李 彥,賈燕午
(河南省三門峽市中心醫院 檢驗科,河南 三門峽 472000)
系統性紅斑狼瘡是臨床上常見的一種自身免疫性疾病,由于機體免疫功能失常,不能正確識別自身組織,產生大量抗體及免疫復合物而造成機體損傷,主要累及皮膚、關節、神經、血液及身體重要臟器[1-2]。患者早期常表現為發熱、全身乏力及其他非特異性癥狀,在遭受感染、精神應激等情況可加重病情,青年女性為多發人群[3-4]。系統性紅斑狼瘡發病與遺傳、感染、環境等因素均有相關性,但其發病原因仍未闡明,因此該病在臨床上尚無治愈方法,只能通過早期診斷和治療將傷害降至最低[5-6]。本研究分析系統性紅斑狼瘡患者抗核抗體(antinuclear antibodies,ANA)與抗可溶性抗原(extractable nuclear antigen,ENA)抗體譜檢測結果,現報道如下。
選擇本院2016年12月至2018年12月診治的100例系統性紅斑狼瘡患者為A組,同期收集92例其他類型的自身免疫病患者為B組,86例體檢正常健康者為C組。本研究開展前獲得醫院倫理委員會批準,且征得檢測人員同意。A組納入標準:①確診為系統性紅斑狼瘡患者;②近3周內無阿片類藥物使用史;③臨床資料完整,對本研究配合者。A組排除標準:①合并心血管、糖尿病等慢性病患者;②患有腫瘤者;③合并全身性嚴重感染者。B組中干燥綜合征17例,結締組織疾病36例,硬皮病7例,類風濕性關節炎32例。三組年齡、性別等一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。見表1。

表1 三組一般資料比較
所有研究對象(A組、B組、C組)均在采血前一天晚23∶00以后禁食禁水,于檢測當日8∶00~9∶00采取靜脈血,靜置15~20 min后分離血清。具體參數為:轉速4 000 r/min,離心時間10 min。若當日未能檢測完所有血清,須將未檢測血清放置于-20℃環境保存,并于3 d內檢測完畢。
1.3.1 ANA檢測 將稀釋后的血清(1/100、1/320、1/1 000)置入反應區,反應30 min,使用磷酸鹽緩沖溶液進行沖洗并浸泡5 min,加入具有熒光標記的抗人免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)G抗體,反應30 min,再次使用磷酸鹽緩沖溶液進行沖洗并浸泡5 min,取出使用甘油進行封片處理,在490 nm波長下觀察ANA熒光及熒光核型,抗體滴度>1/100即為陽性。
1.3.2 抗ENA抗體檢測 檢測三組血清內15中特異性抗體,使用EUROScan軟件自動判別,灰度值>10即為陽性。聯合檢測中只要有一種抗體陽性即判定為抗ENA抗體陽性。
本次研究應用SPSS 20.0統計學軟件對相關數據進行統計學處理。計量資料以均數±標準差(±s)表示,采用方差分析和t檢驗;計數資料以百分率(%)表示,采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。
A組和B組ANA與抗ENA抗體譜聯合檢測陽性率均高于C組(P<0.05),且抗ENA抗體譜中dsDNA、His、Sm、nRNP/Sm、Rib和Nuc在A組的陽性率高于B組(P<0.05),見表2。
在ANA滴度為1/1 000、1/320、1/100時,A組和B組的陽性檢出率均高于C組(P<0.05),見表3。
聯合檢測靈敏度為92.00%,特異度為89.74%,見表4。

表2 三組ANA與抗ENA抗體譜陽性率比較 例(%)

表3 三組ANA滴度檢測結果比較 例(%)

表4 各指標檢測靈敏度和特異度比較 %
ANA是抗核酸抗原抗體的簡稱,又被稱為抗核抗體,屬于體內一種自身抗體。ANA主要見于體內免疫球蛋白(IgM、IgMG、IgMD等)中,它能夠識別組織中細胞核成分,常見于自身免疫性疾病患者血清中[7]。有研究指出,ANA可作為風濕性疾病病情進展和預后的觀察指標,可根據其滴度水平對自身免疫性疾病做初步篩選[8]。抗ENA抗體是抗漿核糖核蛋白和核糖核蛋白的自身抗體,是由抗U1-RNP抗體、抗Sm抗體、抗r-RNP抗體及其他抗體組成的抗體譜,其與病情進展和活動性無明顯關系,但對診斷結締組織性疾病具有較大意義[9]。
本研究發現,A組和B組的ANA與抗ENA抗體檢測陽性率均高于C組,提示患有自身免疫性疾病患者體內ANA與抗ENA抗體異常率較健康人群高,ANA與抗ENA抗體能有效分辨自身免疫性疾病和健康人群,具有較高的敏感度[10]。本次研究還發現,ANA滴度為1/320時,A組和B組檢測陽性率均較高,提示ANA滴度為1/320時指標檢測最為敏感,相較于其他滴度具有更高的檢出率。本研究結果顯示,在ENA抗體譜中,dsDNA、His、Sm、nRNP/Sm、Rib和Nuc在A組和B組間差異有統計學意義,提示ENA抗體譜能特異性分辨系統性紅斑狼瘡性自身免疫病和其他類型的自身免疫性疾病,具有較高的特異度。綜合比較3組ANA與抗ENA抗體的靈敏度和特異度,可以發現ANA抗體特異度較低,僅可作為系統性紅斑狼瘡的初篩指標,抗ENA抗體特異度較高,可在系統性紅斑狼瘡患者初篩完成后作為確診參考指標[11]。A組中也存在抗ENA抗體陰性情況,提示抗ENA抗體陰性不能確診為健康人群,原因可能與血液中存在一定的DNA抗原有關,也可能與早期患者或病情程度較輕患者具有將抗體降至正常水平的能力有關[12]。
綜上所述,自身抗體聯合檢測能提高系統性紅斑狼瘡的確診率,有助于系統性紅斑狼瘡患者的早期診斷和病情監測。