MDR1基因外顯子26多態性與兒童白血病關系的研究

田園青 曾慶曙

安徽醫科大學第一附屬醫院,安徽省合肥市 230000

急性淋巴細胞白血病(ALL)是一種起源于淋巴細胞的B系或T系細胞在骨髓內異常增生的惡性腫瘤性疾病，其兒童期(0～9歲)為發病高峰， ALL高危人群的早期發現對于治療及預后有著重要的意義。人類多藥耐藥基因1(MDR1)位于7號染色體長臂，編碼P-糖蛋白(P-170)，該蛋白位于細胞膜上，有藥物泵作用，將進入細胞的藥物泵出細胞外而使細胞產生耐藥。研究表明MDR1外顯子26的多態性與很多腫瘤的發病相關，如肝癌、大腸癌、子宮內膜癌、血液系統惡性腫瘤等[1]。近年來，MDR1外顯子26的多態性與兒童ALL易感性之間的關系已被廣泛研究，但研究者們仍未得出統一的結論，本文即通過全面的文獻檢索和客觀的分析來評價兩者之間的關系，得出較為可靠的結論。

1 資料與方法

1.1 文獻篩選 文獻檢索的數據庫包括PubMed、CBM、Cochrane、維普數據庫、知網數據庫和萬方數據庫等，檢索的文章截止發表日期為2019年7月30日，檢索的關鍵詞包括“急性白血病(Acute leukemia，AL)”“多藥耐藥基因1(Multidrugresistancegene1，MDR1，ABCB1)”“基因多態性(Genetic polymorphism, mutation, variants)”。

1.2 文獻的納入和排除標準 (1)納入標準：①文獻是關于MDR1外顯子26基因多態性和ALL易感性關系的病例對照研究；②病例組的ALL病人均診斷明確，且有合格的對照組；③文獻中包含病例組和對照組的不同基因型頻率的數據。(2)排除標準：①納入的文獻不是病例對照研究，如系統回歸或只有病例組而沒有對照組等；②文獻中無法獲得詳細的基因型頻率；③文獻質量根據NOS評分后屬于低質量的文獻；④文獻中的數據存在明顯的不可靠性。

1.3 數據提取和質量評價 文獻中提取的數據包括第一作者，文章發表的年份，研究人群的國家、種族，病例組的年齡，對照組的來源，病例組及對照組基因型頻率(CC、CT、TT)，HWE平衡檢驗等。文獻的質量評價依據NOS質量評分表[the Newcastle-Ottawa scale (NOS)]分為高質量(評分=9、8)、中等質量(評分=7、6、5)以及低質量(評分≤4)文獻，低質量文獻在文章初篩時已被排除。數據提取和文章質量評價過程由兩位獨立的人員進行，任何不同之處和有爭議的地方均會通過討論最終達成一致。

1.4 統計學方法 本文以OR值和95%CI為效應指標，采用STATA12.0作為分析軟件。通過χ2檢驗的P值來判斷對照組基因型分布的HWE平衡，通過χ2檢驗依賴的Q檢驗來判斷病例組和對照組之間的異質性，若Q檢驗提示兩者之間無明顯異質性(P>0.1)，則采用固定效應模型，否則將采取隨機效應模型。異質性的大小根據I2的數值來判定，一般來說，當I2<50%時采取固定效應模型，當I2>50%時采用隨機效應模型。同時，本文對研究人群的國家、種族，病例組的年齡，對照組的來源等進行了亞組分析，并采取逐篇排除法檢測異質性的來源，最后計算文章的發表偏倚，若文章存在發表偏倚則進一步采取剪補法確定其來源，進而得出較為可靠的結論。

2 結果

2.1 納入文獻特征分析 經檢索共計有206篇相關研究的文獻，根據納入和排除標準逐步篩選，最終獲得13篇符合要求的文章[2-14]，總計1 955個病例組和1 877個對照組。納入文章的基本特征如表1所示。

表1 納入文章特征

對納入文章進行質量評價，其中有5篇為中等質量研究[5,6, 9,10,14]，其余均為高質量研究。對納入文章進行HWE檢測，當P>0.05時認為對照組符合HWE平衡，經檢測共有3篇不符合HWE平衡[2,7,10]，其余10篇均符合HWE平衡。

2.2 系統評價結果 分析采用的基因型為：TT vs CC,(CT+TT)vs CC,(CT+CC) vs TT,(CC+TT) vs CT,T vs C，當P均<0.05時記為差異有統計學意義，計算得出的結果如表2所示。

表2 5種基因型的效應指標

結果表明僅在(CT+CC) vs TT和(CC+TT)vs CT這兩個模型中，差異有統計學意義，對其進一步行亞組分析，結果如表3所示。結果顯示，當種族為亞洲人、對照組為社區來源、符合HWE平衡以及納入的文獻為高質量研究時，亞組分析的結果可表明MDR1外顯子26的基因多態性與兒童ALL易感性之間存在一定的關系。

表3 亞組分析

2.3 敏感性分析 分析表明，當逐篇排除納入文獻時計算結論會發生反轉，如當排除Jamroziak et al[2]這篇文章后，剩余文章計算的結果為OR值0.630 179 65，95%CI 0.386 785 16～1.026 736 4，差異無統計學意義。在另一種基因型(CC+TT) vs CT中，也觀察到同樣的問題。在這兩種基因模型中進一步行剪補法分析，得出的結論相同，可知以現有數據分析得出的結論并不穩定。

2.4 發表偏倚檢測 用Egger法進行發表偏倚檢測，結果表明在上述兩個遺傳模型中不存在發表偏倚(P>0.05)。

3 討論

盡管單個位點的核苷酸突變在大多數情況下不會使表達的序列發生改變，但一些基因突變已被發現與兒童ALL的易感性密切相關。有研究表明[15]，MDR1外顯子26位點的單核苷酸多態性與其表達產物P-糖蛋白(P-gp)的功能相關，其機制可能是通過影響表達產物P-gp的折疊及其插入細胞膜的過程而使其功能各異。P-糖蛋白是一種相對分子質量為170kD的跨膜糖蛋白，既能與藥物結合，又能使細胞內藥物泵出細胞外，是細胞的一個重要防御機制，可能因P-糖蛋白功能的改變降低了細胞的防御機制，導致其與兒童ALL也有一定的關系。

本篇文章研究發現MDR1基因外顯子26多態性與兒童ALL的易感性之間并沒有明確的關系，分析結果顯示僅在(CT+CC) vs TT和(CC+TT) vs CT這兩個模型中差異有統計學意義，可能作為兒童ALL的易感因素。但進一步分析表明，目前的結果具有較高的異質性，異質性來源可能是種族、對照組來源以及是否符合HWE平衡等，若以后有新的符合納入標準的研究出現，則結論可能發生反轉。但本文仍存在不足，首先兒童ALL的發病可能是多個基因相互作用的結果，其次本篇研究無法對病例組的接觸暴露史進行分析，如兒童的生活環境等因素也在兒童ALL的發病中起到了重要的作用。

總之， MDR1外顯子26多態性與兒童ALL易感性僅在(CT+CC) vs TT和(CC+TT) vs CT這兩個模型中可能存在關聯，進一步分析發現較高的異質性可能來源于種族及對照組來源等，敏感性分析提示目前研究的結論穩固性不佳，后期仍需更多數據擴大研究，以得出可靠的結論。