應用免疫熒光法 診斷豬流行性腹瀉的探討

文/ 招遠市玲瓏畜牧獸醫站 楊金寶 王亮

豬流行性腹瀉是豬養殖過程中十分常見的一種疾病，疾病發生后會導致病豬出現不同程度的感染、腹瀉現象，甚至在病情較為嚴重的情況下可導致脫水現象，威脅到病豬的生命安全，在增加病豬死亡率的同時給養殖戶帶來嚴重的經濟損失；因此如何對豬流行性腹瀉病做出有效的診斷，就對于早期治療和預防工作的開展具有重要意義。

一、資料和方法

一般資料。在2017 年1 月到2019 年2 月之間選擇40 頭疑似為流行性腹瀉的病豬作為研究對象，病豬死前伴隨嚴重的腹瀉、精神不佳、喜臥等癥狀，病豬中公豬24 頭，母豬16 頭，其體重為14 ～52 千克，平均體重為（36.21±2.03）千克；本次研究開始前已經和相關部門、養殖單位取得了溝通，其均表示知情且支持本次研究的開展。

方法。對病豬進行解剖，選擇其部分小腸作為冰凍切片，或者選擇小腸黏膜實施抹片，將其標本置于自然環境中風干，風干后使用丙酮進行固定，而后加熒光抗體進行染色，對其進行充分水洗后封蓋，此后實施鏡檢，并得出相關的檢查結果。此外對病豬均實施電鏡檢查，以獲得相關檢查結果和本次研究的價值進行對比。

觀察指標。觀察本次研究檢查結果，同時將獸醫研究所所得病理檢查結果作為金標準，統計本次所用方法的檢測準確率。其中免疫熒光法和病理檢查的符合例數，除以研究總數量后乘以百分之百記為檢測準確率。

統計學分析。將SPSS25.0 作為本次數據處理軟件，使用n 統計本次研究中計數資料，并采用χ2 實施檢驗；檢驗后P ＜0.05 均表示數據差異顯著（P＜0.05）。

二、結果

病理檢查對40 頭病豬均作出確診，診斷為豬流行性腹瀉，免疫熒光法的診斷準確率則高于電鏡檢查的準確率，且組間對比存在顯著差異，其數據詳情見下表1。

表1 研究診斷詳細情況【n(%)】

三、討論

豬流行性腹瀉屬于一種常見疾病，病發后主要以病豬的腹瀉為主要癥狀，同時病情的傳播較慢，這使得臨床診斷存在一定困難；加之豬養殖過程中常見的傳染性胃腸炎等疾病，均和豬流行性腹瀉的癥狀存在類似之處，因此臨床更加難以通過流行病學和臨床癥狀等對疑似病豬實施檢查，此時借助相關的實驗室診斷就具有重要意義。

目前臨床可應用于豬流行性腹瀉的相關診斷方法較多，包括微量血清中和實驗、病毒的分離鑒定、免疫電鏡檢查和免疫熒光診斷等方法，其中免疫電鏡檢查和免疫熒光診斷方法是相對較為普及的兩種方法，其對于實驗操作的嚴格性一般，且對于操作者的專業性和嫻熟程度要求尚可，故而能夠在臨床中普遍使用。其中電鏡法的操作十分簡單、能夠直觀的獲得較為準確的定性結果，但是該方法需要較為昂貴的電鏡設備才可較快獲得結果，否則只能在3 ～7 天才能得到準確的報告，此時受到疾病流行性的影響，其容易發生蔓延現象。而免疫熒光法的檢查則能夠在短時間內快速獲得相關的檢查結果，同時不會和豬傳染性胃腸炎病毒、輪狀病毒、豬細小病毒、大腸桿菌等出現交叉反應，故而診斷結果準確性更高，這一點在本次研究的結果中得到了證實，即免疫熒光法檢查結果的準確率為92.5%，其中電鏡法和病理檢查結果準確率、免疫熒光法檢查準確率存在顯著差異，且差異具有統計學意義（P＜0.05）。而現有實驗認知下，免疫熒光法的實施需要以病豬的小腸等部位作為標本，這使得實驗無法在疾病初步診斷時廣泛應用，但是基于豬流行性腹瀉的傳染性，一旦有病豬出現死亡現象后，及時對其解剖和檢查，則能夠對其死因做出及時反映，并為其他病豬的治療和干預提供指導，這對于疾病廣泛蔓延的控制工作開展具有重要意義，因此可使得養殖戶經濟效益損失得到減小，故而值得推廣應用。

綜上所述，應用免疫熒光法診斷豬流行性腹瀉的價值顯著，能夠為相關防疫工作的開展提供指導，因此具有推廣應用價值，以期通過診斷和防疫降低豬流行性腹瀉發生帶來的經濟損失。