γ突觸核蛋白表達(dá)與胃癌臨床病理特征相關(guān)性的Meta分析

徐丹 李晶 肖馳 王儒涵 費晶 鞏平

(石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，新疆 石河子 832000)

胃癌(GC)是世界上最常見的惡性腫瘤之一，在所有腫瘤中死亡率占第五位〔1〕，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，國內(nèi)外有關(guān)GC的最新治療方案逐漸增多，但復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移仍是影響患者預(yù)后的重要因素，也是導(dǎo)致GC患者高死亡率的主要原因〔2〕。因此，研究GC侵襲和轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制，將有助于尋求GC診斷和治療的有效靶點。γ突觸核蛋白(SNCG)，也稱為乳腺癌特異性基因(BCSG)1，與α-突觸核蛋白和β-突觸核蛋白一樣，它屬于突觸核蛋白基因家族〔3〕。SNCG蛋白含有127個氨基酸，是一種天然的未折疊蛋白。研究顯示，SNCG在許多腫瘤組織中過表達(dá)，并與其臨床病理特征密切相關(guān)〔4,5〕。但不同文獻(xiàn)對于SNCG表達(dá)對胃腫瘤浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等的影響研究結(jié)論尚不一致，每篇文獻(xiàn)研究病例數(shù)相對較少，且SNCG表達(dá)與GC臨床病理特征的Meta分析目前尚無相關(guān)報道。本研究Meta分析綜合評價SNCG表達(dá)與GC臨床病理特征的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1文獻(xiàn)檢索 以PubMed、EmBase、Web of science、Cochrane Library、CNKI、VIP、萬方和CBM作為檢索的主要來源，以γ突觸核蛋白、胃腫瘤等為中文檢索詞，以gamma-Synuclein、Stomach Neoplasms等為英文檢索詞進(jìn)行檢索，檢索時限為建庫至2019年1月1日。以PubMed檢索為例，詳細(xì)的檢索策略如下：#1 Search “Stomach Neoplasms”〔Mesh〕，#2 Search(((((((((((((((((Neoplasm,Stomach〔Title/Abstract〕)OR Stomach Neoplasm〔Title/Abstract〕)OR Neoplasms,Stomach〔Title/Abstract〕) OR Gastric Neoplasms〔Title/Abstract〕) OR Gastric Neoplasm〔Title/Abstract〕)OR Neoplasm,Gastric〔Title/Abstract〕) OR Neoplasms,Gastric〔Title/Abstract〕) OR Cancer of Stomach〔Title/Abstract〕) OR Stomach Cancers〔Title/Abstract〕) OR Gastric Cancer〔Title/Abstract〕) OR Cancer,Gastric〔Title/Abstract〕) OR Cancers,Gastric〔Title/Abstract〕) OR Gastric Cancers〔Title/Abstract〕) OR Stomach Cancer〔Title/Abstract〕) OR Cancer,Stomach〔Title/Abstract〕) OR Cancers,Stomach〔Title/Abstract〕) OR Cancer of the Stomach〔Title/Abstract〕) OR Gastric Cancer,Familial Diffuse〔Title/Abstract〕，#3 #1 OR #2，#4 Search “gamma-Synuclein”〔Mesh〕，#5 Search((gamma Synuclein〔Title/Abstract〕) OR Persyn〔Title/Abstract〕) OR Synoretin〔Title/Abstract〕，#6 #4 OR #5，#7 #3 AND #6。

1.2納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：1)國內(nèi)外公開發(fā)表的論著和學(xué)位論文，提供包含SNCG與GC臨床病理特征相關(guān)性的原始數(shù)據(jù)；2)所有的病例取材前均未經(jīng)化療、放療及其他可能對SNCG表達(dá)有影響的治療，實驗組均為通過病理學(xué)或細(xì)胞學(xué)檢查明確診斷為GC的患者，對照組均為癌旁正常組織或正常組織。3)各文獻(xiàn)所用的實驗方法均為免疫組化法；4)觀察性研究(病例對照或隊列研究)；5)統(tǒng)計方法應(yīng)用恰當(dāng)，數(shù)據(jù)質(zhì)量可靠，有或可計算出OR值及95%CI。排除標(biāo)準(zhǔn)：1)綜述，評論，會議摘要類文章；2)評價指標(biāo)的界定系數(shù)不符合本文標(biāo)準(zhǔn)；3)重復(fù)報告或者資料雷同；4)采用免疫組化法以外的方法進(jìn)行檢測的文章；5)非人類實驗。

1.3原始文獻(xiàn)篩選和資料提取 篩選文獻(xiàn)由2名研究者按照納入排除標(biāo)準(zhǔn)獨立完成資料提取并交叉核對，如遇意見不合時，則通過討論或參考第3位研究者的意見。數(shù)據(jù)提取主要包括作者研究者姓名、發(fā)表時間、病例組和對照組的數(shù)量、表達(dá)陽性數(shù)量等。如果是同一作者或單位的報道，則僅保留病例數(shù)最大、最全的文獻(xiàn)。

