22q11.2微重復攜帶者的產前診斷策略*

黃寧，劉艷秋，鄒永毅，王欣榮，吳翠婷

（江西省婦幼保健院 產前診斷中心，江西 南昌 330006）

22q11.2 微重復綜合征是新近被學者們所熟知的一類綜合征，遺傳方式為常染色體顯性遺傳，其表型可呈現正常至不同程度的臨床癥狀，異常臨床表現為精神發育遲滯、學習障礙、精神運動發育遲緩、生長遲緩、肌張力減退等[1]。本文回顧性分析江西省婦幼保健院1 例22q11.2 微重復攜帶者的產前診斷，以期探討其遺傳咨詢策略及生育指導。

1 資料與方法

1.1 一般資料

患者，女性，30 歲，孕18+周，G3P1A1，第1 胎足月順產一女孩，體健；第2 胎無創產前檢測提示為22 號染色體異常，于本院行羊水穿刺產前診斷，全基因組測序提示46,XN,dup（22q11.2）×3，引產；現再次懷孕要求行產前診斷。夫婦否認近親結婚、孕期不良因素暴露史及家族遺傳病史。經充分告知，孕婦簽署產前診斷知情同意書，于本院實施羊膜腔穿刺術，進行羊水染色體核型分析和染色體微陣列分析。

1.2 方法

抽取夫婦外周血及孕婦羊水，行細胞培養，收獲制片，G 顯帶染色體分析。同時提取夫婦外周血及羊水DNA 基因組DNA，采用Affymetrix Cytoscan 750K基因芯片試劑盒，隨機引物法，利用cy3 和cy5 染料分別標記待檢樣本和對照樣本DNA，經雜交、洗脫處理后，掃描分析。

2 結果

2.1 染色體核型分析結果

夫婦外周血染色體及羊水染色體核型分析均未見明顯異常。見圖1。

2.2 染色體微陣列分析

羊水染色體微陣列分析提示22q11.2（18 648 855-21 464 764）×3，存在2.81 Mb 微重復；母方提示22q11.2（18 631 364-21 460 641）×3，存在2.82 Mb微重復；父方未見異常。見圖2。

圖1 染色體核型

2.3 隨訪

該病例術后及產后均進行電話隨訪，現已足月順產一男孩，出生時身高52 cm，體重3.9 kg，經體格及超聲波檢查各項發育指標未見明顯異常。

圖2 染色體微陣列分析

3 討論

該疾病最初在2003年由ENSENAUER 等[2]報道，染色體22q11.2 區域基因富集，含有多個低拷貝重復序列（low copy repeats, LCR），被命名為LCR22s，分別為LCR1-LCR8。LCR 在減數分裂期間可以導致相鄰DNA 片段發生不對稱的同源重組，結果導致染色體的微缺失、微重復、插入、轉位等。現已被證實22q11.2 區域的這些LCR22s 介導基因重排，從而導致一些基因組異常，例如DiGeorge/Velocardiofacial syndrome（DGS/VCFS）、貓眼綜合征、der（22）綜合征及22q11.2 微重復綜合征[3]。理論上LCR 介導的基因重排發生重復的和缺失的比例是對等的，但實際上很少發生微重復，本文對1 例再次妊娠22q11.2 微重復綜合征的孕婦進行產前診斷并進行了親本溯源遺傳分析。

該例孕婦因既往有22q11.2 微重復綜合征妊娠史而來該院行產前診斷，對夫婦雙方及胎兒同時進行染色體核型分析及染色體微陣列分析，提示胎兒及母方在22q11.2 均存在2.81 Mb 重復片段。母方通過體格檢查及病史詢問未見明顯異常，2 次妊娠孕中期羊水產前診斷為22q11.2 微重復，第1 次夫婦未行進一步遺傳背景檢查而選擇引產，此次妊娠明確了胎兒微重復片段遺傳自表型正常的母親，孕婦選擇繼續妊娠。22q11.2 微重復綜合征的臨床表型可呈現正常，如同此例孕婦，也可出現嚴重程度不一的臨床癥狀，與DGS/VCFS 存在部分相同臨床表現，可出現多系統功能異常，包括心血管、神經、精神、內分泌和免疫疾病[4-5]。文獻查明22q11.2 微重復部分患者變異遺傳來自正常表型的父母，該疾病具有外顯不全，從而導致許多病例未得到臨床診斷，這就給遺傳咨詢、再發風險評估及產前診斷帶來很大挑戰。ROSENFELD 等[6]對大樣本人群數據進行貝葉斯分析，結果表明22q11.2 微重復其外顯率存在外顯不全，約為21.9%。在現有技術條件下，完全可以對22q11.2 微重復進行明確診斷，但確無法預測其臨床表現。對本研究中此例孕婦，其后代將有50%的概率遺傳22q11.2 微重復片段。本文中檢出的22q11.2 微重復片段為2.81 Mb，非常接近CHRISTOPOULOU 等[7]報道的重復區域，當前研究表明外顯率與重復片段大小之間并無關聯[8]，對22q11.2微重復高風險人群有必要進行產前診斷或胚胎植入前遺傳學診斷。

22q11.2 區域由于缺失或重復的片段較小，傳統G 顯帶染色體核型分析難以診斷，只能檢出一些大片段的染色體易位，額外的雙著絲粒染色體（貓眼綜合征）。該法操作簡單，費用低廉，可以同時檢測其他染色體異常，臨床上常用作篩查手段。熒光原位雜交可以通過特異性的熒光標記DNA 探針與相對應的染色體區域結合，檢測該區域有無重復或缺失。該方法敏感性強、特異性高，但正是由于DNA 探針的高度特異性導致1 種探針只能檢測1 個位點，對于該探針位點以外的缺失可能存在漏診[9]。多重連接探針擴增技術利用缺失重復區的多個微衛星標記、短串聯重復序列等進行擴增，可以1 次反應中擴增多至50 個靶序列，快速，敏感，操作方便，檢測成本低，缺點是有假陽性，某些點突變可能影響探針結合，影響結果判讀[10]。染色體微陣列技術可以對眾多基因探針的標記、雜交等過程在1 次實驗過程中完成，自動化程度高，數據客觀可靠，但操作要求高。本研究中采用染色體核型分析和染色體微陣列技術同時檢測，既可以一覽此家系成員全部染色體結構，又可以對微小拷貝數異常做出判斷，從而可以對該家系進行個性化遺傳指導及胎兒產前診斷分析。

回顧性分析本研究中該例孕婦，妊娠1 次22q11.2 微重復胎兒后，夫婦雙方同時進行染色體核型分析和染色體微陣列檢測意義重大，尤其在有再次生育需求時。有研究表明，70%的22q11.2 微重復遺傳自表型正常和表型輕微的親代，在明確親本來源后再進行產前診斷，有利于對該家系進行科學的遺傳咨詢及生育指導[11]。對所有22q11.2 微重復病例進行家系調查分析，無論其臨床表現嚴重與否，都是極其重要的，這樣才能更好地理解導致異常表型的機制，從而提供更好的遺傳咨詢。遺憾的是，本例家系調查中夫婦拒絕對生育的第1 個表型正常女孩進行遺傳檢查，從而無法對其進行完整家系分析。考慮到隨訪時此例男嬰才出生2 天，部分臨床癥狀可能遲發或難以發現，研究人員仍將繼續密切跟蹤隨訪。