濾器中倒入100mL水樣，打開過濾器閘門，抽濾條件為-0.05Pa。水樣過濾后進行培養，取出的樣品需要抽氣，時間為5s，抽氣過程中需要關閉閘門，并取出過濾器，整個操作需要使用無菌鑷子完成，避免直接用水接觸，然后將濾膜放置到品紅亞硫酸鈉培養基中。放置過程中濾膜需要放在細菌面，便于其與培養基有效接觸，養殖期間避免殘留氣泡，放置完成后將濾膜倒入平皿并倒置，培養基培養溫度為37℃，培養時間為22～26h。

1.3影響日常飲用水微生物檢測的因素

1.3.1人員因素

對于微生物檢測人員而言，要想保證相關檢測工作的順利開展，應保證其具有扎實的技術能力以及專業素養，如果檢測人員的綜合素養不能滿足檢測工作開展的具體要求，也必然會對檢測工作的開展以及檢測結果的有效性產生一定的影響。

1.3.2環境因素

在實際的微生物檢測過程中，實驗室環境應配備專門的微生物檢驗無菌操作室以及配套檢測設備，并在試驗開始之前對無菌操作間進行消毒處理，在進行消毒處理過程中，應做好相應的消毒方法選擇工作。

1.3.3設備因素

對于微生物檢測而言，其主要涉及到的設備主要包括干熱滅菌鍋、高壓滅菌鍋以及恒溫培養箱等等，上述幾類設備溫度一定出現較大偏差，就極易給檢測數據的準確性帶來較大的影響。因此，在日常工作過程中，相關檢測人員應對設備溫度進行定期的校準。

1.4觀察指標

觀察不同方法對應的水樣檢驗合格率。

1.5統計學方法

借助統計學軟件SPSS21.0處理檢驗結果，檢驗結果為計數資料，用（n，%）表示，進行x2檢驗，差異有統計學意義，即P<0.05。

2 結果

見表1。

3 討論

通過對日常飲用水微生物檢驗方法的研究，便于明確不同檢驗特點，進而更好地控制飲用水質量，保證飲水安全[1]。多管發酵法是常用的飲用水檢驗方法，該方法是在檢驗過程中依據稀釋培養測數法對待測樣品進行多重稀釋，直到稀釋液接種到無或者極少細菌生長繁殖的培養皿中。按照沒有生長的最低稀釋度、最高稀釋度，依據“最大或然數”理論，得到樣品單位體積中的細菌數。最初稀釋期間的檢測結果較大，但是隨著反復稀釋，最終結果趨近于真實值。實際應用期間需要根據具體情況合理確定檢驗要求數目。

本研究通過采取多管發酵法，可使應用水合格率達到98.00%。在飲用水檢測期間，濾膜法通過濾膜過濾器對水樣進行過濾，獲取一定的細菌微生物，通過將濾膜在培養基上培養，膜上可逐漸生長出大腸菌群，便于直接進行計數。濾膜法在應用過程中具有操作簡單、檢測快速等優點，該方法在雜質較少的水樣檢測中應用較多，整個操作過程對無菌要求較為嚴格，很容易因為外界環境因素影響檢測結果。綜上所述，根據研究結果，多管發酵法的檢驗合格率（98.00%）高于濾膜法（80.80%）。雖然上述兩種方法都能夠用于生活飲用水的微生物檢驗，但多管發酵法檢驗的合格率更高，因而在生活飲用水微生物檢驗方面更具有價值[2]。

參考文獻

[1] 薛秀萍.探究生活飲用水微生物檢驗方法及評價標準[J].世界最新醫學信息文摘，2018，18（51）：258.

[2] 李慧.生活飲用水微生物檢驗方法和評價標準探討[J].世界最新醫學信息文摘，2018，18（13）：130+151.