1.4文獻(xiàn)質(zhì)量評價 對納入研究的方法學(xué)質(zhì)量進(jìn)行紐卡斯?fàn)?渥太華量表(NOS)量表評分，評價內(nèi)容主要包括3個方面：選擇、可比性和暴露。每個研究的評價得分為0～9分，由2位評價員按照上述標(biāo)準(zhǔn)獨立進(jìn)行，遇意見不合者，則經(jīng)過討論解決或參考第三者意見。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法 使用Review Manager 5.3進(jìn)行Meta分析，對于SNCG的表達(dá)及與GC臨床病理特征的相關(guān)性，計算OR值及95%CI作為分析統(tǒng)計量，采用χ2檢驗對資料進(jìn)行異質(zhì)性檢驗，如P≥0.05，I2≤50%，則各研究間統(tǒng)計學(xué)異質(zhì)性較小，可采用固定效應(yīng)模型；若P<0.05，I2>50%，則認(rèn)為研究間存在異質(zhì)性，則選用隨機(jī)效應(yīng)模型，并采用逐一排除研究的方法進(jìn)行敏感性分析。此外，當(dāng)Meta分析納入文獻(xiàn)≥10個時使用漏斗圖來判斷是否存在發(fā)表偏倚〔6〕。

2 結(jié) 果

2.1文獻(xiàn)篩選過程 根據(jù)關(guān)鍵詞初步檢索出文獻(xiàn)104篇，根據(jù)文獻(xiàn)題目與摘要剔除重復(fù)文獻(xiàn)35篇，進(jìn)而剔除非人類實驗、綜述類、會議類及不相關(guān)的文題及摘要共計53篇，余下文獻(xiàn)通過閱讀全文后排除內(nèi)容重復(fù)、檢測方法為非免疫組化法的文獻(xiàn)11篇，最終根據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)選取出符合要求的5篇文獻(xiàn)〔7～11〕。根據(jù)《PRISMA聲明》文獻(xiàn)篩選流程圖如圖1。

圖1 薈萃分析中選擇研究的流程

2.2納入研究的基本特征 標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn)納入5篇研究文獻(xiàn)。納入文獻(xiàn)中4個研究〔8～11〕分析SNCG在GC和正常胃黏膜組中的表達(dá)相關(guān)關(guān)系，共395例腫瘤組織，185例正常胃黏膜組。見表1。

表1 薈萃分析中包含的研究特征

2.3Meta分析結(jié)果

2.3.1SNCG表達(dá)在GC和正常胃黏膜組中的表達(dá)水平分析 4個文獻(xiàn)〔8～11〕納入資料中GC組SNCG陽性表達(dá)256例，正常胃黏膜組SNCG陽性表達(dá)31例。對入選研究的結(jié)果進(jìn)行異質(zhì)性檢驗，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=12.52，df=3，P=0.006)；I2=76%，研究間異質(zhì)性較大。采用隨機(jī)效應(yīng)模型合并數(shù)據(jù)。結(jié)果顯示，兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(OR=18.47，95%CI：4.20～81.12，P=0.000 1)，表明SNCG在GC中高表達(dá)，見圖2。

圖2 SNCG表達(dá)在GC和正常胃黏膜組中的表達(dá)陽性率比較

2.3.2SNCG表達(dá)與GC年齡的相關(guān)性分析 按照60歲年齡分組標(biāo)準(zhǔn)納入2個研究〔7，11〕。其中年齡組<60歲156例，≥60歲162例，研究間無統(tǒng)計學(xué)異質(zhì)性(P=0.85，I2=0%)，故采用固定效應(yīng)模型合并數(shù)據(jù)，結(jié)果顯示，兩組間SNCG表達(dá)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(OR=0.77，95%CI：0.48～1.24，P=0.28)。見圖3。

圖3 SNCG表達(dá)與GC患者年齡的相關(guān)性

2.3.3SNCG表達(dá)與GC患者浸潤深度的相關(guān)性 根據(jù)國際腫瘤TNM分期為標(biāo)準(zhǔn)：GC以腫瘤侵犯至固有肌層及以內(nèi)即T1和T2作為淺浸潤組；腫瘤穿透漿膜下結(jié)締組織及以外即T3和T4作為深浸潤組。共有4篇文獻(xiàn)〔7～9，11〕納入本項Meta分析，其中淺層浸潤組(T1+T2)133例，深層浸潤組(T3+T4)332例，研究間異質(zhì)性檢驗，無統(tǒng)計學(xué)異質(zhì)性(χ2=5.8，P=0.12，I2=48%)，故采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析，SNCG表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(OR=0.25，95%CI為0.16～0.40，P<0.000 01)。見圖4。

2.3.4SNCG表達(dá)與GC患者分化程度的相關(guān)性 共有4篇文獻(xiàn)〔7～9，11〕納入本項Meta分析。其中高中分化有212例，低分化、印戒及黏液細(xì)胞癌有253例，異質(zhì)性分析顯示，無統(tǒng)計學(xué)異質(zhì)性(χ2=5.94，P=0.11，I2=49)，故采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行分析。結(jié)果顯示，兩組SNCG表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(OR=0.79，95%CI為0.53～1.18，P=0.25)，故SNCG表達(dá)與GC的分化程度無相關(guān)性。見圖5。

