酶聯免疫吸附法血清免疫性抗體檢測在女性不孕癥診斷中的應用價值

張宏威

（河南省南陽市第一人民醫院 檢驗科，河南 南陽 473000）

不孕不育為生殖醫學重點研究項目，相關研究顯示，我國已婚夫婦中有10%～15%存在不孕不育，其中與免疫性抗體相關的占40%左右，而女性不孕占25%～36%［1-2］。目前，國內報道的多種免疫性抗體與女性不孕癥密切相關［3］。本研究通過對本院100 例女性不孕癥患者進行血清免疫性抗體檢測，分析抗滋養層抗體（anti-trophozoite antibodies, ATAb）、 抗 精 子 抗 體 （anti-sperm antibodies,ASAb）、抗人絨毛膜促性腺激素抗體（antihuman chorionic gonadotropin antibodies,AhCGAb）、抗子宮內膜抗體（anti-endometrial antibodies,AEmAb）、抗透明帶抗體（anti-zona pellucida antibodies,AZpAb）5 種血清免疫性抗體在女性不孕癥的診斷價值，旨在為臨床診治女性免疫性抗體相關不孕癥患者提供參考，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

經本院倫理委員會審批通過，選取本院100 例女性不孕癥患者作為不孕組（2017 年2 月至2018 年12 月），年齡 23～34 歲，平均（27.68±2.29）歲；不孕時間2.5～9.0 年，平均（5.26±1.27）年；體重指數 （body mass index, BMI）：21.5～27.7 kg/m2，平均（23.43±0.95）kg/m2；月經周期 27～33 d，平均（29.39±1.08）d。另選同期健康體檢女性75 例作為健康對照組，年齡22～35 歲，平均（28.13±2.57） 歲；BMI：21.8～28.1 kg/m2，平均 （23.69±0.91） kg/m2；月經周期 28～33 d，平均 （30.10±0.97）d。兩組基線資料（BMI、月經周期、年齡）比較差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 選例標準

1.2.1 納入 不孕組患者均為婚后夫婦同居2 年以上，未采取避孕措施而未能懷孕者，非男方原因導致的不孕；健康對照組體檢結果均為正常；均無免疫疾病臨床表現；所有研究對象均知曉本研究，已簽署同意書。

1.2.2 排除 精神疾病患者；惡性腫瘤患者；有明確免疫性疾病表現者；血液系統疾病患者；嚴重心、腦、肝、腎功能障礙者；傳染性疾病患者。

1.3 方法

兩組均抽取晨起空腹靜脈血3 mL，采用無菌試管盛裝，置于醫用離心機上，半徑8 cm，以3 000 r/min 轉速離心處理10min，取血清，置于-20℃冷藏室內待檢，于采血后7 d 內完成檢測，采用酶聯免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA） 法 測 定 血 清 ATAb、 ASAb、 AhCGAb、AEmAb、AZpAb 水平，酶聯免疫酶標儀、相關試劑購自北京普贊生物技術有限公司，檢測由專業人員嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.4 診斷標準

分析血清 ATAb、ASAb、AhCGAb、AEmAb、AZpAb 在分析儀掃描 450 nm 波長的吸光度（optical density, OD），以OD＞1 為陽性判定標準，聯合檢測以任一結果為陽性則判定為陽性。

1.5 觀察指標

① 兩 組 血 清 ATAb、 ASAb、 AhCGAb、AEmAb、AZpAb 的陽性率；②血清ATAb、ASAb、AhCGAb、AEmAb、AZpAb 單獨及聯合檢測女性不孕癥的免疫性抗體陽性檢出率。

1.6 統計學方法

數據處理采用SPSS 22.0 軟件，計數資料以百分率（%）表示，采用χ2檢驗；P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組5 種血清免疫性抗體的陽性率對比

不 孕 組 血 清 ATAb、 ASAb、 AhCGAb、AEmAb、AZpAb 的陽性率均較健康對照組高，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 免疫性抗體陽性檢出率對比

血 清 ATAb、 ASAb、 AhCGAb、 AEmAb、AZpAb 聯合檢測女性不孕癥的免疫性抗體陽性檢出率（42.00%）高于各項血清免疫性抗體單獨檢測 （26.00%、 28.00%、 22.00%、 23.00%、21.00%），差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表1 兩組5 種血清免疫性抗體的陽性率對比 例（%）

表2 免疫性抗體陽性檢出率對比 （n=100）

3 討論

目前，女性不孕癥為婦科常見疾病之一，導致女性不孕癥因素較多，如卵巢功能異常、內分泌紊亂、子宮生理解剖結構及功能異常等，隨著臨床對女性不孕癥研究的深入發現，女性生殖免疫性抗體也是引起不孕的重要因素之一［4-5］。

近年來，我國女性不孕癥患者人數逐漸增加，女性生殖免疫性抗體導致的不孕也越來越受臨床關注。女性生殖免疫性抗體主要通過影響精子活性、受精卵著床、精卵結合、卵巢排卵、胎盤和胚胎發育等途徑影響女性妊娠，影響上述生殖作用 的 抗 體 為 ATAb、 ASAb、 AhCGAb、 AEmAb、AZpAb 及抗卵巢抗體（antiovarian antibodies,AOAb）［6］。其中 ATAb 能增強吞噬細胞對配子、胚胎的毒性作用，從而導致胎盤發育障礙，是引起流產的重要原因之一。ASAb 能刺激精子發生凝集反應，降低精子活力，導致精子存活能力、穿透力受損，影響精子在女性生殖道內的運輸及與卵子結合，進而影響妊娠。AhCGAb 可導致配子停止發育，或引起習慣性流產。AEmAb 可損傷子宮內膜腺體功能，從而影響受精卵著床及胚胎發育。AZpAb 可與透明帶結合，從而影響精子與卵泡之間的信號傳遞。此外，相關研究指出，AOAb 可造成臨床細胞免疫損傷，引起不孕癥患者雌激素水平降低，影響卵泡正常發育，致使患者排卵數、排卵率明顯降低，從而導致不孕，但其在女性不孕癥患者中的陽性率僅為6.11%，占比較低［7］。因此，本研究未對血清AOAb 在女性不孕癥診斷方面的價值進行探討。本研究結果中，不孕組血清ATAb、ASAb、AhCGAb、AEmAb、AZpAb 的陽性率均顯著高于健康對照組（P＜0.05），與相關研究［8］結果一致，且5 種血清免疫性抗體聯合檢測女性不孕癥的陽性檢出率顯著高于各項血清免疫性抗體單獨檢測（P＜0.05）。可見，免疫性抗體是導致女性不孕癥的重要原因之一，聯合檢測女性不 孕 癥 患 者 血 清 ATAb、 ASAb、 AhCGAb、AEmAb、AZpAb，能顯著提高免疫性抗體陽性檢出率。

綜上可知，免疫性抗體是導致女性不孕癥的重要原因之一，采用血清ATAb、ASAb、AhCGAb、AEmAb、AZpAb 聯合檢測女性不孕癥患者，能顯著提高免疫性抗體陽性檢出率，可為臨床診治女性不孕癥提供指導，具有較高應用價值。