2.3.5SNCG表達(dá)與GC患者有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性分析 共有5篇文獻(xiàn)〔7～11〕納入本項Meta分析。其中無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的有173例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的有312例，GC內(nèi)部存在統(tǒng)計學(xué)異質(zhì)性(χ2=11.94，P=0.008，I2=75%)，故采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析。結(jié)果顯示，兩組SNCG表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(OR=0.19，95%CI為0.07～0.51，P=0.000 9)，故SNCG表達(dá)與GC患者有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。見圖6。

2.3.6SNCG表達(dá)與GC患者臨床分期的相關(guān)性研究 共有2篇文獻(xiàn)〔7，9〕納入本項Meta分析。其中臨床Ⅰ～Ⅱ期有49例，臨床Ⅲ～Ⅳ 期有101例，內(nèi)部無統(tǒng)計學(xué)異質(zhì)性(χ2=0.00，P=0.99，I2=0%)，故采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析，GC兩組SNCG表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(OR=0.03，95%CI為0.01～0.08，P<0.000 01)。見圖7。

圖4 SNCG表達(dá)與GC患者浸潤深度的相關(guān)性

圖5 SNCG表達(dá)與GC患者分化程度的相關(guān)性

圖6 SNCG表達(dá)與GC患者有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性

圖7 SNCG表達(dá)與GC患者臨床分期的相關(guān)性

2.4納入研究的偏倚評估及敏感性分析 所有納入文獻(xiàn)采用逐一排除的方法進(jìn)行敏感性分析，任一納入的研究被排除后在相應(yīng)的效應(yīng)模型中數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析結(jié)果與原來的相同，OR值相似，說明納入文獻(xiàn)穩(wěn)定性較好。

3 討 論

SNCG主要分布于神經(jīng)系統(tǒng)。SNCG最早發(fā)現(xiàn)于人乳腺癌cDNA文庫，已在乳腺癌中證實其具有促進(jìn)乳腺癌浸潤和轉(zhuǎn)移的作用〔12〕。近來在膽管癌、卵巢癌和結(jié)直腸癌等惡性腫瘤中也發(fā)現(xiàn)SNCG的異常高表達(dá)，在晚期腫瘤中表達(dá)尤其升高，提示其在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中喪失了原先的組織特異性，有望成為一個有效的腫瘤標(biāo)志物。因此，高表達(dá)的SNCG是一種潛在的癌基因，是引發(fā)腫瘤的重要原因之一。目前國內(nèi)外資料均顯示，過表達(dá)的SNCG不僅參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展，還與腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移和預(yù)后密切相關(guān)〔7～14〕。本研究提示SNCG過表達(dá)對GC淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有促進(jìn)作用。Hibi等〔15〕通過體內(nèi)研究表明，SNCG與胰腺癌患者的神經(jīng)周圍侵襲及其他主要侵襲參數(shù)(包括腫瘤大小、血管侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和UICC分期)顯著相關(guān)，此外，使用人胰腺癌細(xì)胞系進(jìn)行神經(jīng)侵襲和原位移植的小鼠模型中的SNCG基因沉默與神經(jīng)侵襲及肝和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(胰腺癌細(xì)胞的主要歸巢器官)的顯著減少相關(guān)，與本研究結(jié)果一致。而2008年董勇〔16〕在乳腺癌的研究提示，雌激素受體(ER)及SNCG狀況與新輔助化療療效相關(guān)，通過多因素Logistic回歸進(jìn)一步闡明SNCG與乳腺癌新輔助化療敏感性之間有著顯著聯(lián)系。所以，以SNCG為靶點的靶向治療可能在胃腫瘤綜合治療中取得一定突破。

除了Stata、SPSS等Meta分析常用軟件外，Revman5.3軟件作為Cochrane系統(tǒng)評價的標(biāo)準(zhǔn)化軟件，特點包括操作簡單，可對錄入的計數(shù)資料、計量資料等不同類型數(shù)據(jù)進(jìn)行Meta分析，并以森林圖的形式展示〔17〕。關(guān)于SNCG表達(dá)與GC臨床病理關(guān)系的這5篇文獻(xiàn)采用Revman5.3軟件，各文獻(xiàn)代表性良好。本研究的局限性在于雖然納入研究的方法為免疫組化法，但是該方法涉及的抗體來源、生產(chǎn)廠家、稀釋濃度及評定標(biāo)準(zhǔn)并非完全一致，也有可能影響Meta分析的結(jié)果，因此需要高質(zhì)量的證據(jù)來完善該結(jié)果。

綜上，本研究結(jié)果顯示，過表達(dá)的SNCG與GC的浸潤深度，臨床分期，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，此結(jié)果將可能為GC的早期診斷、預(yù)后評估及分子靶向治療奠定基礎(chǔ)。